침습 유방암 환자의 HER2 유전자 증폭 검사에서 미세침흡인물(fine needle aspirates)의 유용성 = The availability of fine needle aspirates for the assessment of HER2 gene amplification in invasive breast cancer patients

국문 초록 (Abstract)

배경 : HER2 유전자의 증폭 여부에 대한 평가는 새롭게 진단된 유방암 환자나 재발된 유방암 환자에 대한 치료 방법의 선택에 있어서 매우 중요하다. HER2 상태를 평가하기 위한 방법으로는 포르말린 고정 파라핀 포매(formalin fixed paraffin embedded, FFPE) 조직을 이용한 형광제자리부합법(fluorescence in situ hybridization, FISH)과 면역조직화학(immunohistochemistry, IHC) 염색이 가장 흔하게 사용되고 있으나, 조직 검체를 이용한 방법은 조직 처리 과정의 표준화가 어렵고 비교적 시간 소요가 많다는 단점을 가지고 있다. 본 연구에서는 HER2 유전자 증폭을 검사하기 위한 FISH 검사에서 미세침흡인물(fine needle aspirates, FNA)의 유용성을 평가하고자 하였다.
대상 및 방법 : 51례의 침습 유방암 환자를 대상으로 미세침흡인물을 수집하였다. 세포검사를 통해 각 미세침흡인물의 침습 유방암 세포 성분을 확인한 후, FISH를 이용하여 HER2 유전자 증폭 여부를 검사하였다. 각 미세침흡인물의 대응(corresponding) 파라핀 포매 조직 검체를 수집하여 HER2 FISH와 IHC 염색을 시행하였고, 그 결과를 미세침흡인물을 이용한 FISH 결과와 비교 분석 하였다. FISH와 IHC 염색의 결과는 2007년 American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists (ASCO/CAP) Guidelines의 권장 사항에 따라 양성, 음성, 부정(equivocal)으로 해석하였으며, 검사법간의 비교 분석에서는 부정 결과를 제외하고 양성과 음성 결과를 나타낸 증례만을 선택하여 이용하였다.
결과 : 51례의 검체 중 1례는 종양 세포 수의 부족으로 FISH 분석에서 제외하였다. 부정 결과를 나타낸 증례들을 제외하고 미세침흡인물을 이용한 FISH와 파라핀 포매 조직 검체를 이용한 FISH간의 결과 일치율은 98% (47/48)이었고, 미세침흡인물을 이용한 FISH와 파라핀 포매 조직 검체를 이용한 IHC 염색 간의 결과 일치율은 93% (43/46)이었다. FISH로 관찰된 침습 유방암 세포의 형태학적 소견에서 미세침흡인물의 경우 조직 검체와는 달리 세포 중복 현상이 적어서 결과 판독이 용이하고 정확하였다.
결론 : 미세침흡인물은 HER2 유전자 증폭의 평가에 있어서 매우 유용한 검체이다. 검사 방법의 비침습성과 신속성뿐만 아니라 결과 판독의 용이성과 정확성으로 인해 파라핀 포매 조직 검체보다 유용하게 사용할 수 있을 것으로 기대되며, 향후 세포학적 검체에 대한 사용 기준을 위한 논의가 이루어져야 할 것이다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

BACKGROUND. The evaluation of HER2 amplification status plays a critical role in the determination of therapeutic regimens on newly diagnosed and metastatic breast cancer. Currently, fluorescence in situ hybridization (FISH) and immunohistochemistry (IHC) on formalin -fixed paraffin embedded (FFPE) tissue specimens are used clinically to determine the HER2 status. Since tissue-based methods are relatively time-consuming and have the limitation of standardization of processing, the current study evaluated the availability of fine needle aspirates (FNA) for HER2 FISH in invasive breast cancer patients.
METHODS. FNA were obtained from 51 invasive breast cancer patients and were submitted for the evaluation of HER2 status. After ascertained invasive breast cancer components by morphological evaluation, the HER2 gene amplification were then evaluated by FISH. The results were compared with those obtained by both FISH and IHC on corresponding FFPE tissue specimens. 2007 American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists (ASCO/CAP) Guidelines Recommendations were applied to the interpretation of the results.
RESULTS. Of 51 FNA, one case was excluded due to insufficient cytologic materials for FISH analysis. Excluding the results of the equivocal category, 47 of 48 cases (98%) were concordant between the results of FISH on FNA and FISH on corresponding FFPE tissue specimens and 43 of 46 cases (93%) were concordant between the results of FISH on FNA and IHC on corresponding FFPE tissue specimens. Because cellular morphology of FNA was well preserved in HER2 FISH, it was easier and more simple to reading the fluorescence signals in cancer cells, while the fluorescence signals overlapping were frequently observed in FISH on FFPE tissue specimens.
CONCLUSIONS. The results demonstrate that FNA are useful materials for HER2 FISH analysis. As compared with existing HER2 FISH and IHC on FFPE tissue specimens, HER2 FISH on FNA enables the evaluation of HER2 status to be more rapid and accurate.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 = 1
• Ⅱ. 대상 및 방법 = 4
• 1. 검체 수집 = 4
• 2. 슬라이드 제작 = 4
• 3. HER2 FISH = 5
• 4. HER2 IHC 염색 = 6
• 5. 결과 판독 = 7
• 1) HER2 FISH = 7
• 2) HER2 IHC 염색 = 7
• Ⅲ. 결과 = 9
• 1. 미세침흡인물을 이용한 HER2 FISH = 9
• 2. 파라핀 포매 조직을 이용한 HER2 FISH = 9
• 3. 파라핀 포매 조직을 이용한 HER2 IHC 염색 = 9
• 4. 미세침흡인물을 이용한 검사와 조직 검체를 이용한 검사간의 비교 = 14
• Ⅳ. 고찰 = 17
• Ⅴ. 결론 = 23
• Ⅵ. 참고 문헌 = 24
• Abstract = 30