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    Identification, Characterization, and Recombinant Expression of an Antimicrobial Invertebrate-Type Lysozyme from the Starfish Patiria pectinifera

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    목차 (Table of Contents)

    • I. Introduction 1
    • II. Materials & Methods 4
    • 1. Sample preparation and extraction 4
    • 2. Molecular cloning 4
    • 2-1. tRNA extraction 4
    • I. Introduction 1
    • II. Materials & Methods 4
    • 1. Sample preparation and extraction 4
    • 2. Molecular cloning 4
    • 2-1. tRNA extraction 4
    • 2-2. cDNA synthesis 5
    • 3. Full sequence analysis 10
    • 4. Multiple sequence alignment 10
    • 5. Phylogenetic analysis 10
    • 6. 3D structure prediction 11
    • 7. Sequence logo 12
    • 8. Tissue distribution 12
    • 9. Immune challenge 13
    • 10. Recombinant Protein Production 14
    • 10-1. Recombinant protein of Patiria pectinifera (rPpLys) production in E.coli 14
    • 10-2. Purification of Recombinant Protein 15
    • 11. Antimicrobial activity assay 16
    • 12. Lysozyme activity assay 17
    • 13. Statistical analysis 18
    • III. Results and Discussion 19
    • 1. Identification of PpLys 19
    • 2. Multiple sequence alignment 22
    • 3. Phylogenetic analysis 26
    • 4. 3D Prediction 29
    • 5. Sequence logo 32
    • 6. Tissue distribution 34
    • 7. Immune challenge against Vibrio anguillarum 37
    • 8. Immune challenge against Streptococcus iniae 44
    • 9. Recombinant protein production of PpLys 51
    • 10. Antimicrobial activity 55
    • 11. Lysozyme activity 60
    • IV. References 62
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