BCG백신 확인시험법 개발연구 = Development of alternative identification test for BCG vaccine

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Bacili Calmete-Gurin(BCG) is the only live attenuated vaccine for preventing tuberculosis. A number of BCG sub-strains have ben used widely in global market for over 40 years. In routine quality control test for lot release, acid-fast staining is being used as a identification test for BCG vaccines. However, it is difficult to distinguish sub-strain level of BCG using this classical method, which should be the main objective of identification test. To identify each strain, we developed simple and rapid detecting method for commercial BCG vaccines based on the variation of RD genes (RD1, RD8 and RD16) using multiplex PCR. After developing the PCR condition, we conducted method validation . Detection limit was 0.005ug, 0.5ug and 0.02ug of cells in Tokyo BCG vaccine, Danish BCG vaccine and Moreau BCG vaccine, respectively. Also it was found to be accurate, robust, and reproducible. It is considered that this modified mPCR methods could be used as a routine lot release test for identifying commercial BCG vaccines in sub-strain level.

국문 초록 (Abstract)

BCG는 결핵예방을 위한 유일한 약독화된 생백신으로서, 지난 40여년간 많은 수의 BCG substarin이 결핵예방을 위하여 전 세계적으로 사용되고 있다. BCG백신 확인시험에 관한 국가검정시험법은 항산성 염색법이 사용되고 있다. 그러나 이 시험법은 substrain간의 구별이 어려운 단점이 있다. 이러한 단점을 극복하기 위하여 본 연구진은 BCG백신 균주가 가지는 유전자부위에 대한 특징을 기반으로(RD, Region of deletion) multiplex PCR법을 이용하여 간단하고 빠른 새로운 시험법을 개발하고자 하였다. 새로이 개발된 시험법은 시험법 validation을 실시하였다. 새로이 개발된 시험법의 최저검출농도는 경피용백신(Tokyo172)의 경우 0.005ug, 피내용백신(Danish131)의 경우는 0.5ug, 피내용백신(Moreau)의 경우 0.02ug 이었다. 새로이 개발된 시험법은 BCG 백신의 substrain 단계를 구별할 수 있었으며, 국가검정 시험법으로서 적용가능함을 확인하였다.