해마 치상회에서 운동에 의해 생성되는 신경세포의 안정화 시기와 생존기간 및 인지기능 변화에 관한 연구

국문 초록 (Abstract)

이를 위하여 본 연구는 8주간의 수영 및 트레드밀 운동을 실시하여 해마의 NGF 발현 및 세포생성율과 이에 따른 인지기능 변화를 BrdU 주입 후 NeuN, β-Ⅲ-tubulin과 DCX(doublecortin) 항체를 이용하여 시기별(2일, 1주, 2주, 4주, 3개월, 6개월)로 살펴보고자 한다. 실험동물은 생후 24주령된 SD(Sprague-Dawley)계 흰쥐(수컷) 144마리를 대상으로 2주간의 환경적응을 거친 후 본 실험에 착수한다. 실험동물은 각 집단간 48마리씩 배정하여 3개 집단(통제집단: Control Group; COG, 수영운동집단: Swimming Exercise Group; SEG, 트레드밀 운동집단: Treadmill Exercise Group; TEG)으로 무선배정 한다. 그 후 수영운동집단과 트레드밀운동집단을 대상으로 수영과 트레드밀 운동을 주 5일, 8주간 실시한다. 그리고 트레드밀 운동은 중강도로 8주간, 트레드밀 속도와 시간을 점진적으로 증가시킨다. 이와 동시에 해마의 세포 생성율을 살펴보기 위하여 Thymidine analog인 BrdU를 50 mg/kg b.w.의 양으로, 운동 전 매일 1회, 실험기간 동안 복강에 주입한다. 8주간 각 처치후 각 시기별(2일, 1주, 2주, 4주, 3개월, 6개월)로 인지기능을 측정한다. 그 후 마취시킨 다음 해마 세포생성율을 확인하기 위하여 흉강을 열고 좌심실을 통하여 고정액을 관류한다. 관류 고정 후 뇌를 적출한 다음 PFA 고정액에 담아서 4℃에서 12-16시간 침전시켜 후 고정을 시킨다. 고정된 뇌 조직은 30% sucrose 용액에서 2-5일간 침전시킨 후 freezing microtome(Leica, Nussloch, Germany)를 이용하여 40㎛ 두께의 연속관상 절편을 제작한다. 반면 단백질 수준을 살펴보기 위하여 뇌 조직을 빠르게 적출한 후 해마를 절개한 다음 액체질소에 급냉하여 분석시까지 -70℃에서 냉동 보관하며, western blotting과 BrdU immunohistochemistry, passive avoidance test 방법을 통해 분석한다.