대장암 유발쥐를 이용한 암세포에서 운동유발성 HSP70(72)의 Apoptosis 억제(세포보호)효과 및 기전(p53, caspase-3) 규명

국문 초록 (Abstract)

본 연구의 목적은 일회성 및 장기간 유산소성 운동(tredmill exercise)이 대장암 세포에서 HSP 70(72) 단백질의 발현양상과 세포자멸사 관련 기전(p53, Bcl-2, Bcl-xl, Bax, caspase-3, JNK)에 미치는 영향을 규명하는데 그 목적이 있다. 이에 본 실험에서는 대장암세포에서의 세포자멸사를 FACS와 TUNEL 방법으로, 세포자멸사 억제인자인 HSP70의 발현 확인은 western bloting으로 분석할 것이다. 연구대상은 정상쥐(C57BL/6) 4주령 70마리를 사용하여 1차 연구에서는 대장암을 유발(AOM injection & DSS solution)시킨 후 일회성(n=10) 및 12주간(n=10) 규칙적인 트레드밀 운동을 실시한 후, 운동그룹별과 비운동그룹[(n=20(10+10)]을 비교하여 운동의 치료적 효과를 확인할 것이다. 2차 연구에서는 운동을 실시하지 않는 비운동그룹(n=10)과 12주(n=10) 및 Chronic(n=10) 운동을 실시한 운동그룹을 각각 대장암을 유발한 뒤 운동그룹별과 비운동그룹을 비교하여 운동의 치료적 효과를 검증할 것이다. 일회성 운동군은 운동에 대한 적응을 하기 위해 탈진운동 실시 3일전부터 14~26m/min으로 20~40분간 적응을 시키고, 탈진운동은 14m/min으로 10분, 18m/min 10분, 22m/min으로 20분, 26m/min으로 10분, 30m/min으로 10분을 실시할 것이며, 더이상 쥐들이 운동을 지속할 수 없다고 판단될 경우 중지할 것이다. 쥐를 분양받은 첫 주는 환경변화로 인하여 오는 쥐의 스트레스를 최소화하기 위해 트레드밀 운동을 실시하지 않을 예정이다. 일주일의 환경적응 후, 12주 운동그룹은 트레드밀 적응운동을 5m~15/min으로 일주일간 실시 할 예정이며, 적응훈련 실시 후 첫 주는 15/min속도로 운동을 실시하고 트레이닝 효과를 고려하여 2주마다 약 2m/min씩 속도를 증가시켜 12주차 최종 트레드밀 운동강도는 18~23m/min(중․고강도)이 되게 할 것이다. 운동빈도는 주당 5회, 하루에 60분간 실시하고, 본 운동 전후에는 5m/min의 속도로 준비운동 및 정리운동을 각각 5분씩 실시할 예정이다. 암세포의 변화에 영향을 미칠 수 있는 스트레스를 최소화하기 위하여 전기 사용은 하지 않을 것이다. 통계 분석은 SPSS 15.0을 사용하여 two-way ANOVA를 사용할 것이다.