遺傳子操作實驗法

목차 (Table of Contents)

• 目次
• 1章 序 / 高木康敬 = 1
• 2章 DNA分子の切斷 / 高木康敬 = 3
• 2.1 制限エンドヌクレア－ゼ = 3
• 2.2 制限エンドヌクレア－ゼ活性の測定 = 12
• A. ゲル電氣泳動法 = 12
• B. トランスフェクションによる方法 = 14
• C. ATP依存性DNaseによる方法 = 14
• 2.3 制限エンドヌクレア－ゼの精製 = 14
• A. Greeneらの方法 = 15
• B. Bickleらの方法 = 18
• 3章 メッセンジャ－RNAの精製 / 大島靖美 = 24
• 3.1 特異的なメッセンジャ－RNAの同定 = 24
• A. 生體內での生物活性との相關によるメッセンジャ－RNAの同定 = 25
• B. タンパク質合成能によるメッセンジャ－RNAの同定 = 26
• C. ヌクレオチド分析によるRNAの同定 = 28
• D. ハイブリッド形成によるRNAの同定 = 28
• 3.2 メッセンジャ－RNAの精製法 = 28
• A. ポリソ－ムの調製および特異ポリソ－ムの抗體による精製 = 29
• B. RNAの抽出 = 30
• C. ポリA配列を利用するメッセンジャ－RNAの精製 = 30
• D. 大きさによるRNAの分離精製 = 31
• E. ヌクレオチド配列によるRNAの精製 = 32
• F. 高濃度に含まれるRNAの限定ハイブリッド形成による精製 = 33
• G. メッセンジャ－RNAの純度檢定 = 34
• 3.3 RNA精製の具體例 = 34
• 4章 RNAに依存するDNAの合成 / 大島靖美 = 40
• 4.1 逆轉寫酵素 = 41
• 4.2 RNAに依存する相補的DNA鎖合成 = 42
• 4.3 細胞質DNAの二本鎖DNAへの變化 = 46
• 4.4 メッセンジャ－RNAから二本鎖細胞質DNAを合成する實驗例 = 48
• 5章 遺傳子を含むDNA斷片の精製 / 大島靖美 = 52
• 5.1 遺傳子の同定と定量 = 53
• A. RNAとハイブリッド形成 = 53
• B. 相補的DNA(細胞質DNA)とのハイブリッド形成 = 58
• C. ハイブリッド形成の速度論(Cot解析) = 59
• D. タンパク質合成または形質轉換による遺傳子の精製 = 60
• 5.2 遺傳子を含むDNA斷片の精製法 = 60
• A. DNAの抽出と切斷 = 62
• B. 大きさに基づくDNA斷片の精製 = 63
• C. GC含量に基づくDNA斷片の精製 = 65
• D. ハイブリッド形成を利用するDNAの精製 = 67
• E. タンパク質との相互作用による精製 = 71
• 6章 ベクタ－DNA / 高木康敬 = 75
• 6.1 ベクタ－DNAとしての條件 = 76
• A. クロ－ニングのための條件 = 76
• B. 實驗の安全のための條件 = 79
• 6.2 大腸菌K-12株の主なベクタ－ = 82
• A. pSC101プラスミド = 82
• B. コリシンE1(Co1 E1)プラスミド = 84
• C. λファ－ジ = 85
• D. pCR1 = 88
• E. pMB9, pBR313, pBR322 = 89
• F. pBR324, pBR325 = 100
• G. λgtWES·λB, λgtZJvir·λB, Charonファ－ジ = 103
• H. Cosmid = 107
• I. その他のプラスミドベクタ－ = 111
• 6.3 その他の生物種の主なペクタ－ = 115
• A. 綠膿菌のベクタ－ = 115
• B. 枯草菌のベクタ－ = 116
• C. 酵母菌のベクタ－ = 120
• D. 高等眞核生物細胞のベクタ－ = 122
• 6.4 プラスミドベクタ－の單離 = 125
• A. 細胞壁の溶解 = 126
• B. 溶菌 = 126
• C. 環狀二本鎖DNAの分離 = 126
• 6.5 ファ－ジベクタ－の單離 = 128
• 7章 ベクタ－DNAと外來性DNA斷片との結合 / 高木康敬 ; 向井常博 = 135
• 7.1 制限エンドヌクレア－ゼ法 = 135
• A. DNAリガ－ゼの調製 = 139
• B. リガ－ゼ反應 = 140
• 7.2 ホモポリマ－結合法 = 141
• A. 高分子DNAの分離 = 143
• B. 遺傳子の部分精製 = 145
• C. 末端轉移酵素反應とDNAアニ－リング = 147
• 7.3 その他 = 152
• 8章 組み換え體DNAの感染 / 高木康敬 ; 向井常博 = 160
• 8.1 組み換え體DNAの感染 = 160
• 8.2 組み換え體DNA保持菌の檢出 = 162
• 9章 クロ－ニングされた遺傳子DNAの解析 / 大島靖美 = 166
• 9.1 組み換え體プラスミドまたはファ－ジDNAの調製 = 166
• 9.2 遺傳子の確認 = 167
• A. ハイブリッド形成 = 167
• B. 制限エンドヌクレア－ゼによるマッピング = 168
• C. Southern transferとハイブリダイゼ－ション = 169
• D. 遺傳子の方向性の決定 = 169
• 9.3 制限エンドヌクレア－ゼによるマッピング法 = 170
• A. 末端ラベルのないDNA分子を用いる方法 = 170
• B. 末端ラベル - 部分消化法 = 173
• 9.4 電子顯微鏡による解析 = 179
• 9.5 DNA鹽基配列の決定 = 180
• A. Maxam-Gilbert法 = 180
• B. 合成法 = 183
• 9.6 遺傳子の構造および機能の解析に關連したその他の方法 = 184
• A. DNA相補鎖の分離 = 184
• B. RNAのハイブリダイゼ－ションマッピング = 185
• C. In vitroの轉寫 = 186
• 10章 むすび / 高木康敬 = 189
• 付錄 / 高木康敬 = 192
• 索引 = 208