Identification of 1H-pyrazolo{3,4-b} pyridine derivatives as anaplastic lymphoma kinase (ALK) inhibitors

국문 초록 (Abstract)

ALK는 NSCLC의 표적 치료의 전망 있는 분자 표적으로 인식되고 있다. 가장 먼저 FDA에서 crizotinib이 승인되어 NSCLC 환자들에게 사용되었으나 투여한 환자들에서 L1196M (ALK gate keeper돌연변이)와 같은 2차 내성 돌연변이가 발견되었다. 우리는 L1196M 변이로 인해 발생한 crizotinib 내성돌연변이를 제압하기 위해 pyrazolopyridine을 골격으로 하는 화합물들을 합성하였다. 합성한 신규 유도체들의 head group을 기준으로 크게 아마이드, 이중결합 그룹으로 양분해서 SAR분석을 진행하였고 그 중 아마이드 linker를 가지는 화합물에서 24g를 확인하였다. 24g 화합물은 ALK-wt과 ALK-L1196M에서 아주 뛰어난 효소 활성을 보여주었고 (< 0.5 nM of IC50) 이러한 활성은 기존 ALK저해제인 crizotinib의 활성 수치인 980 nM보다 월등한 수치로 주목할 만한 결과였다. 화합물 24g는 또한 ALK 외에도 ROS1에서도 뛰어난 활성을 보였고 (< 0.5 nM of IC50) c-Met효소에서도 매우 선택적인 화합물인 것을 보여주었다. EML4-ALK를 가진 ALK-L1196M-Ba / F3 및 H2228 세포의 사멸 및 ALK 신호 차단에 의한 증식을 강력히 억제했다. 그리고 분자 docking 연구를 통하여 화합물 24g가 crizotinib과는 대조적으로 ALK-L1196M 효소 domain에서 M1196와 수소결합을 할뿐만 아니라 K1150 및 E1210, 아미노산 2 개와 추가적인 수소 결합을 하고 있음을 밝혔다. 이 SAR 연구는 crizotinib 내성을 극복하는 것을 목표로, ALK gate keeper 돌연변이에 대한 새롭고 강력한 저해제를 설계하기위한 유용한 통찰력을 제공 할 수 있다.

목차 (Table of Contents)

• List of Abbreviation ………………………………………………………………………….....ii
• List of Schemes ………….…… ………….………………………………………..…..…..…... iv
• List of Tables ………………………………………………………………...………………... v
• List of Figures ……………………………………………………...……………....……….… vi
• Abstract ………………………………………………………….………………………...…... 1
• Introduction …………………………………………………………............................………. 2
• Results and Discussion ……………………………………………………....…....…………… 7
• 1. Synthesis of ALK inhibitor analogues.
• 2. Result of Enzymatic and Cellular inhibitory activities.
• 3. Structure-activity relationship.
• 4. Docking Study of 24g with ALK-wt and ALK-L1196M.
• Conclusion ……………………………………………………….…………………………....19
• Materials and Methods ……………………………………………………….………….…….21
• Supplementary data …………………………………………………………….….…………..42
• Reference ……………………………………………………………………….….…………..76
• Abstract in Korean …………………………………………………………….……….………80