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      Effects of Media Volume on Blastocyst Formation, Cell Numbers and ICM Proportion in Mouse Two-cell Embryos

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      연구 목적: 본 연구의 목적은 마우스에서 배양액의 용량이 배반포 배 형성과 세포수에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 연구 재료 및 방법: $3{\sim}4$주령 ICR 암마우스에게 48시간 간격으로 5 IU PMSG와 hCG 주사 후 (hCG 주사 후 수컷과 동숙) $46{\sim}50$시간에 난관으로부터 총 138개의 2-세포기 배를 회수하여 2 ml (group I) 또는 $50{\mu}l$ (group II)의 배양액 (Dulbecco's Modified Eagle Medium + 20% human follicular fluid)에서 72시간 동안 배반포기까지 배양하였다. 배반포 배는 zona-intact (ZiB)와 zona-escape (ZeB)로 등급을 구분하고 나서, propidium iodide와 bisbenzimide를 이용한 differential staining 방법으로 염색하여 평균 세포수, 내세포괴(ICM) 세포수, 영양배엽(TE) 세포수, 총 세포수에 대한 ICM의 비율 (%ICM) 및 ICM:TE 비율을 조사하였다. 결과에 대한 유의성 검정은 $X^2$ test와 t-test를 이용하였으며, p<0.05일 때 통계적인 차이가 있는 것으로 하였다. 결 과: Group I과 II에서, 총 배반포 ($62.3{\pm}20.7%$ vs. $63.8{\pm}22.9%$), ZiB ($31.9{\pm}24.0%$ vs. $30.4{\pm}18.2%$)와 ZeB 형성율 ($30.4{\pm}20.8%$ vs. $33.3{\pm}22.3%$)은 차이가 없었다. 87개의 배반포 배를 염색 시도하였는데, 명확하게 differential staining된 41개의 배반포 배만을 대상으로 세포수를 조사하였다. 평균 세포수 ($61.6{\pm}19.5$ vs. $63.7{\pm}26.8$), ICM 세포수 ($13.0{\pm}10.6$ vs. $12.8{\pm}10.5$), TE 세포수 ($49.0{\pm}19.0$ vs. $47.8{\pm}18.7$), %ICM ($21.0{\pm}12.6%$ vs. $21.1{\pm}13.2%$) 및 ICM:TE 비율 (1:$3.77{\pm}4.9$ vs. 1:$3.72{\pm}4.8$)에서도 group I과 II에서 차이가 없었다. 결 론: 마우스에서 배 발생 능력의 척도로 쓰이는 배반포 배 형성율 배반포 배의 등급 세포수 및 %ICM 등이 20% 난포액을 첨가한 MEM 배양액의 용량에 따라 영향을 받지 않았다.
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      연구 목적: 본 연구의 목적은 마우스에서 배양액의 용량이 배반포 배 형성과 세포수에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 연구 재료 및 방법: $3{\sim}4$주령 ICR 암마우스에게 48시간 ...

      연구 목적: 본 연구의 목적은 마우스에서 배양액의 용량이 배반포 배 형성과 세포수에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 연구 재료 및 방법: $3{\sim}4$주령 ICR 암마우스에게 48시간 간격으로 5 IU PMSG와 hCG 주사 후 (hCG 주사 후 수컷과 동숙) $46{\sim}50$시간에 난관으로부터 총 138개의 2-세포기 배를 회수하여 2 ml (group I) 또는 $50{\mu}l$ (group II)의 배양액 (Dulbecco's Modified Eagle Medium + 20% human follicular fluid)에서 72시간 동안 배반포기까지 배양하였다. 배반포 배는 zona-intact (ZiB)와 zona-escape (ZeB)로 등급을 구분하고 나서, propidium iodide와 bisbenzimide를 이용한 differential staining 방법으로 염색하여 평균 세포수, 내세포괴(ICM) 세포수, 영양배엽(TE) 세포수, 총 세포수에 대한 ICM의 비율 (%ICM) 및 ICM:TE 비율을 조사하였다. 결과에 대한 유의성 검정은 $X^2$ test와 t-test를 이용하였으며, p<0.05일 때 통계적인 차이가 있는 것으로 하였다. 결 과: Group I과 II에서, 총 배반포 ($62.3{\pm}20.7%$ vs. $63.8{\pm}22.9%$), ZiB ($31.9{\pm}24.0%$ vs. $30.4{\pm}18.2%$)와 ZeB 형성율 ($30.4{\pm}20.8%$ vs. $33.3{\pm}22.3%$)은 차이가 없었다. 87개의 배반포 배를 염색 시도하였는데, 명확하게 differential staining된 41개의 배반포 배만을 대상으로 세포수를 조사하였다. 평균 세포수 ($61.6{\pm}19.5$ vs. $63.7{\pm}26.8$), ICM 세포수 ($13.0{\pm}10.6$ vs. $12.8{\pm}10.5$), TE 세포수 ($49.0{\pm}19.0$ vs. $47.8{\pm}18.7$), %ICM ($21.0{\pm}12.6%$ vs. $21.1{\pm}13.2%$) 및 ICM:TE 비율 (1:$3.77{\pm}4.9$ vs. 1:$3.72{\pm}4.8$)에서도 group I과 II에서 차이가 없었다. 결 론: 마우스에서 배 발생 능력의 척도로 쓰이는 배반포 배 형성율 배반포 배의 등급 세포수 및 %ICM 등이 20% 난포액을 첨가한 MEM 배양액의 용량에 따라 영향을 받지 않았다.

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      참고문헌 (Reference)

      1 "The elemental composition of the environments of the gemetes and preimplantation embryo du- ring the initiation of pregnancy" 16 : 147-57, 1977

      2 "The effects of group size on development and interferon-τ secretion by in-vitro fertilized and cultured bovine blasto- cysts" 14 : 2075-2079, 1999

      3 "The effects of glutamine on blastulation of human embryos on vero cells in vitro" 25 : 65-70, 1998

      4 "The clinical outcomes after embryo transfer on day 2 and day 5 or subsequent ET on day 2-5 3-5 and 4-7 in in vitro fertilization-ET cycles" 30 : 31-37, 2003

      5 "Subse- quent embryo transfers (SET) on day 2 and day 5: it's safety and effectiveness." 27 : 165-172, 2000

      6 "Preimplantation embryo de- velopment in vitro:cooperative intractions among embryos and role of growth factors" 87 : 4756-60, 1990

      7 "Late fertilization of unfertilized human oocytes in vitro fertiliza- tion and intracytoplasmic sperm injection cycles:conventional insemination versus ICSI" 17 : 419-424, 2000

      8 "Kinetics of cell proliferation in the preimplantation mouse embryo in vivo and in vitro" 13 : 135-43, 1980

      9 "In vitro culture of bovine IVM-IVF embryos:coorperative interaction among embryos and the role of growth factors" 41 : 1323-31, 1994

      10 "Embryo density and medium vo- lume effects on early murine embryo develop- ment" 9 : 454-7, 1992

      1 "The elemental composition of the environments of the gemetes and preimplantation embryo du- ring the initiation of pregnancy" 16 : 147-57, 1977

      2 "The effects of group size on development and interferon-τ secretion by in-vitro fertilized and cultured bovine blasto- cysts" 14 : 2075-2079, 1999

      3 "The effects of glutamine on blastulation of human embryos on vero cells in vitro" 25 : 65-70, 1998

      4 "The clinical outcomes after embryo transfer on day 2 and day 5 or subsequent ET on day 2-5 3-5 and 4-7 in in vitro fertilization-ET cycles" 30 : 31-37, 2003

      5 "Subse- quent embryo transfers (SET) on day 2 and day 5: it's safety and effectiveness." 27 : 165-172, 2000

      6 "Preimplantation embryo de- velopment in vitro:cooperative intractions among embryos and role of growth factors" 87 : 4756-60, 1990

      7 "Late fertilization of unfertilized human oocytes in vitro fertiliza- tion and intracytoplasmic sperm injection cycles:conventional insemination versus ICSI" 17 : 419-424, 2000

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      11 "Elemental composition of fluid in the hu- man fallopian tube" 58 : 479-82, 1980

      12 "Effects of medium on blastocyst formation,cell num- ber and percentage of ICM in mice" 29 : 237-243, 2002

      13 "Effects of exposure of propidium iodide and bisbenzimide on differential staining of mouse blastocysts" 29 : 317-322, 2002

      14 "Effects of embryo density and co-culture of unfertilized oocytes on embryonic development of in-vitro fertilized mouse em- bryos" 10 : 2382-2385, 1995

      15 "Effect of potassium concentration,type of protein sup- plement and embryo density on mouse prei- mplantation development in vitro" 45 : 111-9, 1986

      16 "Effect of incubation vo- lume and embryo density on the development and viability of preimplantion mouse embryos in vitro" 7 : 558-62, 1992

      17 "Development of preim- plantation mouse embryos in vitro and in vivo" 35 : 187-93, 1982

      18 "Concentrations of nu- trients in mouse oviduct fluid and their effects on embryo development and metabolism in vitro" 88 : 361-8, 1990

      19 "Comparison of embryonic developmen- tal capacity by different co-culture time of oocy- tes in IVF-ET cycles" 29 : 21-22, 2002

      20 "Comparison of blastulation and pregnancy rates of fertilized human oocytes obtained after conventional in vitro fertilization and intracyto- plasmic sperm injection" 17 : 51-57, 2000

      21 "Cleavage rate of mo- use embryos in vivo and in vitro" 24 : 203-7, 1970

      22 "Birth of a healthy infant after in vitro fertilization and embryo transfer in patient of total uterine prolapse" 18 : 346-348, 2001

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      2020-12-01 평가 등재후보로 하락 (해외등재 학술지 평가) KCI등재후보
      2012-01-05 학술지명변경 한글명 : 대한생식의학회지 -> Clinical and Experimental Reproductive Medicine
      외국어명 : The Korean Journal of Reproductive Medicine -> Clinical and Experimental Reproductive Medicine
      KCI등재
      2010-01-01 평가 등재학술지 유지 (등재유지) KCI등재
      2007-08-28 학술지명변경 한글명 : 대한불임학회지 -> 대한생식의학회지
      외국어명 : The Korean Journal of Fertility and Sterility -> The Korean Journal of Reproductive Medicine
      KCI등재
      2007-08-28 학회명변경 한글명 : 대한불임학회 -> 대한생식의학회
      영문명 : Korean Society For Fertility And Sterility -> The Korean Society for Reproductive Medicine
      KCI등재
      2007-01-01 평가 등재학술지 선정 (등재후보2차) KCI등재
      2006-01-01 평가 등재후보 1차 PASS (등재후보1차) KCI등재후보
      2004-07-01 평가 등재후보학술지 선정 (신규평가) KCI등재후보
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      기준연도 WOS-KCI 통합IF(2년) KCIF(2년) KCIF(3년)
      2016 0 0 0
      KCIF(4년) KCIF(5년) 중심성지수(3년) 즉시성지수
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