종묘산업의 국제경쟁력 향상을 위한 주요 십자화과 채소의 종속간의 체세포잡종기술 개발 : 최종연구보고서 = Development of somatic hybridization techniques of major Brassica vegetables for the improvement the international competition of the seed industry

목차 (Table of Contents)

• 목차
• 요약문(Summary) = 2
• 제1장 서론(Introduction)
• 제1절 연구개발의 목적과 범위(Objectives and perspectives of research) = 22
• 1. 연구개발의 필요성(Necessities of research) = 22
• 2. 연구 개발 목표 및 내용(Objectives and scopes of research) = 42
• 제2장 십자화과 유전자원 수집 및 특성검정(Collection of Brassica germplasm and characteriztion)
• 제1절 서설(Introduction) = 45
• 제2절 유전자원수집(Collection of germplasm) = 45
• 1. 계통 및 기본재료의 육성(Breeding lines and materials) = 46
• 2. 재분화율이 높은 재료육성(Breeding of high efficiency regeneration materials) = 46
• 3. MS 재료육성(Breeding of MS materials) = 46
• 제3절 CMS primer 합성 및 웅성불임 개체의 확인(CMS primer synthesis and screening) = 50
• 제3장 계통육성 및 채종체계 확립(Breeding lines and establishment of seed production system)
• 제1절 서설(Introduction) = 53
• 제2절 연구내용(Contents of research) = 54
• 1. 계통육성을 위한 유전자원의 수집(Collection of germplasm for Breeding lines) = 54
• 2. 유전자원 검정(Assay of germplasm) = 55
• 3. 수집 유전자원 특성검정 및 계통육성(Characterization and Breeding lines of collected germplasm) = 55
• 가. 배추 유전자원의 자가불화합성 검정(Self-incompatible assay of chinese cabbage germplasm) = 55
• 나. 배추와 갓의 TuMV 저항성 검정(TuMV resistant test of chinese cabbage and mustard) = 56
• 다. 배추, 갓, 양배추의 무사마귀병 저항성 검정(Croop root resistant test of chinese cabbage, mustard and cabbage) = 57
• 라. 양배추의 흑부병 저항성 검정(Xanthamonas campestris pv. campestris resistant of cabbage) = 58
• 마. 양배추의 좀나방 저항성 검정(Plutella xylostella resistant test of cabbage) = 58
• 바. 약배양을 통한 계통육성(Breeding lines of anther culture) = 59
• 제4장 식물체 재분화 및 원형질체 분리조건(Plant regeneration and protoplast isolation)
• 제1절 식물체 재분화 체계확립(Establishment of plant regeneration system) = 87
• 1. 식물생장조절제가 식물체 재분화에 미치는 효과(Effect of plant growth regulator on plant regeneration) = 87
• 2. AgNO3의 처리가 식물에 재분화에 주는 영향(Influence of AgNO₃ on plant regeneration) = 89
• 3. Genotype에 따른 식물체 재분화(Plant regeneration depend on Genotype) = 91
• 4. 식물체 본엽을 이용한 식물체 재분화(Plant regeneration using by plant tisse leaf) = 92
• 제2절 원형질체 분리 및 배양조건 구명(Protoplast isolation and inquiry of culture condition) = 96
• 1. 원형질체 분리(Protoplast isolation) = 96
• 2. 원형질체의 정제와 배양(Purification and culture of protoplast) = 100
• 3. 원형질체의 배양(Protoplast culture) = 101
• 4. 캘러스로부터 식물체 재분화(Plant regeneration from callus) = 104
• 제5장 원형질체 융합 및 체세포 잡종 식물체 선발(Protoplast fusion and selection of somatic hybrid)
• 제1절 서설(Introduction) = 106
• 제2절 원형질체 융합체계 확립(Establishment of protoplast fusion system) = 107
• 제3절 체세포잡종식물체의 선발(Selection of somatic hybrid) = 108
• 제6장 배추와(B.campestris) 와 브로콜리(B.oleracea)의 체세포잡종 식물체 생산(Production of somatic hybrid plant between chinese cabbage(B. campestris) and broccoli(B. oleracea))
• 제1절 서설(Introduction) = 111
• 제2절 B.campestris(배추) 와 B.oleracea간의 체세포잡종식물생산(Production of somatic hybrid plant between B.campestris and B.oleracea) = 114
• 1. 서론(Introduction) = 114
• 2. 실험재료 및 원형질체 분리, 융합, 배양방법(Materials and isolation, fusion, culture methods of protoplasts) = 115
• 3. RAPD 방법에 의한 융합여부의 검정(Fusion screening using by RAPD methods) = 116
• 4. Flow cytometry 분석에 의한 체세포잡종식물체 확인(Identification of somatic hybrid plant using by Flow cytometry analysis) = 117
• 5. 형태적 비교에 의한 융합여부의 검정(Fusion screening using by morphologic comparison) = 121
• 6. 추대, 개화 습성에 따른 융합체의 특성(Characterization of hybrid depend on bolting and flowering habits) = 122
• 7. 화분발아력 실험에 의한 임성검정(Fertility test using by pollen germinability test) = 124
• 8. 잡종 식물체 후대의 유지 및 증식(Maintenance and proliferation of progeny of hybrid plant) = 125
• 9. 채종체계 확립(Establishment of seed harvesting system) = 127
• 제3절 B.campestris(CMS인 chinese cabbage)와 B.oleracea(CMS인 브로콜리)의 잡종식물체 생산(Production of hybrid plant between B.campestris(chinese cabbage with CMS) and B.oleracea(broccoli with CMS)) = 129
• 1. 재료 및 방법(Materials and methods) = 129
• 2. 식물체 재분화(Plant regeneration) = 129
• 제7장 세포융합방법을 이용한 B.campestris(Chinese cabbage)와 B.oleracea(Cabbage)간의 체세포잡종식물체 생산 및 후대에서 검은뿌리 썩음병(Xanthomonas campestris pv campestris)저항성 선발(Production of somatic hybrid plant between B.campestris(Chinese cabbage) and B.oleracea(Cabbage) using by cell fusion methods and selection of Xanthomonas campestris pv campestris resistant in progeny)
• 제1절 서설(Introduction) = 131
• 제2절 원형질체 분리 및 배양(Isolation and culture of protoplasts) = 133
• 1. 재료 및 방법(Materials and methods) = 133
• 2. 원형질체 분리 융합 및 배양(Isolation, fusion and culture of protoplasts) = 133
• 제3절 Flow cytometry 분석 방법에 의한 배수성검정(Ploidy level assay with Flow cytometry) = 135
• 제4절 염색체수 관찰 및 genomis in situ(Chromosomes observation and genomic in situ) = 139
• 1. 염색체수 관찰(Chromosomes observation) = 139
• 2. Genomic in situ hybridization = 140
• 제5절 체세포잡종식물체의 형태적 비교(Morphology observation of somatic hybrids) = 145
• 제6절 개화, 추대습성 비교(Comparision of flowering, bolting habits) = 146
• 제7절 체세포잡종식물체의 교배후대1세대의 특성(Characteristic of the progeny 1 generation of the somatic hybrids) = 148
• 제8절 체세포잡종식물체의 교배2세대의 특성(Characteristic of the progeny 2 generation of the somatic hybrids) = 155
• 제9절 잡종식물체의 흑부병 저항성 검정(Detection of Xanthamonas campestris pv. campestrid resistant in somatic hybrids) = 156
• 제10절 채종체계 확립(Establishment of seed production system) = 158
• 제8장 세포융합방법을 이용한 세포질웅성 불임 특성을 갓으로 도입(Introduction of CMS traits into mustard by protoplast fusion method)
• 제1절 서설(Introduction) = 159
• 제2절 B.rapa의 세포질 웅성불임특성을 갓에 도입(Introduction of CMS characteristics of B.rapa to mustard) = 161
• 1. 실험 재료 및 종자 소독(Materials and seed sterilization) = 161
• 2. 원형질체 분리, 융합 및 배양(Protoplast isolation, fusion, culture) = 162
• 3. 분자생물학적 분석(Molecular analysis) = 163
• 4. 세포학적 분석(Cytological analysis) = 164
• 5. 형태적 특성조사(Morphological characterization) = 165
• 6. 결과(Results) = 165
• 제3절 B.oleracea의 세포질 웅성불임특성을 B.juncea에 도입(Introduction of CMS characteristics of B.oleracea to B.juncea) = 171
• 1. 원형질체 분리, 융합, 배양 및 식물체 재분화(Protoplast isolation, fusion & ulture and plant regeneration) = 171
• 2. Ogura CMS 특정 primer를 이용한 PCR 방법에 의한 재분화된 식물체의 세포질 웅성불임특성검정(Identification of CMS traits using PCR methods by Ogura CMS specific primers) = 172
• 3. Southern hybridization 방법에 의한 세포질웅성 불임특성검정(Southern hybridization) = 174
• 4. 염색체수 관찰에 의한 융합여부의 확인(Identification of somatic hybrids by chromosome counting) = 174
• 5. 융합체와 모본들의 형태적인 비교(Morphological characterics of somatic hybrids and parents) = 175
• 6. 추대양상에 의한 융합체의 비교(Comparision of bolting in somatic hybrids) = 177
• 제9장 Multi-fusion 방법 개발에 의한 세포질 웅성불임특성을 갓으로 도입(Introduction of CMS traits into mustard by Multi-fusion method)
• 제1절 서설(Introduction) = 179
• 제2절 재료 및 방법(Materials and methods) = 181
• 1. 실험 재료 및 종자 소독(Materials and seed sterilization) = 181
• 2. 원형질체 분리, 융합 및 배양(Protoplast isolation, fusion and culture) = 181
• 3. 분자생물학적 분석(Molecular analysis) = 183
• 4. 세포학적 분석(Cytological analysis) = 184
• 제3절 결과 및 고찰(Results and discussion) = 185
• 1. 원형질체 분열 및 캘러스로부터 식물체 재분화(Protoplast division and plant regeneration from callus) = 185
• 2. PCR 방법에 의한 재분화된 식물체들의 세포질웅성불임특성검정(Identification of CMS traits in regenerated plants using PCR) = 187
• 3. Southern blot hybridization 방법에 의한 검정(Southern blot hybridization) = 189
• 4. 염색체 관찰에 의한 융합여부(Chromosomes counting) = 190
• 5. 포트에 순화 및 형태적인 비교(Acclimation in pot and morphological comparision) = 191
• 6. 추대성 및 개화습성 비교(Comparision of bolting and flowering) = 197
• 제4절 채종체계확립 및 기대효과(Future prospect) = 198
• 참고문헌(Reference) = 200