석룡자 유래 항암 활성 성분의 동정 = Identification of Major Bioactive Components with Anticancer Activity from Eumeces chinensis

국문 초록 (Abstract)

본 연구에서는 전통 약재로 사용되어 온 석룡자의 항암 활성을 규명하고, 그 유효 성분을 분석하고자 하였다.
석룡자로부터 유효 성분을 분리하기 위해 다이에틸 에테르, 에탄올, 메탄올을 이용하여 순차적 용매 추출을 수행하였다. 각 분획물의 항암 효능을 확인하기 위해 정상 세포와 위암, 대장암, 방광암, 폐암 세포주를 대상으로 MTT assay를 실시하였으며, 가장 우수한 활성을 보인 에테르 분획물을 선별하였다. 이후 Clonogenic assay, Flow cytometry assay, 면역 형광 염색을 통해 암세포 증식 억제 및 세포자멸사 유도 기전을 분석하였다.
실험 결과, 석룡자 에테르 분획물은 정상 세포에 비해 위암, 대장암, 방광암, 폐암 세포주에서 선택적인 증식 억제 효과를 나타내었다. 특히 석룡자 에테르 분획물 처리 시 암세포의 콜로니 형성이 농도 의존적으로 감소하였으며, Annexin V 양성 세포의 비율과 Caspase-3/7 활성이 대조군 대비 유의하게 증가하여 세포자멸사가 유도됨을 확인하였다. 또한, ssDNA 양성 세포 비율의 증가를 통해 위암, 대장암, 방광암, 폐암 세포주에서 DNA 단편화가 유도됨을 입증하였다. 이후 박층 크로마토그래피를 통해 항암 활성을 가진 분획을 분리하고, 1H-NMR 분석을 통해 해당 분획물의 주요 활성 성분이 팔미트산임을 확인하였다.
본 연구 결과는 석룡자 분획물이 주요 활성 성분인 팔미트산을 통해 암세포의 사멸을 유도함을 시사하며, 전통 약재로 사용되어 온 석룡자의 항암 활성을 과학적으로 규명하였다는 점에서 의의가 있다. 본 연구는 동물 유래 천연물의 항암 소재로서의 가능성을 제시하며, 향후 천연물 기반 항암제 개발을 위한 기초 자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서 론 1
• Ⅱ. 실험재료 및 방법 3
• 1. 세포주 및 세포배양 3
• 2. 석룡자 분획물 제조 3
• 3. 세포 생존율 측정 4
• 4. 콜로니 형성 분석 5
• 5. 유세포 분석 5
• 6. 면역 형광염색 6
• 7. 박층 크로마토그래피 6
• 8. 핵자기공명 분광법 7
• 9. 통계분석 7
• Ⅲ. 결과 8
• 1. 석룡자 분획물의 제조 및 분획 8
• 2. 석룡자 용매별 분획물의 세포 독성 스크리닝 10
• 3. 석룡자 에테르 분획물의 증식 억제 및 세포자멸사 유도 효과 16
• 4. 에테르 분획물의 분획 분리 및 활성 분획 선정 28
• 5. 주요 유효성분 동정 33
• Ⅳ. 논의 37
• 참고문헌 42
• Abstract 48