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      • SCIESCOPUSKCI등재
      • KCI등재

        고추 순도검정을 위한 효율적 DNA 검출방법

        장인옥(Inok Jang),박효근(Hyo Guen Park) 한국원예학회 2007 원예과학기술지 Vol.25 No.3

        RAPD 방법의 신속성, 편의성 및 경제성을 향상시키기 위하여 시료로부터 DNA를 추출하는 방법을 크게 개선하였다. 현행의 CTAB 방법과 Yu 방법은 최소한 24시간이 소요되며 또한 여러 가지 복잡한 기구와 처리가 필요하여 민간 종묘회시에서 손쉽게 이들을 사용하기가 부적합하였지만, 본 연구를 통해 고추종자로부티 농도 0.3-0.7N인 NaOH와 Tris-HCl을 이용하여 아주 간단히 DNA를 추출하는 방법을 개발하였는데, 이에 소요되는 시간은 시료 40개당 l시간이내이며 고가의 기구와 시약이 필요지 않았다. The study was performed to develop an efficient, convenient and economical DNA extraction method for the determination of the genetic purity of F₁ hybrid seeds essential for seeds production in chili pepper (Capsicum anmuum L.). The RAPD method has been developed and comes into use as a means of testing the genetic purity of chili pepper seeds. For the improvement of speed, easy access and cost efficiency, the DNA extracting method was greatly improved by using NaOH. There was no difference among the RAPD profiles of DNA extracted by CTAB method, Yu method, and NaOH method. NaOH was effective for amplifying DNA at the range of 0.3 - 0.7 N. The ×100, ×200, and ×1,000 dilution of DNA by Tris was not different for amplifying the specific DNA but DNA was not amplified at the ×10 dilution. When DNA extracted by NaOH method was diluted by distilled water, it could also be amplified. While CTAB or Yu method took at least 18 hours, required various complicated devices and was difficult to perform, NaOH method took less than 1 hour and made easy access possible. In conclusion, NaOH method was found applicable for testing the purity of F₁ seeds.

      • KCI등재

        전기영동을 대체하는 효과적인 고추 순도검정 방법

        장인옥(Inok Jang),박효근(Hyo Guen Park) 한국원예학회 2007 원예과학기술지 Vol.25 No.4

        본 실험은 고추 일대교잡종 종자의 품질 향상을 위하여 국내외에서 생산된 종자들에 대한 유전적인 순도를 검정하는 방법을 개발하기 위하여, 최근에 개발되어 사용되기 시작한 RAPD(random amplified polymorphic DNA) 방법을 정확성, 재현성, 신속성, 경제성, 편의성 및 실용성 등의 측면에서 획기적으로 개선하기 위해 수행하였다. random decamer primer를 사용할 때에는 특이밴드이외에도 여러밴드가 생겨나기 때문에 필수적으로 전기영동과정을 거쳐야 순도검정이 가능하였지만, SCAR primer를 사용하면 오직 단일 친특이밴드만이 생기므로 PCR과정에서나 직후에 DNA 염색시약(ethidium bromide)을 사용하여 PCR tube 혹은 multiwell plate에서 직접 반응을 관찰하여 전기영동과정 없이도 용이하게 종자의 순도검정을 할 수 있게 되었다. 민간종묘회사에서 임의로 불순 종자를 혼입한 시료에 대하여 새로운 DNA 추출방법(NaOH 방법), SCAR primer 및 전기영동과정을 생략한 검정방법 등을 적용해 본 결과, 종묘회사에서 혼입시킨 불순 종자를 정확히 판별할 수 있었다. 모계특이표지인 DMM-1과 DMM-8을 사용하여 실제 순도검정한 결과 잎 200매와 종자 200립에서 전기영동을 행하지 않고 PCR과정에 EtBr을 사용하므로써 tube내에서 순도검정이 가능하였다. The study was performed to develop an efficient DNA detection method for the determination of the genetic purity of F₁ hybrid seeds essential for seeds production in chili pepper (Capsicum annuum L.). Testing methods of genetic purity of seeds, such as field test, electrophoresis of isozymes, DNA marker etc, are in current use. Recently the RAPD method has been developed and come into use as a means of testing the genetic purity of chili pepper seeds. Experiments were performed to make an improvement on the RAPD method for detecting DNA without electrophoresis. The accuracy, swiftness, easy access, practicability and cost efficiency of RAPD method were greatly improved after making SCAR primers. Specific SCAR primers made it possible to detect contaminated seeds without electrophoresis by PCR with mixture containing EtBr in 0.5 ㎖ tube, or direct visualization of amplified DNA fragment with EtBr at multiwell plate. Blind tests were conducted to confirm the applicability of this study. In the practical tests, P₁-specific primers (DMM-1 and DMM-8) could detect contaminated seeds without electrophoresis by PCR with mixture containing EtBr among 200 leaves and 200 seeds. P₂-specific primers (DMP-1 and DMP-2) could detect contaminated seeds with electrophoresis but not by PCR with mixture containing EtBr among 200 leaves and 200 seeds which seed company had supplied after adding other variety to samples, although it can not occur in real situation to harvest seeds. In conclusion, direct detection of the amplified DNA by PCR with mixture containing EtBr was found applicable for testing the purity of F1 seeds because it reduced the total test time from 24 hours to about 4 hours on 40 samples and improved the accuracy, easy access, cost efficiency and practicability.

      • KCI등재

        한국인 이민 1.5세대 청소년의 민족정체성과 문화적응 스트레스가 심리적 적응에 미치는 영향

        장인옥(Jang, Inok),김현아(Kim, Hyun-Ah) 한국청소년정책연구원 2014 한국청소년연구 Vol.25 No.1

        본 연구는 한국인 이민 1.5세대 청소년의 민족정체성과 문화적응 스트레스가 심리적 적응(삶의 만족, 불안, 우울, 위기 및 일탈행동)에 어떠한 영향을 미치는 지 살펴보고자 하였다. 연구대상은 만 5세에서 17세 사이에 캐나다에 부모를 따라 이민 온 한국인 이민 1.5세대 청소년 150명으로 현재 나이 만 15세에서 24세 이하 평균 연령은 19.2세였다. 자료수집 기간은 2012년 11월-2013년 1월까지였고, 연구도구는 Diener 등(1985)의 삶의 만족 척도, Bean 등(2007)의 HSCL-37, Phinney(1992)의 민족정체성 척도, Fuertes와 Westbrooks(1996)의 문화적응 스트레스 척도를 사용하였다. 민족정체성과 문화적응 스트레스가 심리적 적응에 미치는 상대적 영향력의 크기를 순서대로 파악하기 위해 위계적 회귀분석을 실시하였다. 연구 결과 문화적응 스트레스가 심리적 적응의 중요한 예측인자인 것으로 나타났다. 구체적으로 한국인 이민 1.5세대 청소년의 삶의 만족에 영향을 미치는 요인은 가족적 요인의 문화적응 스트레스였다. 불안에 영향을 미치는 요인은 가족적 요인과 태도적 요인의 문화적응 스트레스였다. 그 외 우울, 위기 및 일탈행동, HSCL-37 전체 등에 영향을 미치는 요인도 가족적 요인의 문화적응 스트레스인 것으로 예측되었다. 한편 민족정체성은 심리적 적응의 모든 하위요인에 유의한 영향을 미치지 않는 것으로 분석되었다. 본 연구의 결과를 통해 가족적 요인의 문화적응 스트레스가 한국인 이민 1.5세대 청소년의 심리적 적응에 가장 큰 영향을 미치고 있음을 예측해볼 수 있었다. 이러한 결과에 대한 논의와 함께 본 연구의 제한점과 의의가 검토되었다. This study examined the influence of ethnic identity and acculturative stress of 1.5-generation, Korean immigrant adolescents living in Canada upon their levels of psychological adjustment (satisfaction with life, anxiety, depression, and externalizing behavior). The participants in this survey consisted of 15-to 24-year-old Korean immigrant adolescents who had moved to Canada with their parents at the ages of between 5 and 17. A total of 150 samples(M = 19.2) was statistically processed by means of stepwise multiple regression analysis, and the results were as follow: 1) high familial stress?one of the sub-factors of acculturative stress (social, attitudinal, familial, and environmental stress) ?was the significant predictor for low life satisfaction levels, 2) high familial and attitudinal stress were two significant predictors for high anxiety levels, and 3) familial stress was a significant predictor for high levels of depression, externalizing behavior, and overall HSCL-37. On the other hand, the results indicated that ethnic identity does not have an influence upon any of the sub-factors of psychological adjustment. The implications and limitations of this study are also discussed.

      • KCI등재

        형질전환 토마토 후대 분리세대에 활용할 수 있는 비파괴적 제초제 생물검정법 개발

        안순영(Soonyoung Ahn),장인옥(Inok Jang) 한국원예학회 2007 원예과학기술지 Vol.25 No.3

        제초제 저항성 PAT 유전자가 도입된 형질전환 토마토의 후대 분리 세대에서 제초제 저항성을 빠르고 간편하게 확인 할 수 있는 비파괴 제초제 생물검정 방법을 확립하였다. 형 질전환체와 비 형질전환체 후대 분리 집단에서 잎을 채취하여 5가지 농도의 바스타 용액에서 제초제에 대한 저항성 및 감수성을 판별할 수 있는 적정 농도를 검토한 결과 25㎎ ℓ⁻¹가 대량 비파괴 제초제 생물검정에 적정한 것으로 나타났다. 대량 비파괴 제초제 생물검정법은 형질전환체의 후대 분리 집단에서 채취한 잎을 25㎎ ℓ⁻¹ 농도의 바스타 용액이 담긴 아크릴 박스(50×50㎝)에 순서대로 두고 밀봉한 후 5일 후에 제초제에 대한 저항성을 확인하였는 바, 제초제에 대한 저항성과 감수성의 구분이 뚜렷하였으며, 이 방법을 이용하여 대량의 분리 집단에서 형질전환체를 빠르고 간편하고 선별할 수 있을 것으로 생각되었다. This study was conducted to develop a non-destructive herbicide bioassay method to confirm the transgenic tomatoes in segregation populations. In order to find the proper concentration of bialaphos solution that discriminates resistance and susceptible, the filter papers were soaked in different concentrations of bialaphos solution (10, 25, 50, 75, and 100 ㎎ ℓ⁻¹). The proper concentration of bialaphos solution was found out to be 25 ㎎ ℓ⁻¹. One hundred leaflets were placed in acryl boxes moistened with filter papers that were soaked in a bialaphos solution (25 ㎎ ℓ⁻¹) for the screening of herbicide resistance. In addition, to determine the effect of leaf stage of seedlings, at the one, three, and five true-leaf stage were separately tested in the same manner. In the segregating population, non-destructive method results were matched exactly with 0.3% bialaphos application in a greenhouse.

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