Charexterization of the N-terminal Domain of Enzyme Ⅰ of E. Coli Using Proteolytic Digestion = 단백질 분해제 처리를 이용한 Enzyne Ⅰ의 아미노 말단 구조의 연구

국문 초록 (Abstract)

박테리아의 대부분은 세포 밖의 당을 세포 내부로 수송하는 과정에서 포스포엔올 피루브산으로부터 Enzyme I, HPr, 을 거쳐 운반 단백질에 이르는 일련의 연쇄 인산화 과정을 이용하고 있다. 이 과정에 연계되어 있는 처음 단계의 단백질이 Enzyme I 인데 이 단백질은 포스포엔올피루브산으로부터 직접 인산을 받아 HPr 에 전달하여 주는 중요한 단백질이다. 본 연구에서는 Enzyme I 을 순수분리하여 여러 단백질 분해제를 처리한 뒤 분해된 Enzyme I 의 아미노 말단을 분석하였다. 그 결과 Enzyme I 은 두 개의 Domain 으로 구성되어 있으며 아미노 말단의 Domain은 단백질 분해제에 안정한 구조로 되어 있는 반면 카르복시 말단 부위는 단백질 분해제에 쉽게 공격을 받을 수 있는 예민한 부위로 구성되어 있음을 알 수 있었다. Mass spectroscopy 를 이용하여 분석한 결과 단백질 분해제가 공격한 부위는 글루탐산 252번 잔기 이후로 알려졌으며 따라서 이 부위 까지가 안정한 구조를 지니는 아미노 말단인 것으로 생각된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The phosphoenolpyruvate : sugar phosphotransferase system is an array of cytoplasmic and membrane proteins with diverse physiological roles in the bacterial cell. As the catalyst for the first phosphoryl group transfer reaction Enzyme I occupies a key position in the sugar transport sequence. It has been shown that a stable N-terminal domain can be produced by treatment of Enzyme I with various proteases. I show here that the region from glutamate-252 to leucine-264 is accessible to proteolysis resulting in N-terminal cores ranging from Mr 27521 to 28799.