과발현된 p16INK4a 유전자의 pRB 의존적 또는 비의존적 pathway틀 통한 간암세포주의 성장 저해 = Pl6INK4a Overexpression Inhibited Growth of HCC Cell Lines Through Either pRB Dependent or Independent Pathway

국문 초록 (Abstract)

p16INK4a는 세포주기의 Gl기에서 cyclin Dl과 cdk4/6의 결합을 방해하는 강력한 inhibitor로 RB 유전자산물의 인산화를 조절한다. 먼저 7종의 사람 간암 (human hepatocellular carcinoma:HCC) 세 포주를 대상으로 하여 p16의 분자상태를 조사하였다. 대상 세포주중에서 SKHepl과 SNU449 세 포주는 pl6INK4a locus의 homozygous 결손을 나타내었고 SNU398은 전사 후 조절단계에서의 비활성화로 인한 기능의 상실을 나타내었다. 이는 p16Ink4a가 간암의 carcinogenesis에서 중요한 역할을 함을 시사한다. 또한 유전자 치료를 위한 P161NK4a의 간암세포성장 억제 효과를 알아보기 위하여 p16 유전자를 포함한 아데노바이러스 벡터를 간암 세 포주에 감염시켰다. Hep3B, SNU398, SNU449에서는 P16INK4a가 세포의 성장을 저해했으나 Chang liver, HepG2, SNU182, SKHepl에서는 세포의 성장 저해를 나타내지 않았다. 특히 SKHepl에서의 성장저해 실패는 재조합 아데노바이러스의 낮은 transduction efficiency 때문으로 밝혀졌다. 또한 pRB가 존재하는 SNU449에서 p16INK4a에 의한 성장 저해 작용 시 세포주기 는 GO/G1기에 머물러 있었으나 pRB가 없는 Hep3B에서는 그렇지 않았다. 이러한 결과는 간암에서 pI6INK4a의 유전자치료 대상으로서의 가능성을 제시하는 것으로 pRB에 의존하거나 또는 비의존적이 거나 간에 p16INK4a가 암세포 성장을 방해할 수 있다는 것을 의미한다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The p16INK4a 15 a major inhibitor of cyclin D-cdk4/6 complex and regulates the phosphorylation of the RB gene product. To evaluate the therapeutic efficacy of p16INK4a on human hepatocellular carcinoma cell lines (HCC), we analyzed the inactivation and growth inhibitory effect of p16lNK4a in seven HCCs. Among seven HCC cell lines tested, SKHepI and SNU449 cells showed homozygous deletion of p16lNK4a locus, and SNU398 cell might be inactivated at posttranscription level, indicating the importance of p16INK4a in HCC carcinogenesis. Adenoviral transduction of p16INK4a gene inhibited the cell growth in Hep3B, SNU398, and SNU449, but not in Chang liver, HepG2, SNU182, and SKHepl, which shows p16lNK4a gene deletion. Failure of growth inhibition in SKHepl is due to low transduction efficiency of recombinant adenovirus. While p16lNK4a-mediated growth inhibtion of pRB-positive SNU449 was arrested at the GO/Gl phase of cell cycle, but that of pRB-negative Hep3B was not. These results suggest that therapeutic efficacy of p16lNK4a gene might be considered on the ability of adenoviral transduction and the cytotoxicity of adenoviral vector itself in HCC. Moreover, growth inhibitory effect of p16INK4a could be exerted through either pRB- dependent or-independent pathway.