In Vivo and In vitro Antispasmodic Effects of JungRiTang II : 정리탕 II 물 추출물의 장수축력에 미치는 In vitro 및 In vivo 효력 평가

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

PURPOSE: In Vivo and In vitro antispasmodic effects of JungRiTang II, a Traditional Korean Polyherbal Medicine were observed in the present study. To clarify the effects of JungRiTang II, on accelerating small intestinal movement induced by the stimulation of cholinergic neurotransmission, we evaluated the effects of JungRiTang II on In vivo carbachol (an acetylcholinergic agent)-accelerated mice small intestinal transit and on In vitro contractions induced by low-frequency electrostimulation, KCl, histamine or acetylcholine using isolated guinea pig ileum.
METHODS: To induce the acceleration of mice small intestinal transit, Carbachol 1mg/kg was once subcutaneously dosed 15min before last administration of the test drugs. In the present study, aqueous extracts of JungRiTang II 500, 250 and 125mg/kg or domperidone 20mg/kg were orally pretreated on the carbachol-accelerated mice small intestinal transit once a day for 7 days and the small intestinal transit rats of activated charcoal powder were monitored. In vitro assays, JungRiTang II 1, 0.1, 0.01 and 0.001mg/ml or domperidone 2×10^(-5)M were treated 10min before ileal contraction was induced by filed stimulation, acetylcholine, KCl and histamine, and the % changes of contractions were observed compared to the treatment of inducer alone. In spontaneous contraction, the % changes of contractions were observed compared to treatment of vehicle alone at 10min after JungRiTang II or domperidone treatment. The efficacy of JungRiTang II were compared to those of domperidone.
RESULTS: High concentration, 1mg/ml of JungRiTang II extract was found to increase the spontaneous contraction of the isolated guinea-pig ileum. However, the JungRiTang II extracts decrease contractions induced by electrostimulation, acetylcholine, histamine and KCl in the isolated guinea-pig ileum. In addition, JungRiTang II extracts effectively inhibited the accelerated small intestinal movement induced by carbachol stimulation of cholinergic neurotransmission in In vivo.
CONCLUSION: Based on the results, although the exact molecular mechanism and which herbs or compound in JungRiTang II are responsible for actions, it was concluded that JungRiTang II enhancement in the normal intestinal motility; and normalization in the accelerated intestinal motility might be interfere with a variety of muscarinic, adrenergic and histaminic receptor activities or with the mobilization of calcium ions required for smooth muscle contraction non-specificly. Therefore, it is expected that JungRiTang II will be promising as a prescription of clinical treatment of digestive tract disorders not only constipation but also the pain relief of IBS and ileus.

국문 초록 (Abstract)

소화기 장애를 비롯한 위장장애에 사용되어져 온 정리탕 II 의 장수축력에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 적출 guinea-pig 회장 근육조직에 대한 In vitro 시험을 실시하였으며, In vivo에서의 활성 평가를 위하여 carbachol로 장 연동 운동을 비정상적으로 촉진시킨 마우스를 이용하여 소장내 활성탄의 이동성을 평가하였다.
500, 250 and 125mg/kg의 정리탕 II 물 추출물 및 20mg/kg의 domperidone 을 7일간 전 투여한 다음, 마지막 투여 15분 전에 Carbachol 1mg/kg을 단회 경피투여한 다음 20분 후 소장내 활성탄의 이동 비율을 측정하였으며, 정리탕 1, 0.1, 0.01 및 0.001mg/ml 또는 domperidone 2×10^(-5)M을 전기자극, acetylcholine, KCl 및histamine 처리 10분전에 전 처리 한 다음 각각의 자극원 단일 처리시의 수축력과 비교한 % 수축력을 산출하였다. 또한 자발적 수축력에 미치는 영향은 정리탕 II 물 추출물 또는 domperidone 처리 10분후 유발되는 자발적인 수축력을 측정하였다. 모든 실험결과는 domperidone과 비교하였다.
Domperidone 과는 달리, 고용량 1mg/ml의 정리탕 추출물 처리군에서는 적출 guinea-pig 회장의 자발적 수축을 증가시키는 것으로 관찰되었으나, electrostimulation, acetylcholine, histamine 및 KCl에 의해 유발되는 불수의적인 수축은 처리 용량 의존적으로 현저히 감소시키는 것으로 관찰되었다. 또한 정리탕 II 물 추출물은 carbachol에 의해 초래되는 비정상적인 장 연동운동의 증가를 효과적으로 차단하는 것으로 관찰되었다.
정리탕 II의 정확한 기전 및 구성 약재 중 어떤 성분이 이러한 장수축력에 미치는 지는 정확히 알 수 없으나, 정리탕 II 물 추출물은 muscarinic, adrenergic 및histaminic 수용체 활성 또는 평활근 수축에 관여하는 calcium 이온의 움직임에 비특이적으로 영향을 주어, 정상 장 연동운동을 촉진하는 반면 비정상적으로 촉진된 장 운동은 억제하는 것으로 관찰되었다. 따라서 정리탕 II 는 변비 등의 장 연동운동 감소 성 질환뿐만 아니라, IBS 및 ileus 등에 수반되는 불수의적인 수축에 의한 통증 완화 등에도 매우 효과적일 것으로 생각된다.

목차 (Table of Contents)

• I. INTRODUCTION = 1
• II. MATERIALS & METHODS = 4
• 1. Preparations of JungRiTang II extracts = 4
• 2. In vitro assays = 7
• 1) Reagents and Animals = 7
• 2) Guinea-pig mysenteric plexus-longitudinal muscle preparation = 7
• 3) Effect on the spontaneous contraction = 8
• 4) Effect on the electrical field stimulation-induced contractions = 9
• 5) Effect on the acetylcholine-induced contractions = 9
• 6) Effect on the KCl-induced contractions = 9
• 7) Effect on the histamine-induced contractions = 10
• 3. Carbachol-accelerated mice small intestinal transit = 10
• 1) Animals and husbandry = 10
• 2) Grouping and administration of test drugs = 11
• 3) Carbachol treatment and small intestinal transit rat measurement = 12
• 4) Body weight changes = 12
• 4. Statistical analyses = 13
• III. RESULTS = 14
• 1. Results of In vitro assays = 14
• 1) Effects on the spontaneous contractions = 14
• 2) Effects on the electrostimulation induced contractions = 16
• 3) Effects on the acetylcholine induced contractions = 18
• 4) Effects on the KCl induced contractions = 20
• 5) Effects on the histamine induced contractions = 22
• 2. Results of In vivo assays = 24
• 1) Changes of body weights = 24
• 2) Changes of small intestinal activated charcoal transit = 28
• IV. DISCUSSION = 30
• REFERENCES = 36
• ABSTRACT = 42
• ABSTRACT (Korean) = 44