암 치료용 Bacteriobot에서 표적 지향성 향상을 위한 PLL-엽산 적용 연구 = A Study on Application of PLL-folate for Enhancing Tumor Targeting Performance of Bacteriobots

국문 초록 (Abstract)

Targeted drug delivery system이란 대상 세포에 특이적으로 결합하는 물질을 이용하여 약물을 전달하는 시스템을 의미한다. 본 연구에서는 엽산을 이용하여 PEG(Poly Ethylene Glycol) 마이크로 구조체에 엽산 수용체를 발현하는 암 조직에 특이적으로 결합하는 능력을 부여하였다. 엽산을 PEG 마이크로 구조체에 적용하기 위해서 PEG와 결합 가능한 PLL(Poly-L-Lysine)을 이용해 PLL-엽산을 제작 하였다. 약물전달을 위한 몸체가 될 PEG 마이크로구조체는 PEG-DA와 PEG-SH를 화학적으로 결합시키기 위해 에멀전 방식으로 제작하였으며 내부에 PLGA-Docetaxel 나노구조체를 담지하고 있다. DNEMs의 암 세포 표적지향성을 검증하기 위해 Flow cytometry를 이용하였다. DNEMs를 엽산 수용체의 발현을 유도한 HeLa 세포, 엽산 수용체를 blocking한 HeLa 세포, 엽산 수용체의 발현이 거의 없는 NIH3T3 세포에 각각 처리하고 24 시간 배양 후 PBS로 씻어낸다. 이후 세포가 나타내는 형광을 Flow cytometry로 측정하여 얼만큼의 DNEMs가 엽산 수용체에 의해 세포에 표적지향성을 나타내었는지 측정하였다. 이후에 DNEMs가 세포에 얼마나 엽산 수용체가 발현된 암 세포에 특이적으로 효과를 나타내는지 측정하기 위해 위와 동일한 세포를 이용하여 MTT assay를 시행하였다. 이 방법을 통해 엽산이 적용된 약물을 담지한 마이크로구조체가 암 세포에 더 효율적으로 약물을 전달하는 것을 검증하였다.

목차 (Table of Contents)

• 1. 서론 1
• 가. 연구 배경 1
• 나. 국내외 연구 동향 3
• 1) 엽산을 이용한 특이적 약물전달 시스템 3
• 2) 마이크로구조체 내 약물 담지 6
• 3) 약물나노구조체를 이용한 치료 9
• 4) Bacteria를 이용한 치료용 로봇 개발 13
• 다. 연구 내용 15
• 2. PLL-엽산 및 Drug Nanoparticles Embedded Microcapsules 제작 17
• 가. PLL-엽산 17
• 1) PLL-엽산 제작 17
• 2) PLL-엽산의 성질 검증 20
• 나. Drug Nanoparticles Embedded Microcapsules(DNEMs) 제작 25
• 다. DNEMs의 약물방출성능 평가 25
• 3. 엽산이 적용된 DNEMs의 성능 검증 29
• 가. Flow cytometry를 이용한 DNEMs의 암세표 표적 지향성 검증 29
• 1) Flow cytometry를 위한 세포 배양 31
• 2) Flow cytometry 결과 해석 32
• 나. MTT를 이용한 DNEMs의 세포 독성 검증 37
• 4. Bacteria를 이용한 DNEBs의 제작 및 평가 38
• 가. Bacteria를 이용한 DNEBs의 제작 38
• 나. Bacteria를 적용한 DNEBs의 암 세포 지향성 및 세포독성 평가 40
• 5. 결론 및 향후 계획 42
• 가. 결론 42
• 나. 향후 계획 43
• 참고문헌 44
• Abstract 47