Serratia marcescens metalloprotease(SMP)의 분비단백질 유전자군(secsmp)의 분석과 새로운 경구용 생균백신 개발에의 활용(Ⅰ)

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 Serratia marcescens metalloprotease(SMP)의 분비기작과 활용에 관한 연구이다. 본 연구에서는 secl과 SMP transporter 유전자의 클로닝과 분석 연구를 수행하였다. SMP 분비능이 결손된 S. marcescens M-10 변이주를 complementation하여 SMP를 분비시킬 수 있는 secl 유전자를 클로닝하였다. 4.6kb insert DNA내부의 367kb DNA fragment에 secl 유전자가 위치하는 것을 확인하였다. secl 유전자와 그 주변의 약 1.4kb 염기서열을 결정하였다. 367kb의 secl 유전자 부위에는 48개의 아미노산을 코딩하는 ORF1과 39개의 아미노산을 코딩하는 ORF2가 발견되었다. secl 유전자 부위의 ORF1은 기능이 알려지지 않은 대장균의 f234 단백질의 C-말단 35개 아미노산 부분과 그람 음성 세균인 Xenorhabdus luminescens 세포외 단백질인 lipase의 C-말단의 35개 아미노산 부분과 각각 68％, 57％의 비교적 높은 marcescens M-10 변이주를 complementation하여 SMP를 세포외로 분비시켜 secl과 동일한 기능을 가지고 있음을 알 수 있었다. secl 유전자의 변이는 SMP의 전사에는 영향을 미치지 않았다. secl 유전자가 변이된 S. marcescems M-10 균주는 항생제에 대한 저항성이 현저히 감소된 특징이 있었다. 특히 secl 유전자의 변이는 signal piptide-independent secretory patyway를 이용하여 분비되는 SMP, lipase뿐만 아니라 signal peptide-dependent secretory pathway를 통하여 분비되는 chitnases의 분비를 차단하는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 secl 유전자는 그람 음성 세균의 두가지 단백질 분비기작(signal peptide-dependent secretory pathway와 signal peptide-independent secretory pathway)에 모두 영향을 주어 단백질의세포외 분비를 조절하는 것으로 나타났다. 한편으로는 PCR 방법으로 SMP transporter 유전자를 클로닝하여 기초적인 분석을 하였다.

목차 (Table of Contents)

• 1.서론
• 2. 실험재료 및 방법
• 3. 결과 및 논의
• 4. 결론
• 5. 참고문헌
• 6. 발표 논문 및 초록첨부
• 7. 연구비 사용내역
• 8. 연구결과 활용방안
• 9. 참고 및 건의 사항
• 10. 배출인력양성