Cyanocobalamin이 함유 된 나노 리포좀 제조 및 안정성에 관한 연구

국문 초록 (Abstract)

Cyanocobalamin은 비타민 B12의 일종이다. 시아노코발라민은 물에 용해되지만, 시아노코발라민 수용액이 열에 노출되면 시간과 온도에 따라 분해된다. 시아노코발라민은 산화질소 제거제로서의 효능을 보였고 일부 임상 시험에서 피부 병리 치료에 긍정적인 결과를 보였다. 이런 효능에도 Cyanocobalamin의 분자량(1355 Da)과 친수성은 피부의 주요 기능 중 하나인 외인성 물질이 신체에 침투하는 것을 방지하는 것이기 때문에 온전한 인간 피부를 통한 확산을 제한된다.
시아노코발라민을 함유한 나노 리포좀 조성에는 피부 표면 지질로 아토피 피부에 부족한 지질 성분들로 조성하였고 레시틴을 함유하였으며, 제조에 사용되는 장비는 대량 생산이 가능한 마이크로플루다이져를 사용하여 나노 리포좀을 제조하였다. 본 실험에서는 시아노코발라민 나노 리포좀을 피부에 사용하기에 보다 안전한 원료들을 사용하여, 안정한 제형 조건을 확립 하고자하였다.
시아노코발라민을 함유한 나노 리포좀 안정성 평가는 각 온도 조건(4℃, 25℃, 45℃)에서 30일간 성상, pH를 확인하였으며, 제타사이져를 통해 입자의 사이즈, 제타 전위를 확인하였다. HPLC를 통해 만들어진 시아노코발라민 함유 나노 리포좀의 함량 변화를 확인하였으며, Cryo-TEM을 통해 나노 리포좀으로 형성된 구형의 입자를 확인하였다.
성상 안정성 확인 결과 시아노코발라민 함유 나노 리포좀이 시간 경과함에 따라 pH 가 낮아지는 현상이 발견되었으며, pH 약산성에 가까워짐에 따라 제형이 분리되는 현상을 확인하였다. 이에 제형 제조에 pH를 보완할 수 있는 요소로 트로메타민을 추가하였을 때, pH 유지되었으며, 제형의 성상 변화 없음을 확인하였다. 또한, 시아노코발라민의 함량 분석에서도 시아노코발라민 함유 나노리포좀 보다 트로메타민 추가된 시아노코발라민 함유 나노 리포좀의 함량이 더 안정하게 유지되는 것을 확인하였다.
최근 화장품 분야에서 불안정한 소재를 안정화하는 방법으로 리포좀에 대해 많은 연구가 진행되고 있으며, 더 안정한 시아노코발라민 나노 리포좀 제형 연구 개발에 도움될 것으로 판단된다. 향후 시아노코발라민 나노 리포좀을 화장품 제형에서의 활용도 기대된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Cyanocobalamin is a type of vitamin B12. Cyanocobalamin is soluble in water, but decomposes with time and temperature when aqueous solutions of cyanocobalamin are exposed to heat. Cyanocobalamin has shown efficacy as a nitric oxide scavenger and has shown positive results in the treatment of skin pathologies in some clinical trials. Despite this efficacy, Cyanocobalamin's molecular weight (1355 Da) and hydrophilicity limit its diffusion through intact human skin because one of the main functions of skin is to prevent exogenous substances from penetrating the body.
The nanoliposome composition containing cyanocobalamin was composed of lipid components lacking in atopic skin as skin surface lipids and contained lecithin. In this experiment, we tried to establish stable formulation conditions by using raw materials that are safer for using cyanocobalamin nanoliposomes on the skin.
The stability evaluation of nano-liposomes containing cyanocobalamin was confirmed for 30 days at each temperature condition (4 ° C, 25 ° C, 45 ° C), pH, and particle size and zeta potential were confirmed through a zeta sizer. Changes in the content of the cyanocobalamin-containing nanoliposomes made through HPLC were confirmed, and spherical particles formed of nanoliposomes were confirmed through cryo-TEM.
As a result of confirming the stability of the properties, it was found that the pH of the nano-liposome containing cyanocobalamin decreased over time, and it was confirmed that the formulation was separated as the pH approached weakly acidic. Accordingly, when tromethamine was added as a factor capable of supplementing the pH in the preparation of the formulation, the pH was maintained and it was confirmed that there was no change in the properties of the formulation. In addition, in the content analysis of cyanocobalamin, it was confirmed that the content of the cyanocobalamin-containing nanoliposomes to which tromethamine was added was maintained more stably than the cyanocobalamin-containing nanoliposomes.
Recently, many studies on liposomes have been conducted as a method of stabilizing unstable materials in the field of cosmetics, and it is believed that it will be helpful for research and development of more stable cyanocobalamin nano-liposome formulations. In the future, the use of cyanocobalamin nanoliposomes in cosmetic formulations is also expected.

목차 (Table of Contents)

• 제1장 서론 1
• 제2장 실험 재료 및 실험 방법 5
• 1. 원료 및 기기 5
• 2. 리포좀 제조 7
• 2-1. 리포좀 제조 예비실험 7
• 2-1-1. 용매조건 확립을 위한 나노 리포좀 제조 예비실험 7
• 2-1-2. 고압유화 조건 확립을 위한 나노 리포좀 제조 예비실험 9
• 2-2. 시아노코발라민 나노 리포좀제조 10
• 2-3. 트로메타민 첨가 시아노코발라민 나노 리포좀 제조 12
• 2-4. 시아노코발라민 수용액 제조 13
• 3. 리포좀 안정성 평가 14
• 3-1. 온도별 관능평가 14
• 3-2. pH 측정 14
• 3-3. 입자 크기 및 제타 전위 측정 14
• 3-4. 시아노코발라민 함량 분석 16
• 3-5. 시아노코발라민 나노 리포좀의 형상 관찰 18
• 제3장 결과 및 고찰 19
• 1. 제형 안정성평가 19
• 1-1. 온도별 제형 안정성 관능평가 19
• 1-2. 입자 크기(particle size) 및 제타 전위(zeta potential) 결과 23
• 1-2-1. 나노 리포좀 용매 선정 실험 결과 (Liposome #1) 23
• 1-2-2. 고압유화 조건선정 실험 결과(Liposome #2) 23
• 1-2-3. 시아노코발라민 나노 리포좀 용매선정 실험 결과(Liposome #3) 24
• 1-2-4. 트로메타민 첨가 시아노코발라민 나노 리포좀 제조 실험 결과 (Liposome #4) 24
• 2. 시아노코발라민 HPLC 함량 분석 33
• 2-1. 시아노코발라민 HPLC 정량 분석 33
• 2-2. 시아노코발라민 온도 별 함량 안정성 33
• 3. 시아노코발라민 나노 리포좀 형상 관찰 결과 36
• 제4장 결론 37
• 참고문헌 38
• ABSTRACT 43