현행 AIDS 검사체계로 진단 불가능한 HIV 감염자 검색을 위한 새로운 검사법 확립 및 감시체계 구축 = Establishment of new testing strategy and surveillance system for the screening the seronegative HIV infection

국문 초록 (Abstract)

2001년 국내에서 처음으로 seronegative H1V 감염 사례가 보고되었으며 2003년 항체 미형 성기의 H1V 감염혈액에 의한 HIV 전파사례가 발표됨에 따라 헌혈자 혈액의 안전 및 진단 감시 목적의 HIV 검사전략에 유전자 검출법 (NAT. nucleic acid amplification test)을 도입해야 한다는 의견이 제기되었다. 따라서 HIV/AIDS 감염을 확인할 수 있는 분자적 방법을 표준화하고. 현행 HIV/AIDS 검사체계를 보완할 수 있는 병원중심의 감시체계를 구축하여 HIV 항체음성이나 AIDS 의심환자군을 대상으로 분자적 방법에 의한 HIV 감염율을 모니토링 함으로써 일상적 인 HIV/AIDS 감염진단에 새로운 HIV 검사법을 도입할 필요가 있는지를 평가하고자 하였다. 감시사업을 위해 14개 병원 network을 구축하여 급성감염 및 에이즈 증후질환’의 임상적 소견을 갖는 환자의 HIV 감염여부를 조사하였다. 의뢰혈액으로부터 PBMCs (peripheral blood mononuclear cells)와 혈장을 분리하고 각각으로부터 DNA와 RNA를 추출한 후. DNA-PCR과 RNA 정량검사 (NucliSens HIV-1 QT. Biomeriux)를 수행하였다. In house PCR에 의한 HIV-1 subtype별 검출율을 조사한 결과, pol 유전자 HI primer에 의해 subtype B와 non-B의 67주 모두에서 HIV-1 유전자가 검출됨으로써 감도가 매우 높음을 알 수 있었다. 또한 확립한 HIV-2 유전자 검출법에 의해 7주 중 6주의 유전자를 검출할 수 있었으며 염기서열분석이 이루어진 5주 중 4주가 하나의 monoclade를 형성하고 밀접한 유전적 거리가 나타냄으로써 하나의 strain에서 전파되고 있음을 확인하였다. HIV-1 seronegative이지만 fever 등의 임상적 소견으로 보인 19명으로부터 HIV-1 특이적인 DNA가 검출되지 않았으며, 참여병원의 임상적 소견을 지닌 의뢰건수를 고려할 때 국내의 seronegative HIV 감염 사례를 발견하기가 극히 어려웠다. 또한 초기 HIV 감염으로 간주되는 21명 모두에서 DNA를 검출할 수 있었으며 이러한 결과는 18개월 미만의 신생아 또는 “Indeterminate” 등 혈청학적 방법만으로 HIV 감염진단이 어려운 샘플에서 유전자 검출법의 유용성을 나타낸 것이다. 비록 샘플수가 적은 제한점은 있으나 국내에서 seronegative H1V 감염사례를 발견할 수 없었으며, 이러한 결과로부터 HIV 감염진단에 유전자 검사를 전면적으로 도입하기보다는 병원에서 임상의사의 판단으로 필요시에 유전자 검사를 수행함이 타당할 것으로 생각된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Recently, seronegative HIV infection has been first reported in our country, and in 2003, the blood transfusion case by the contaminated blood has been reported in window period. Thus, it was suggested that Nucleic-acid Amplification Test (NAT) should be introduced in HIV diagnostic strategy that was for the purpose of blood safety, diagnosis, and surveillance. Therefore, the molecular method was standardized to identify HIV/ADIS infection and it was evaluated that whether NAT was needed in the usual HIV/AIDS infection diagnosis or not through monitoring the infection rate with molecular method for the HIV-seronegative or A IDS-suspected patients by constructing the hospital surveillance system. The network of 14 hospitals was constructed for the surveillance and the HIV infection was investigated for patients who had the clinical opinion of the acute HIV infection and AIDS. PBMCs (peripheral blood mononuclear cells) and plasma were isolated from the blood of patients, repectively. DNA and RNA were isolated, and DNA-PCR and RNA quantification (NucliSens HIV-1 QT. Biomeriux) were carried out. The detection rate of HIV-1 subtypes was investigated with in house PCR method by using HI primer for pol gene. It was demonstrated that this method showed the very high sensitivity to detect HIV，1 gene. And also. 6 of 7 strains was detected by the established HIV-2 NAT. and 4 of 5 strains, which were sequenced, showed that they belonged to one monoclade and the genetic distance was very close. Therefore, it was demonstrated that these strains were originated in one strain. HIV-1 specific DNA was not detected from 19 patients that had the clinical symptom of fever although they were all seronegative. As considering the clinical symptom of the participating hospitals, the case of the seronegative HIV infection was very rarely detected in our country. And also, all HIV-1 genes of 21 patients who were considered as the early HIV-infected were detected. It showed that this NAT was very useful in the samples in which HIV infection diagnosis was very hard to detect serologically in infants or the indeterminate. Although there were limited samples, seronegative HIV infection was not observed in our country. From this result, it was concluded that it was reasonable to carry out NAT in HIV infection according to the clinical doctors decision in the hospital rather than the extensively introduction of NAT.