해양미생물로 부터 Eicosapentaenoic acid 생성균주의 분리 및 생성최적조건의 확립

국문 초록 (Abstract)

본 연구에서는 한국 연근 해역에서 서식하는 해양동물의 장내에서 EPA 생산균주를 탐색하여 우수균주를 선발하고 이의 EPA 생산 최적조건을 수립하여 보았다.
1. 1991년 가을부터 1992년까지 약 일년반에 걸처 고등어, 멸치, 꽁치, 청어 등 어류와 해삼, 가리비, 조개 등 저서생물 100여종의 내장에서 약 3,000여종의 장내세균을 분리배양하였다.
2. 이들로부터 지방산을 추출하여 methly ester 형태로 전환한후 Thin Layer Chromatography로 일차 검정한 후 선별된 120여종을 대상으로하여 Gas Chromatography로 Eicosapentaenoic acid 존재유무와 그 함량을 확인하였다. 그 결과 20종의 Eicosapentaenoic acid 생산 해양미생물을 발견하였다.
3. 이들중 strain 1513과 strain 2100을 대상으로 Eicosapentaenoic acid 생산의 최적조건을 수립하였다. 약 50 %의 숙성해수를 포함한 heart infusion 배지에서 균체 성장과 Eicosapentaenoic acid 생산이 최적이었고 원할한 산소 공급이 균체 성장과 Eicosapentaenoic acid 생산에 필수적이었다. 실험실 내에서의 최적 배양 조건에서는 처음 5 ∼ 7 %의 Eicosapentaenoic acid함량이 20 ∼ 22 %까지 약 4 배 증가되었고 균체의 희수량도 2 배이상 증가하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

To follow this trend actively, high EPA producing bacteria must be obtained first and the optimal cultivating condition should be established for the eventual industrialization of microbial EPA production.
1. About 3,000 strains of bacteria were isolated from the intestine of 100 kinds of marine animals including sardine, mackerel, sea cucumber.
2. 20 strains of EPA producing bacteria were obtained after screening with thin layer chromatography and gas chromatography and stored.
3. Optimal conditions for the growth and EPA production were established for strain 1513 and strain2100. Heart infusion media containg about 50 % aged sea water and incubation temperature of 18 ℃, pH 7.5, and high oxygen supply should be employed for the best growth and EPA production, At optimal condition in laboratory scale, about 2 fold increase of cell mass and 4 fold increase of EPA were obtained.

목차 (Table of Contents)

• 목차
• 국문요약 = i
• 감사의 글 = iii
• 목차 = iv
• LIST OF FIGURES = vi
• LIST OF TABLES = ix
• I. 서론 = 1
• II. 재료 및 방법 = 5
• 1. 시료 채취, 처리 및 균주 순수 분리 = 5
• 2. 분리 균주의 보존 = 5
• 3. EPA 함유 여부 검색 = 6
• 1) Fatty Acid Methyl Ester의 제조 = 6
• 2) Thin Layer Chromatography = 7
• 3) Gas Chromatography = 7
• 4. EPA 생산 최적조건의 확립 = 8
• III. 결과 = 9
• 1. 균주 분리 및 보존 = 9
• 2. EPA 생산균주 = 9
• 3. EPA 생산 균주의 EPA 생산 최적 조건 = 11
• 1) 염분의 영향 = 11
• 2) pH 의 영향 = 16
• 3) 최적 배지 조성 = 16
• 4) 최적 성장 온도 = 22
• 5) 산소 공급의 영향 = 22
• IV. 고찰 = 26
• 참고문헌 = 29
• Abstract = 36