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ア ァ カ サ ザ タ ダ ナ ハ バ パ マ ヤ ャ ラ ワ ヮ ン イ ィ キ ギ シ ジ チ ヂ ニ ヒ ビ ピ ミ リ ウ ゥ ク グ ス ズ ツ ヅ ッ ヌ フ ブ プ ム ユ ュ ル エ ェ ケ ゲ セ ゼ テ デ ヘ ベ ペ メ レ オ ォ コ ゴ ソ ゾ ト ド ノ ホ ボ ポ モ ヨ ョ ロ ヲ ―

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      저자 : 나혜경(Hye-Kyeong Na) (검색결과 1 건)
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        Dansyl 유도체화와 역상 고성능액체크로마토그래피에 의한 아미노산의 정량

        나혜경(Hye-Kyeong Na),전덕영(Deok-Young Jhon),홍윤호(Youn-Ho Hong) 한국식품영양과학회 1994 한국식품영양과학회지 Vol.22 No.6

        고성능 액체크로마토그래피를 이용하여 간편하고 신속하며 경제적인 아미노산의 정량방법을 연구한 결과, Nova-Pak C_(18) 역상컬럼을 통한 아미노산 Dansyl유도체의 분리조건을 결정하였다. 용매 A(인산 완충용액(200mM, PH 6.8) 15%, 아세토니트릴 11%, 물 74%)와 용매 B (아세토니트릴 65%, 메탄올 28%, 물 7%)를 각각 88%, 12%에서 시작하여 20%, 80%까지 50분 동안 linear하게 용매를 전개 시킨 결과 Asn과 Gln을 포함한 단백질을 구성하는 20개 아미노산의 완전한 분리가 50분내에 이루어졌으며, 최대 감지 수준은 picomole 정도로 해상력 또한 우수하였고, 머무름 시간의 재현성은 평균±0.05분 이하였다. 이러한 조건으로 글루타민 합성효소의 산 가수분해물의 아미노산 조성을 분석하여 아미노산 정량의 타당성을 검토하였다. 그리고 혈청, 간장, 두유, 우유 그리고 요구르트 중의 유리 아미노산 조성을 조사한 결과, 사람의 혈처에서는 Ala이 가장 높게 검출되었고, 간장에서는 Asp와 Glu, 두유의 경우 Ala과 Thr 그리고 우유와 요구르트에서는 Pro이 가장 높게 나타났다. This experiment was carried out to determine the separation condition of 1-dimethylaminonaphthalene-5-sulfonyl(Dansyl) derivatives of amino acids by reverse-phase high performance liquid chromatography with Nova-Pak C_(18) column. Determined solvent system was solvent A (200mM phosphate buffer pH 6.8 15%, acetonitrile 11%, water 74%) and solvent B(acetonitrile 65%, methanol 28%, water 7%). Linear gradient of solvent B was applied from 12% to 80% for 50min. Complete separation of 20 amino acids including asparagine and glutamine which constitute protein was achieved within 50min. As the detection limit was the range of picomole, the resolution power was excellent. Reproducibility of the retention time was less than mean±0.05min. According to the above optimum chromatographic conditions, the amino acid composition of some food and human blood was examined. The most affluent amino acid was alanine in human blood, aspartic acid and glutamic acid in soy sauce, alanine and threonine in soy milk and proline in milk and yoghurt.

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