단백질 소수성 측정 방법에 관한 연구 형광법 및 소수성 분획법 = Studies on the Measurement of Protein Hydrophobicity : Fluorometry and Hydorphobic Partition

국문 초록 (Abstract)

순수 단백질인 bovine serum albumin, lysozyme, $\alpha$-chymotrypsin, trypsin, $\beta$-lactoglobulin, myoglobin, ovalbumin 및 식품 단백질인 casein, 대두단백 7S분획, 11S분획, 유채분리단백 및 루핀콩분리 단백의 유효소수성을 측정하기 위해 8-anilino-1-naphthalene sulfonate(ANS)를 발색단으로 사용하는 형광법 및 Poly(ethylene glycol)과 PEG-palmitate 의 bi-phasic system을 이용하는 소수성 분획법을 사용하였다. 형광법의 경우 단백질과 ANS복합체의 형광의 비교강도를 측정하기 위한 최적 여기 및 방출파장은 각기 380 및 465 nm이었으며 형광의 비교강도는 ANS의 농도에 따라서도 영향을 받음을 관찰할 수 있었다. BSA, $\beta$-lactoglobulin 및 casem의 비교강도는 높은 값을 나타내어 비교적 소수성이 큼을 나타내는 반면 ovalbumin과 대두단백 11S분획은 비교적 낮은 형광의 비교강도를 나타내었다. 소수성 분획법에서도 형광법과 같은 결과를 얻었다. BSA와 casein의 ${\Delta}logK$값은 각각 1.625 및 1.660으로 높은 소수성을 지니고 있음을 알 수 있었으나 ovalbumin 및 대두단백11S 분획의 경우 0.216 및 0.170의 낮은 값을 나타내었다. 단백질 용액에 pH의 변화 및 이온강도의 변화와 열처리를 해줌으로서 단백 질의 유효소수성의 변화를 관찰하였으며 이 소수성의 변화로서 단백질의 구조적인 변화와 연관시킬 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The effective hydrophobicity of different proteins, BSA, lysozyme, $\alpha$-chymotrypsin, trypsin, $\beta$-lactoglobulin, myoglobin, ovalbumin, casein, soybean protein 7S and 11S fractions, rapeseed protein isolate, were determined by fluorometric method using ANS as chromophore and hydrophobic partitioning technique using poly(ethylene glycol) and PEG-palmitate bi-phasic system. The optimum excitation and emission 'wave lengthes for the measurement of relative fluorescence intensity of protein-ANS complex were 380 nm and 465 nm. respectively. The relative intensity was influenced by the concentration indicating high level of hydorphobicity, whereas those of ovalbum and soybean protein liS fraction were low. The hydrophobic partition coefficient (${\Delta}logK$) gave similar results as shown in fluorometric mehtod. The ${\Delta}logK$ of BSA and casein were 1.625 and 1.660, respectively, while those of ovalbumin and soybean 11s fraction were 0.216 and 0.170. The changes in the effective hydrophobicity of proteins in solutions at different pH, ionic strength and heat treatment, could be related to the structural characteristic of the proteins.