TNF-α를 이용한 임신중독증 생쥐모델에서 특정 당화 면역 글로불린의 면역억제 효과 규명연구 = Investigation of the Immunosuppressive Effects of a Specific Glycosylated Immunoglobulin in a TNFα Induced Preeclampsia Mouse Model

국문 초록 (Abstract)

본 연구는 TNF-α (Tumor Necrosis Factor-alpha) 과발현 임신중독증 생쥐 모델을 활용하여, 특정 당화 (glycosylation) 형태를 가진 면역글로불린의 면 역억제 효과를 규명하는 것을 목적으로 수행되었다.
임신중독증 (자간전증, preeclampsia)은 전 세계 임산부의 약 5% 이상에서 발생하는 비교적 흔한 임신 합병증으로, 임신 20주 이후에 고혈압, 단백뇨, 경련 등의 다양한 임상 증상을 동반하여 나타난다. 그러나 아직까지 임신중 독증의 명확한 병인 기전은 규명되지 않았으며, 이를 규명할 수 있는 재현 성 높은 동물 모델의 개발이 절실한 상황이다.
TNF-α는 대표적인 염증성 사이토카인으로, 자가면역질환 및 만성 염증성 질환의 발병과 진행에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 최근 연구 에 따르면, 면역글로불린의 당화 형태는 면역조절 기능에 영향을 미칠 수 있으며, 특정 당화 패턴이 면역억제 효과를 나타낼 가능성이 제기되고 있다.
이에 본 연구에서는 TNF-α 과발현 생쥐 모델을 구축한 후, 특정 당화 패 턴을 가진 면역글로불린을 정제하여 실험군에 투여하였다. 대조군(DPBS)에 는 일반 면역글로불린 또는 DPBS를 투여하여 비교 분석을 진행하였다.
투여 경로에 따른 비교에서는 피하주사(S.C.)보다 안와정맥주사(I.V.) 및 복 강주사(I.P.)에서 TNF-α 생쥐와 대조군 생쥐 간의 태아 및 태반 조직에서 유 의미한 차이가 보였으며, 염증 관련 조직 병리학적 분석에서도 두 군 간에 뚜렷한 조직학적 차이를 보였다.
현재는 간, 폐, 비장, 태반 등 다양한 조직에 대한 면역반응 분석과 함께, 조직 내 면역세포의 분포 및 활성 변화에 대한 후속 연구가 진행 중에 있 다. 이를 통해 특정 당화 면역글로불린의 면역조절 기전을 보다 명확히 규 명하고, 향후 임신중독증의 치료 전략 수립에 기초자료로 활용하고자 한다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

This study aimed to elucidate the immunosuppressive effects of immunoglobulins with specific glycosylation patterns utilizing a TNF-α overexpressing preeclampsia mouse model.
Preeclampsia is a relatively common pregnancy complication affecting more than 5% of pregnant women worldwide, characterized by various clinical manifestations including hypertension, proteinuria, and seizures after 20 weeks of gestation. However, the precise pathophysiological mechanisms underlying preeclampsia remain largely unelucidated, necessitating the development of reproducible animal models to investigate this condition.
Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF-α) is a prominent inflammatory cytokine known to play a crucial role in the pathogenesis and progression of autoimmune and chronic inflammatory diseases. Recent studies suggest that glycosylated forms of immunoglobulins may influence immunomodulatory functions, with specific glycosylation patterns potentially exhibiting immunosuppressive effects.
In this study, we established a TNF-α overexpressing mouse model and administered purified immunoglobulins with specific glycosylation patterns to the experimental group.
The control groups received either standard immunoglobulins or saline solution for comparative analysis. Comparative analysis of administration routes revealed that intravenous (I.V.) and intraperitoneal (I.P.) injections demonstrated more significant differences in fetal and placental tissues between TNF-α mice and control mice compared to subcutaneous (S.C.) injections. Additionally, inflammation-related histopathological analysis exhibited distinct histological differences between the two groups.
Currently, subsequent investigations are underway to analyze immune responses in various tissues including liver, lung, spleen, and placenta, along with changes in the distribution and activation of immune cells within these tissues.
Through these studies, we aim to more precisely elucidate the immunomodulatory mechanisms of specifically glycosylated immunoglobulins and utilize these findings as foundational data for establishing therapeutic strategies for preeclampsia.

목차 (Table of Contents)

• 제1장 서론 1
• 제2장 실험 재료 및 방법 4
• 제1절 B6 임신 생쥐 4
• 제2절 비침습적 쥐꼬리 혈압측정 장비 4
• 제3절 TNF-α 물질 및 GC Glyco 물질 5
• 제4절 TNF-α 투여 방법 6
• 제5절 항체 6
• 제6절 웨스턴 블롯 6
• 제3장 결과 10
• 제1절 TNF-α를 이용한 임신중독증 생쥐모델 제작방법 10
• 제2절 TNF-α 피하주사 투여를 이용한 임신중독증 생쥐모델 10
• 제3절 임신중독증 생쥐 모델 구축을 위한 안와정맥주사 TNF-α 농도 결정 17
• 제4절 TNF-α 안와정맥주사 투여를 이용한 임신중독증 생쥐모델 21
• 제5절 TNF-α 안와정맥주사와 복강주사 투여를 이용한 임신중독증 생쥐모델 30
• 제4장 결론 및 고찰 37
• 참고문헌 40
• ABSTRACT 43