Effects of epigallocatechin-3-gallate on high glucose-induced glomerular epithelial cell damage

국문 초록 (Abstract)

본 과제에서는 C. albicans 감염시 PAF에 의한 NF-κB 초기 활성화에 따른 TNF 발현이 중요한 보호 기작이라는 사실, 그리고 병원성 C. albicans가 신장에서 PAF에 의한 초기 NF-κB 활성 억제를 통하여 TLR2, TLR4 발현이 억제되며 이에따른 신장 손상이 발생한다는 연구결과를 토대로 하여, 병원성 C. albicans 감염시 TLRs 발현 억제 및 신장 손상에 관여하는 molecus, PAMPs 혹은 C. albicans의 병원성인자를 밝히고자 한다. 이를 위하여 1) TLRs downregulation에 mannan의 역할, 2) TLRs downregulation에 proteinase(Saps)의 역할, 3) TLRs downregulation에 yeast, hyphae form의 역할 연구, 아울러 각 단계에서 TLRs 발현과 신장손상기작 연구를 수행하고 있는 중이다.

TLRs downregulation에 mannan의 역할
C. albicans mannan과 TLRs에 관한 연구는 mannan이 TLR4와 CD14에 의해 인식되며, phospholipomannan은 TLR2에 의해 인식된다는 보고외에 TLR2, 4-의존적인 mannan에 관한 연구는 찾아볼 수 없다. 그러나 C. albicans mannan은 mannose 잔기의 1->6결합(알파)으로 구성된 branched 다당류로 C. albicans의 주요한 병원성 인자이며, Candida의 protective factor로서 TLRs에 의해 인식될 수 있는 가장 가능한 PAMPs이기 때문에 병원성 C. albicans 감염시 억제되는 TLRs 발현, MyD88발현에 관여할 가능성이 높다. 이를 증명하기 위하여 병원성과 비병원성 C. albicans 세포벽으로 부터 mannan을 정제하여 다음과 같은 실험을 계획하고 있으며, 이미 병원성과 비병원성 Candida mannan을 마우스 대식세포에 처리하였을 때 비병원성 mannan 처리 시 TLRs 발현이 증가되는 성적을 얻고 있다.

TLRs downregulation에 proteinase(Saps)의 역할
C. albicans의 aspartyl proteinase(Saps), 세포벽 효소를 파괴시킨 mutant Candida는 병원성을 소실한다는 보고를 비롯하여 Saps이 Candida 감염의 가장 주요한 병원성 인자로 알려져 있다, 또한 Saps이 IL-1과 같은 염증성 cytokines을 생산하여 염증반응의 활성 및 유지에 관여함을 고려할 때, Saps도 TLRs에 의해 인식되는 C. albicans의 PAMPs 일 가능성을 가정할 수 있다. 그러나 TLR와 Saps과의 관계를 밝힌 보고는 아직까지 전무하다. 이를 위해서 병원성 및 proteinase 활성이 소실된 비병원성 C. albicans를 이용하여, 병원성 C. albicans에 의한 TLRs 발현억제에 proteinase의 관련 가능성을 연구하고자 한다.

TLRs downregulation에 yeast, hyphae form의 역할
C. albicans에 의한 감염시 hyphae 형성은 숙주조직을 침투하기 위한 중요한 과정이며, hyphae가 yeast형 보다 병원성이라고 알려져 있다. 따라서 C. albicans의 hyphae도 TLRs 인식에 관여할 가능성이 있다. Aspergillus의 conidia와 hyphae는 TLR2를 통해 cytokines 생성을 자극하지만 conidia는 TLR4를 통해 마우스 대식세포를 활성화할 수 있다는 보고, conidia에서 hyphae로의 분화될때 TLR4에 의해 유도되는 염증성 signals이 주어지지 않으면 숙주가 Aspergillus를 방어할 수 없다는 보고 등을 종합하면, conidia는 TLR2와 4 모두에 의해 인식되어 cytokine을 생산, 숙주의 면역반응을 유발 하지만 hyphae는 TLR2를 자극하여 숙주의 방어반응을 피할 수 있다는 것이다. 본연구는 병원성 C. albicans 감염시 TLRs의 발현 손상에 hyphae의 관련성을 연구하고자 다음과 같이 실험을 계획하고 진행하고 있는 중이다.

본 연구는 C. albicans에 의한 TLR2 및 4 발현에 의한 방어 면역(신장 손상 포함) 에 관한 기전 연구이다. 이미 수행하고 있는 연구의 결과를 바탕으로 비병원성 C. albicans에 의해 TLR2 및 TLR4가 활성화되지만 TLR2 및 TLR4 모두 활성화되는 기전에 관한 연구는 찾아볼 수 없다. C. albicans의 경우에도 Aspergillus와 유사한 기전(conidia는 TLR2와 4 모두에 의해 인식되어 cytokine을 생산, 숙주의 면역반응을 유발 하지만, hyphae는 TLR2를 자극하여 숙주의 방어 면역을 피할 수 있다는 보고에 의하는지 실험하고자 하며, 아울러 TLR2 및 4에 의한 신호 전달과정에서 MyD88-의존적 혹은 -비의존적인지 실험하여 C. albicans에 의한 감염시 숙주의 방어 면역 기전(신장 손상 기작)을 밝히고자 한다.