이종장기이식 영장류에서의 RhCMV 재활성 모니터링

국문 초록 (Abstract)

갈수록 증가하는 장기이식 대기 환자들에 비하여 공여 장기는 절대적으로 부족한 상황을 해결하기 위해 여러 동물을 이용한 이종장기이식 시도가 꾸준히 이뤄지고 있다. 국내에서도 무균 돼지를 이용한 이종이식 실험이 진행되고 있는데, 성공적인 이종장기이식을 위해서는 우선적으로 면역학적 거부반응의 문제를 해결해야만 한다. 이를 위해 다양한 면역억제방법을 시도하는데, 이 때 피이식 개체의 면역 저하로 인한 다양한 감염이 발생할 수 있다. 이로 인하여 매우 심각한 질병으로 진행될 수도 있고 이식한 장기에 거부반응을 촉진할 수도 있다.
특히 거대세포바이러스(cytomegalovirus; CMV)는 면역이 저하된 환자들에게서 쉽게 재활성화 되어 증식하며 뇌염, 폐렴, 간염, 장염, 망막염 등의 증세를 일으킬 수 있으며 심한 경우 사망에 이를 수 있다. 또한 CMV의 재활성은 이식한 장기의 손상과 손실을 유발할 수 있으므로 장기이식환자에서 CMV 재활성을 대한 지속적으로 모니터링하는 것이 필요하다.
본 연구에서는, 돼지 장기 이식 영장류에서의 Rhesus CMV (RhCMV) 재활성화 여부에 대한 모니터링을 실시하였고, RhCMV 증식이 활성화 되었을 때 숙주의 면역세포는 어떻게 변화 하는지 관찰하였다. RhCMV 재활성화 확인을 위해 실시간 중합효소 연쇄반응을 시행하여 혈액 내 RhCMV DNA를 검출하였고, 면역형광염색법을 이용하여 혈청에서 RhCMV에 대한 면역글로불린G 항체 역가를 측정하였다.
CD3 T 림프구= 1000 개/㎣, CD4 T 림프구= 250 개/㎣, CD8 T 림프구= 750 개/㎣ 이하가 되거나, 1일 당 CD3 T 림프구 감소기울기= -10.0 개/㎣, CD4 T 림프구 감소기울기= -2.5 개/㎣, CD8 T 림프구 감소기울기= -7.0 개/㎣ 이하가 될 때 RhCMV 재활성화를 민감도 93.0%, 특이도 95.8%로 예측할 수 있다는 결론을 내릴 수 있었다. 확립한 기준점 이하로 T 림프구가 감소할 경우, RhCMV의 재활성화가 30일 이내로 발생할 확률이 높으므로 그에 대한 적절한 대비를 하여야 한다.
췌도 이식한 영장류에서의 RhCMV 재활성과 혈당 수치 사이의 관계를 분석한 결과, 혈당 수치 120 mg/dL 이상 증가 시 75.0%에서 RhCMV가 재활성화 소견을 보였고, 반대로 RhCMV 재활성화 시에 혈당 수치가 120 mg/dL 이상 증가하는 경우는 62.5% 였다.
이를 이용하여 면역억제방법의 적절성 판단이 가능해 질 것이며, 이 연구결과를 바탕으로 장기이식 후에 사람에서 Human cytomegalovirus(HCMV) 재활성을 예측하여 그에 대한 적절한 대비를 하는 것 또한 가능할 것으로 기대한다.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 1
• Ⅱ. 연구재료 및 연구방법 5
• 동물 5
• 세포와 바이러스 배양 5
• 항체와 화학물질 6
• 원숭이 혈액분리 6
• 바이러스 DNA 추출 6
• 면역형광염색법 6
• 실시간 중합효소 연쇄반응 7
• 유세포 분석기 분석 8
• CMV 감염, 재활성화, 질병의 정의 8
• Ⅲ. 결과 14
• 1. 면역형광염색법으로 측정한 항체가 증가의 의의 14
• 2. 췌도 이식한 원숭이 검체에서의 RhCMV 모니터링 14
• 3. 각막 이식한 원숭이 검체에서의 RhCMV 모니터링 22
• 4. 췌도 이식한 원숭이 혈액의 T 림프구 분포와 RhCMV 활성 32
• 5. 각막 이식한 원숭이 혈액의 T 림프구 분포와 RhCMV 활성 32
• 6. 췌도 이식한 원숭이의 혈당량 변화와 RhCMV 재활성 33
• Ⅳ. 고찰 45
• Ⅴ. 참고문헌 52
• Ⅵ. 영문초록 57