Rhizobium japonicum 1-23 Glutamine Synthetase I의 분리 정제 및 성질

국문 초록 (Abstract)

Glycerol를 유일한 탄소원으로 하여, Rhizobium japonicum 1-23으로부터, Glutamine synthetase I (GS I)을 유도하였다. 이 효소를 열처리, 황산암모니움 분별침전, DEAE-Sepharose 음이온 교환, Cibacron Blue F3GA affinity chromatography 및 Ultrogel AcA 22 gel fractionation 과정을 통하여 28.8배 정제하였다. 정제된 GS I의 $\bar{n}$은 4.5이었으며, isoactivity point는 7.53이었다. GS I은 크기가 52,000인 동일한 12개의 subunit으로 구성되어 있는 전체 분자량 약 600,000으로 추정되었다. GS I의 활성은 7.14 mM의 alanine에 의하여 87.2%가 저해되었으며, 5 mM의 inosine에 의하여 98.1%가 저해 되었다. Glutamine에 대한 $K_m$값은 5.4 mM이었으며, $V_{max}$는 $6.90{\mu}mol/min/mg$이었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Glutamine synthetase I (GS I) was induced in Rhizobium japonicum 1-23 grown on glycerol as a sole source of carbon. The enzyme was purified 28.8 fold by heat-treatment ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sepharose ion-exchange chromatography, Cibacron-Blue F3GA affinity chromatography, and Ultrogel AcA 22 gel fractionation. The $\bar{n}$ and the isoactivity point of GS I were 4.5 and 7.53, respectively. Molecular weight of GS I was 600,000 composed of twelve identical 52,000 subunits. The activities of GS I were inhibited by 87.2% (7.14 mM of alanine) and 98.1% (5 mM of inosine). $K_m$ for the substrate, glutamine, was 5.4 mM and $V_{max}$ was $6.90{\mu}mol/min/mg$.