Properties of an Extracellular 5-Fluorocytosine Deaminase = 세포외 5-Fluorocytosine Deaminase의 특성

국문 초록 (Abstract)

토양 분리균주로부터 얻은 배양액을 20∼80% 황산 암모늄으로 분획한 후 세포외 cytosine deaminase의 성질을 검토하였다. 이 효소는 cytosine과 5-fluorocytosine(5-FC)에 기질 특이성을 가짐으로서 각각 uracil과 5-fluorouracil(5-FU)로의 전환을 촉매하였다. 효소안정성에 대한 온도와 보존시간을 tris-HCl 완충 용액에서 검토한 결과 최적온도는 50℃ 부근이하에서 90% 이상의 잔존활성을, 보존시간은 4일정도에서 80% 이상의 잔존활성을 유지하였다. 최대활성은 pH 8.0과 37℃의 온도에서 나타났다. 활성에 적당한 pH는 8.O∼8.5였고 온도는 37∼45℃의 범위였다. 한편 이 효소는 Ag^+, Hg^2+, Zn^2+, Cu^2+, Sn^2+와 Pb^2+ 등의 금속이온이 존재하면 그 활성이 강력하게 저해 되었으며, K^+, Fe^3+, Mg^2+, 또는 Na^+ 등은 효소활성을 다소 증가시키는 것으로 보였다. 또한 이 효소는 1 mM의 EDTA, NaCN, 또는 pentachlorophenol 등과 같은 검증된 대부분의 효소저해제에 의해 그 활성이 상당한 영향을 받았으며, 특히, 1mM과 10mM의 p-CMB와 TCA 등에는 완전한 불활성화를 보였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Some properties of an extracellular cytosine deaminase excreted from an isolate from soil samples were examined after 20∼80% ammonium sulfate fractionation. The enzyme catalyzed the conversion of cytosine and 5-fluorocytosine into uracil and 5-fluorouracil by substrate specificity, respectively. The optimum temperature and storage time on the stability of the enzyme preparation were below 50℃ keeping above 90% of the residual activity and near 4 days keeping above 80% of the residual one in Tris-HCl buffer. The maximum activity was also obtained at 8.0 in pH and 37℃ in temperature. The pHs and temperatures for enzyme activity ranged from 8.O∼8.5 and from 37∼45℃, respectively. The presence of Ag^+, Hg^2+, Zn^2+, Cu^2+, Sn^2+, or Pb^2+ in the reaction mixture resulted in the marked inhibition in enzyme activity, but 1 mM of K^+, Fe^3+, Mg^2+ or Na^+ slightly increased the activity. The enzyme preparation was heavily affected by most of inhibitors tested such as 1 mM of EDTA, NaCN and pentachlorophenol, and completely inactivated by p-CMB and TCA of 1 mM, or 10 mM.