만삭 태반과 조산 태반 양막세포의 리포다당질 처리시 Nuclear Factor-kappa B (NF-ｋB)의 활성화 양상의 차이 = Lipopolysaccharide-induced activation of Nuclear Factor-kappa B (NF-ｋB) in amnion cells of term and preterm placentas

국문 초록 (Abstract)

연구목적 : 양막세포에 세균성 리포다당질(Lipopolysaccharides, LPS)을 처리하였을 때 만삭과 조산에서의 nuclear factor-kappa B (NF-κB)의 활성화 양상에 차이가 있는지 관찰하고, NF-κB의 억제제를 함께 투여하였을 때 양막세포에서의 proinflammatory cytokines의 생산에 변화가 오는지를 보고자 하였다.
연구대상 및 방법 : 단태임신으로 다양한 임신 주수에 분만된 태반을 대상으로 하였다. 분만된 태반에서 양막을 채취하여 채취한 양막에서 분리한 양막세포는 리포다당질로 처리한 뒤 NF-κB 의존유전자 투입 후 luciferase assay를 하였고, electrophoretic mobility shift assay(EMSA) 기법, p65에 대한 면역형광염색을 통하여 자극을 받았을 때 NF-κB의 활성도가 임신 주수에 따른 차이가 있는지 보았다. 양막세포에 리포다당질을 처리할 때 tosyl phechloromethylketone (TPCK)을 투여하여 NF-κB의 활성을 억제하면 interleukin 6(IL-6) 생산에 어떤 변화가 오는지 관찰하였다.
결과 : 1) 만삭과 조산의 양막세포에서 리포다당질 처리 후 NF-κB 활성화 양상을 비교하였을 때 NF-κB 의존유전자 투입 후 luciferase assay, EMSA 기법, 면역형광염색 결과 공통적으로 만삭보다 조산의 양막세포에서 NF-κB 활성이 증가함을 보였다. 2) 조산 내에서도 임신 주수가 적을수록 리포다당질 처리에 따른 NF-κB 활성이 증가하는 양상을 보였다. 3) 리포다당질과 NF-κB 억제제인 TPCK를 함께 처치하자 임신 주수와 무관하게 양막세포에서 IL-6 생산이 억제되었다.
결론 : 임신 주수가 적을수록 NF-κB의 활성화는 더욱 크게 나타났다. 또한 NF-κB를 억제하면 cytokines의 생성이 나타나지 않아 태아 염증 반응을 일으키는 cytokines 생성에 NF-κB의 활성은 핵심적인 역할을 함을 확인하였다

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Objective : The aim of this study was to investigate 1) whether NF-κB activation in amnion cells following treatment with bacterial lipopolysaccharide (LPS) is influenced by gestational ages and 2) whether inhibitor of NF-κB activation causes suppression of IL-6 production.
Methods : Placentas were obtained from patients with various gestational age in singleton delivery during the period from May, 1993 to November, 2002. Amnion cells were harvested from placentas and treated with LPS. NF-κB activation in treated amnion cells was analyzed and compared according to gestational age by luciferase assay, electrophoretic mobility shift assay (EMSA), and immunofluorescence staining for p65. Amnion cells were also treated with LPS and TPCK, to investigate whether IL-6 production is dependent on NF-κB activation or not.
Results : 1) Increased magnitude of NF-κB activation in preterm amnion cells when compared with that of term counterpart after LPS treatment could be demonstrated. 2) There was an inverse relationship between the gestational age and NF-κB activation on luciferase assay of NF-κB dependent gene expression by transient transfection. 3) IL-6 production by amnion cells after lipopolysaccharide treatment was abrogated after treatment with TPCK irrespective of gestational age.
Conclusion : There was an inverse relationship between the degree of NF-κB activation in amnion cells and the gestational age. NF-κB seems to play a pivotal role in the regulation of cytokine production by amnion cells. NF-κB is a strong candidate for the robust fetal inflammatory response in preterm period