모체운동이 자폐증에서 canonical Wnt/β-catenin 신호체계를 통한 신경세포생성 및 미토콘드리아 기능에 미치는 영향

국문 초록 (Abstract)

자폐증 유발과 관련하여 해마에서의 canonical Wnt/β-catenin 신호체계를 신경세포생성 및 미토콘드리아 기능으로 세분화하여 연구하며, 이때 모체의 운동을 통한 개선효과 및 신경 보호적 효과의 규명을 실시하기 위한 방법으로 생화학적 분석을 실시하고자 한다.
1년차 연구 – 자폐가 유도된 임신 중 모체 운동
1) 실험동물
1년차 연구에서는 Spragye-Dawley(SD)계 10주령의 수컷 쥐 12마리와 동일 주령의 암컷 쥐 24마리를 대상으로 각 집단별 수컷 3마리, 암컷 6마리의 Saline/Control, Saline/Exercise, VPA/Contrl, VPA/Exercise 등 4개 집단으로 구분한다.
2) 자폐증 유도 모델
각 집단별 교미를 실시 후 자폐증 유도를 위해 임신한 모체를 대상으로 VPA를 1회 주입한다(400mg/kg, s.c.).
3) 운동방법
임신 중 모체를 대상으로 3주간의 수영운동을 실시한다. 운동은 주당 5회의 빈도로 하루 30분씩 강제적 수영운동을 실시한다.
4) 행동분석
태어난 새끼 쥐 중 수컷을 대상으로 3주간의 젖뗌 시기 중 마지막 5일동안 인지기능 검사를 위한 Morris Water Maze를 실시한다.
5) BrdU 주입
신경세포생성율을 확인하기 위해 각 집단별 태어난 새끼 쥐 중 수컷을 대상으로 3주간의 젖뗌 시기 중 마지막 5일 동안 BrdU를 주입한다(50mg/kg).
6) 생화학적 분석
신경세포생성율을 확인하기 위해 면역조직화학법을 통한 BrdU, DCX 및 NeuN 등을 분석한다.
Wnt/β-catenin 신호체계의 변화를 살펴보기 위해 Western blot법을 통해 Wnt, β-catenin 및 하위신호체계를 분석한다.

2년차 연구 – 임신 전 모체 운동
1) 실험동물
2년차 연구에서는 Sprague-Dawley(SD)계 3주령의 수컷 쥐 12마리 및 동일 주령의 암컷 쥐 24마리를 대상으로 각 집단별 수컷 3마리, 암컷 6마리의 Control/Saline, Control/VPA, Exercise/Saline, Exercise/VPA 등 4개 집단으로 구분한다.
2) 자폐증 유도 – 1년차와 동일
3) 운동방법
임신 전 각 집단별 암컷을 대상으로 4주간 수영운동을 실시한다. 운동은 주당 5회의 빈도로 하루 30분씩 강제적 수영운동을 실시한다.
4) 행동분석 – 1년차와 동일
5) BrdU 주입 – 1년차와 동일
6) 생화학적 분석 – 1년차와 동일