Transgenic plant 내에서의 cvc promoter 발현을 위한 vector의 개발 = Development of expression vector for cvc promoter in transgenic plant

국문 초록 (Abstract)

완두콩의 종자는 발달하는 과정에서 다량의 단백질을 그 떡잎에 축적시킨다. 이 현상은 발달과정에서 특별한 시기에 활발하게 일어나며, 또한 조직특이적으로 종자내에서만 일어난다. 이러한 발현의 특이성은 저장단백질의 coding region의5' flanking region에 존재하는 promoter와 enhancer라고 불리는 upstream region에 의해 조절되는 것으로 보인다.
이와같은 조절현상을 유도하는 sequence를 밝히기 위해 완두콩의 서장단백질중의 하나인 convicilin의 유전자인 cvcA의 upstream region (cvc_(pro))을 각각 다른 크기로 잘라 β - glucuronidase(GUS) expression cassette내에 삽입하였다. 그리고 이 expression cassette pGA482의 T DNA내에 삽입함으로써 expression vector를 완성하였다. 이 vector는 Agrobacterium이 가지고 있는 Ti plasmid의 식물체내로의 DNA 전이능력을 이용한 binary vector로서 transgenc plant로 사용한 담배의 chromosome내에 위의expression cassette를 전이시켜 그 발현을 유도 하였다.
보다 짧은 cvc_(pro2)는 전사개시점으로부터 -380bp를 갖는데 CCAAT TATA box와jpstream region 1과 2를 포함하고 있다. 약 1.8kb의 upstream region을 보유하고 있는 cvc_(pro1)은 cvc_(pro2)가 갖는 것 이외에 밝혀지지 않은 enhancer를 포함하고 있을 것으로 사료된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Maturing pea cotyldons accumulate large quantities of storage proteins at a specific time in seed development. To examine the sequence responsible for this tissue specific and time specific regulated expression, different sized putative promoters of cvcA storage protein gene were ligated into the β-glucuronidase(GUS) expression cassette, and expression vectors for these cvc_(pro) were made to be able to transfer into tobacco using Agrobacterium tumefaciens LBA4404.
A shorter promoter sequence of - 380bp include CCAAT - TATA box region, and several conserved sequences. The longer one may have enhancer elements. The GUS activity of control expression vector, pCM482 - 1 and pCM482 - 2 will be different. This may be due to the tissue and time specific expression of cvc_(pro).