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Phellinus linteus WI-001 균사체의 성장에 미치는 용존산소농도의 영향 및 자동 조절방법 개발
김종래,권호균,전계택,이계관 한국산업미생물학회 2000 한국미생물·생명공학회지 Vol.28 No.5
강력한 항암작용을 나타내는 단백다당체를 생산하는 Phellinus linteus WI-001 균주를 대상으로 용존산소의 농도 및 용존산소농도 조절 방식에 따른 균사체 생산성을 조사하였다. 플라스크에서 배지액량에 따른 건조균사체량의 변화를 살펴본 결과 균사체 성장에 용존산소와 shear stress가 중요한 요소로 작용함을 알 수 있었다. 4 L 발효기 배양시 용존산소농도를 조절하지 않은 경우에 비해 용존산소농도를 10%, 20%, 30%로 수동조절한 경우가 용존산소를 조절하지 않은 경우에 비해 균사체량이 최대 36% 증가하였으며, 각 용존산소농도에서의 세포비성장속도를 조사한 결과 20%의 용존산소농도에서 64% 증가하였다. DO control 방식을 자동화하기 위하여 20%의 용존산소농도로 순차자동제어한 경우 최종 건조균사체량은 18 g/L였다. 용존산소농도의 조절 방법 중 교반 속도와 공기 공급량을 혼합자동제어방식으로 조절한 경우 건조균사체량이 19.5 g/L 로서 균사체 생산성이 가장 우수 하였다. 결론적으로 shear sensitive한 Phellinus linteus를 배양할 경우 균사체 생산성을 증가시키기 위한 방법으로서 혼합제어방식이 가장 효과적이었다. The effects of dissolved oxygen (DO) concentration and DO control modes on cell growth in a 4 L computer-controlled bioreactor system were investigated using Phellinus linteus WI-001, a producer of protein-polysaccharides having potent anticancer activities. When DO was controlled at about 20%, maximum cell concentration and specific growth rate of the strain were observed to increase 36% and 64%, respectively, as compared to the experiment performed without DO control. By adopting cascade automatic control of DO at 20% saturated level, 18 g/L of maximum cell concentration was obtained. Notably when DO was maintained at about 20% in a mixed automatic control mode using computer-controlled program, 19.5 g/L of maximum cell concentration was obtained. These results showed that the mixed automatic control mode was the effective method for enhancing cell growth of the shear sensitive Phellinus linteus.
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Phellinus linteus WI-001 균사체의 고밀도 배양을 위한 배양학적 특성 연구
김종래,권호균,전계택,김규중,이계관 한국산업미생물학회 2000 한국미생물·생명공학회지 Vol.28 No.2
강력한 항암작용을 나타내는 단백다당체를 생산하는 Phellinus linteus WI-001 균주를 대상으로 배양학적 특성 및 초기 배양배지의 탄소원인 glucose 농도에 따른 균사체 생산성을 조사하였다. 배양중 최적 pH와 온도는 각각 5.5와 28℃인 것으로 나타났다. 특히 pH의 경우 전 배양기간에 걸쳐 5.5에서 6.5의 비교적 좁은 범위에서 변화하였다. 초기 glucose 농도를 0.5%, 1%, 2%, 3% 및 4%에서 균사체 생산량 및 세포비성장속도를 조사한 결과 최종 균사체 생산량은 glucose 농도가 증가할수록 높게 나타났으나, 세포비성장속도는 초기 glucose 농도에 반비례하였다. 따라서 비성장속도가 가장 빠르게 나타나는 초기 1% glucose 조건하에서 배양하다가 추가로 glucose를 간헐적 또는 지속적으로 공급하는 전략으로 생산성 향상을 시도하였다. 그 결과 회분식 배양에 비해 간헐적 공급방식에서는 28%, 지속적 공급방식에서는 42%의 수율이 증가되었다. Various environmental factors such as pH, temperature and initial glucose concentration were investigated for enhancing cell growth in fermentations of Phellinus linteus WI-001, a producer of polysaccarides with potent anticancer activities. Optimal pH and temperature were around 5.5 and 28℃, respectively. Relatively little variation of pH was observed ranging between 5.5 and 6.5 during the whole fermentation period. Maximum cell concentration and specific growth rate were investigated in the media containing initial glucose concentrations of 0.5%, 1%, 2%, 3% and 4%. High initial glucose concentration enhanced biomass production but showed negative effect on specific growth rate. In bioreactor experiments with various feeding strategies, increases of 28% and 42% in final cell concentration were obtained as compared to conventional batch process, by adopting pulse and continuous supplement of 2% glucose solution, respectively.
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이동하,박화진,권혁우,김현홍,임덕휘,남기석,신정해,김종래,이종진,권호균 대한약학회 2015 Archives of Pharmacal Research Vol.38 No.1
In this study, we investigated the effect ofcordycepin-enriched (CE)-WIB801C from Cordyceps militarison ADP (20 lM)-stimulated platelet aggregation. CE-WIB801C dose-dependently inhibited ADP-inducedplatelet aggregation, and its IC50 value was 18.5 lg/mL. CE-WIB801C decreased TXA2 production, but did notinhibit the activities of COX-1 and thromboxane synthase(TXAS) in ADP-activated platelets, which suggests that theinhibition of TXA2 production by CE-WIB801C is notresulted from the direct inhibition of COX-1 and TXAS. CE-WIB801C inhibited ATP release and [Ca2+]i mobilization,and increased cAMP level and IP3RI (Ser1756)phosphorylation in ADP-activated platelets. cAMP-dependentprotein kinase (A-kinase) inhibitor Rp-8-Br-cAMPSincreased CE-WIB801C-inhibited [Ca2+]i mobilization,and strongly inhibited CE-WIB801C-increased IP3RI(Ser1756) phosphorylation. CE-WIB801C elevated thephosphorylation of VASP (Ser157), an A-kinase substrate,but inhibited fibrinogen binding to aIIb/b3. These resultssuggest that CE-WIB801C-elevated cAMP involved inIP3RI (Ser1756) phosphorylation to inhibit [Ca2+]i mobilizationand, VASP (Ser157) phosphorylation to inhibit aIIb/b3 activation. Therefore, in this study, we demonstrate thatCE-WIB801C may have a preventive or therapeuticpotential for platelet aggregation-mediated diseases, suchas thrombosis, myocardial infarction, atherosclerosis, andischemic cerebrovascular disease.
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