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    Thermus caldophius GK24로부터 DNA Iigase 유전자의 클로닝 및 발현 = Cloning and Expression of DNA Ligase Gene from Therus caldophilus GK24

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    Thermostable DNA ligase is an essential enzyme for the ligase chain reaction(LCR), a method of detection of a single point mutation. Firstly reported thermostable DNA ligase gene was Tth lig gene of Thermus thermophilus HB8 in 1991. We amplified a new thermostable DNA ligase gene of Thermous caldophilus GK24 using the method of PCR. Used degenerate primers DLI and DLT were designed based on Tth DNA ligase gene. This amplified Tca DNA ligase gene was cloned and expressed. For DNA subcloning and sequencing, restriction enzyme sites of the gene were analyzed.
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    Thermostable DNA ligase is an essential enzyme for the ligase chain reaction(LCR), a method of detection of a single point mutation. Firstly reported thermostable DNA ligase gene was Tth lig gene of Thermus thermophilus HB8 in 1991. We amplified a new...

    Thermostable DNA ligase is an essential enzyme for the ligase chain reaction(LCR), a method of detection of a single point mutation. Firstly reported thermostable DNA ligase gene was Tth lig gene of Thermus thermophilus HB8 in 1991. We amplified a new thermostable DNA ligase gene of Thermous caldophilus GK24 using the method of PCR. Used degenerate primers DLI and DLT were designed based on Tth DNA ligase gene. This amplified Tca DNA ligase gene was cloned and expressed. For DNA subcloning and sequencing, restriction enzyme sites of the gene were analyzed.

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    목차 (Table of Contents)

    • I. 서 론
    • II. 재료 및 방법
    • 1. 시 약
    • 2. 균주 및 vector
    • 3. Polymerase chain reaction(PCR)
    • I. 서 론
    • II. 재료 및 방법
    • 1. 시 약
    • 2. 균주 및 vector
    • 3. Polymerase chain reaction(PCR)
    • 3.1. Degenerate primers 제작
    • 3.2. Polymerase chain reaction(PCR)
    • 4. 저융점 agarose gel로부터 DNA 단편 회수
    • 5. ligation 및 transformation
    • 6. 알카리 용균법에 의한 plasmid DNA의 분리
    • 7. Tca DNA ligase 유전자의 cloning
    • 8. Tca DNA ligase 유전자의 제한효소 지도 작성
    • 9. Tca DNA ligase 유전자의 발현
    • III. 결과 및 고찰
    • 1. Tca DNA ligase 유전자의 cloning
    • 2. Tca DNA ligase 유전자의 제한효소 지도 작성
    • 3. Tca DNA ligase 유전자의 발현
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