槐花 물추출물의 일산화질소와 종양괴사인자 억제 효과 = (The) inhibitory effects of Sophorae immaturus flos aqueous extract on the production of nitric oxide and tumor necrosis factor-α

국문 초록 (Abstract)

槐花는 寒한 성질은 가진 약물로 지혈약으로 많이 알려져 있다. 이런 槐花의 성질이 염증 체계에서도 어떠한 작용을 하는 지 알아보기 위해 槐花의 물 추출물을 이용하여 槐花의 항염증 작용에 대해 보고하려고 한다. 염증 작용에 있어서 槐花 물 추출물의 작용을 알기 위해, 대식세포에서 lippopolysaccharide (LPS)로 유도한 nitric oxide (NO), interleukin (IL)-1b, IL-6, tumor necrosis factor-a (TNF-a)와 그 조절 기전인 mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor kappa b (NF-kB)를 조사해보았다. 괴화는 LPS로 유도한 NO와 TNF-a의 생성을 억제하였지만, IL-1b와 IL-6의 생성을 크게 억제하지 못했다. 槐花 물 추출물은 MAPK의 활성을 억제하였지만, NF-kB의 활성은 억제하지 못하였다. 또한 槐花는 LPS 및 cecal ligation and puncture (CLP)로 유도한 endotoxin shock을 미세하게 억제하였다. 결과적으로 槐花는 LPS로 유도한 NO와 TNF-a의 생성을 MAPKs를 통해 억제하였고 이는 in vivo에서도 유사한 효과를 보였다. 이는 괴화 물 추출물이 항염증 효과가 있음을 보여준다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Sophorae Immaturus Flos(SIF) has been known to play a role in hemostasis. We investigated the effects of aqueous extract from SIF on inflammatory situations. To evaluate the anti-inflammatory effects of SIF, We examined the cytokine productions including nitric oxide (NO), interleukin (IL)-1b, IL-6 and tumor necrosis factor-a (TNF-a) in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7cells and also inhibitory mechanisms such as mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor kappa b (NF-kB) using Western blot. SIF inhibited LPS-induced production of NO, TNF-a significantly but not of IL-1b and IL-6 in RAW 264.7 cells. SIF inhibited the activation of MAPKs such as extracelluar signal-regulated kinase (ERK 1/2), c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) and p38 but not of NF-kB in the LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Also, SIF treatment slightly reduced the endotoxin shock induced by LPS and cecal ligation and puncture (CLP). In conclusion, SIF down-regulated LPS-induced NO and TNF-a productions via MAPKs, which could be a clinical basis for inflammatory diseases and sepsis.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 1
• Ⅱ. 재료 및 방법 3
• 1. 약재 3
• 2. 시약 3
• 3. 실험동물 4
• 4. MTT 분석 4
• 5. NO 농도의 측정 4
• 6. Cytokine (TNF-a, IL-1b, IL-6) 측정 5
• 7. Total RNA 추출 5
• 8. Reverse transcription-PCR (RT-PCR) 6
• 9. Western blot analysis 7
• 10. LPS 로 유도한 endotoxin shock 8
• 11. Cecal ligation and puncture (CLP) 8
• 12. 통계처리 9
• Ⅲ. 결 과 10
• 1. 槐花의 RAW 264.7 cell에 대한 독성 10
• 2. 槐花 추출물이 NO 생성에 미치는 영향 11
• 3. 槐花 추출물이 IL-1b, IL-6, TNF-a 발현에 대한 영향 12
• 4. 槐花 추출물에 의한 MAPKs의 발현억제 효과 13
• 5. 槐花의 LPS로 유도된 endotoxin shock 억제 효과 15
• 6. 槐花의 LPS로 유도된 shock 상태에서의 serum cytokine 억제 효과 17
• 7. 槐花의 CLP 로 유도된 endotoxin shock 억제 19
• Ⅳ. 고찰 21
• Ⅴ. 결론 26
• Ⅵ. 참고문헌 27