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      임상검체에 분리된 Serratia sp. 2000-1에 의한 Protease의 생산 및 효소학적 성질 = The Production and Properties of Protease by Serratia sp. 2000-1 Isolated from Clinical Specimes

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      https://www.riss.kr/link?id=A3010548

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      국문 초록 (Abstract)

      본 논문은 환자들의 병소에서 채취된 가검물에 존재하는 미생물들 가운데 protease을 분비하는 균주들을 분리하고, 그 가운데 가장 효소생산력이 우수한 균주를 선정하여 가정용 Protease 세제생산에 활용 가능성을 알아보고자 그들이 생산하는 pretense의 기초적 생산조건 및 부분적 효소학적 특성 등에 관한 실험에서 얻은 결과들을 보고하고자 작성되었다. Serratia sp. 2000-1로 동정된 본 실험 균주가 생산하는 protense의 기초적 생산조건과 부분적 효소학적 특성을 조사한 결과 효소생산을 위한 최적 배지에 탄소원과 질소원 그리고 금속염의 종류와 농도는 각각 Glucose 1.5% C.S.P 2.0% Cacl2 0.1%였다. 그리고 최적 배양온도는 30℃, 초발 pH는 8.0, 배양시간은 72시간 이었다. Protease의 정제는 ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose, Sephadex G-200 column을 통하여 분리 정제하였으며 이때 최종 효소수율은 14.4%, 효소 비활성도는 약 29배 증가한 것으로 나타났다, 그리고 효소 작용의 최적온도와 pH는 35℃와 pH 8.0으로 나타났고, 효소 작용의 열과 pH에 대한 안정성은 40℃와 pH 6∼10까지는 효소의 활성이 비교적 안정한 것으로 나타났다. 금속이온들 중 Mg2+, Ba2+, Ca2+, Mn2+ 은 효소활성을 촉진하나 Hg2+, Ag2+, Cu2+는 효소활성을 저해하는 것으로 나타났다. 그리고 효소활성 저해제들 중에는 SDS가 가장 강하게 효소활성을 저해하는 것으로 나타났다.
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      본 논문은 환자들의 병소에서 채취된 가검물에 존재하는 미생물들 가운데 protease을 분비하는 균주들을 분리하고, 그 가운데 가장 효소생산력이 우수한 균주를 선정하여 가정용 Protease 세제...

      본 논문은 환자들의 병소에서 채취된 가검물에 존재하는 미생물들 가운데 protease을 분비하는 균주들을 분리하고, 그 가운데 가장 효소생산력이 우수한 균주를 선정하여 가정용 Protease 세제생산에 활용 가능성을 알아보고자 그들이 생산하는 pretense의 기초적 생산조건 및 부분적 효소학적 특성 등에 관한 실험에서 얻은 결과들을 보고하고자 작성되었다. Serratia sp. 2000-1로 동정된 본 실험 균주가 생산하는 protense의 기초적 생산조건과 부분적 효소학적 특성을 조사한 결과 효소생산을 위한 최적 배지에 탄소원과 질소원 그리고 금속염의 종류와 농도는 각각 Glucose 1.5% C.S.P 2.0% Cacl2 0.1%였다. 그리고 최적 배양온도는 30℃, 초발 pH는 8.0, 배양시간은 72시간 이었다. Protease의 정제는 ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose, Sephadex G-200 column을 통하여 분리 정제하였으며 이때 최종 효소수율은 14.4%, 효소 비활성도는 약 29배 증가한 것으로 나타났다, 그리고 효소 작용의 최적온도와 pH는 35℃와 pH 8.0으로 나타났고, 효소 작용의 열과 pH에 대한 안정성은 40℃와 pH 6∼10까지는 효소의 활성이 비교적 안정한 것으로 나타났다. 금속이온들 중 Mg2+, Ba2+, Ca2+, Mn2+ 은 효소활성을 촉진하나 Hg2+, Ag2+, Cu2+는 효소활성을 저해하는 것으로 나타났다. 그리고 효소활성 저해제들 중에는 SDS가 가장 강하게 효소활성을 저해하는 것으로 나타났다.

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      다국어 초록 (Multilingual Abstract)

      The purpose of this study was to investigate the practical availability of protease production that can be used at home after isolating Serratia sp. 2000-1 which produced extracellular pretease from clinical specimen. Basic production conditions and partial enzymatic characteristics of pretease produced by Serratia sp. 2000-1 was as follows: The kind and concentration of carbohydrate, nitrogen and metal salts fur optimal enzyme production condition were each identified as the concentration of 1.5% glucose, 2.0% CSP, and 0.1% Cacl2, and the optimal temperature, time and initial pH for culture were each 30℃, 72 hours, and pH 8.0. The final enzymatic yeild that was purified by 3 steps with ammonium sulfate precipitation (45∼80%), DEAE-cellulose column chromatography, and Sephadex G-200 gel chromatography was 14.4%, and enzyme inactivity rate increased approximately 29 folds. The optimal temperature and pH for purified protease activity were 35℃ and pH 7.0∼8.0, and purified pretense activity was relatively stable by 40℃ at pH 6∼10 for 30 min, however heating at 60℃ for 30 min, it liminated detectable pretease activity. The protease activity was activated by Mg2+, Ba2+, Ca2+, Mn2+, but inactiviaed by Hg2+, Ag+, Cu2+, and the protease activity was inhibited strongly by SDS among enzyme activity inhibitors. Further study is required to evaluate the practical availability of pretease production that can be used at home by isolating Serratia sp. from more clinical specimen and examining protease more in details.
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      The purpose of this study was to investigate the practical availability of protease production that can be used at home after isolating Serratia sp. 2000-1 which produced extracellular pretease from clinical specimen. Basic production conditions and p...

      The purpose of this study was to investigate the practical availability of protease production that can be used at home after isolating Serratia sp. 2000-1 which produced extracellular pretease from clinical specimen. Basic production conditions and partial enzymatic characteristics of pretease produced by Serratia sp. 2000-1 was as follows: The kind and concentration of carbohydrate, nitrogen and metal salts fur optimal enzyme production condition were each identified as the concentration of 1.5% glucose, 2.0% CSP, and 0.1% Cacl2, and the optimal temperature, time and initial pH for culture were each 30℃, 72 hours, and pH 8.0. The final enzymatic yeild that was purified by 3 steps with ammonium sulfate precipitation (45∼80%), DEAE-cellulose column chromatography, and Sephadex G-200 gel chromatography was 14.4%, and enzyme inactivity rate increased approximately 29 folds. The optimal temperature and pH for purified protease activity were 35℃ and pH 7.0∼8.0, and purified pretense activity was relatively stable by 40℃ at pH 6∼10 for 30 min, however heating at 60℃ for 30 min, it liminated detectable pretease activity. The protease activity was activated by Mg2+, Ba2+, Ca2+, Mn2+, but inactiviaed by Hg2+, Ag+, Cu2+, and the protease activity was inhibited strongly by SDS among enzyme activity inhibitors. Further study is required to evaluate the practical availability of pretease production that can be used at home by isolating Serratia sp. from more clinical specimen and examining protease more in details.

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      목차 (Table of Contents)

      • 서론
      • 재료 및 방법
      • 1.균주의 분리 선정과 동정 및 균체량 측정
      • 2.효소의 생산조건
      • 3.효소의 활성 및 단백질 측정
      • 서론
      • 재료 및 방법
      • 1.균주의 분리 선정과 동정 및 균체량 측정
      • 2.효소의 생산조건
      • 3.효소의 활성 및 단백질 측정
      • 4.효소의 정제
      • 5.정제된 Protease의 효소학적 특성
      • 결과
      • 1.분리균주의 특성 및 동정
      • 2.효소의 생산조건
      • 3.효소의 정제
      • 4.실험 균주에 의해 생산된 proteasa의 일반적 성질
      • 고찰
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