HPLC/UV 및 LC-MS/MS를 이용한 백지 생리활성성분의 동시분석법 개발 = Development of analytical methods for simultaneous determination of bioactive components in Angelicae dahuricae Radix using HPLC/UV and LC-MS/MS

국문 초록 (Abstract)

백지의 5가지 생리활성성분 (byakangelicol, oxypeucedanin, imperatorin, phellopterin, isoimperatorin)을 대상으로 신속하고 간단한 HPLC/UV 분석법과 LC-MS/MS 분석법을 확립하였다. HPLC/UV로 분석하기 위하여 Develosil RPAQUEOUS C30 (4.6 × 250 mm, 5 μm) 칼럼을 사용하였으며 내부표준물질로 propylparaben을 사용하여 70% 아세토니트릴 이동상 조성, 칼럼 온도 20℃, 파장 254 nm에서 유속을 1.0 mL/min으로 유지시켰다. 고정상으로 C30을 사용한 경우에 C18 칼럼을 사용하였을 때보다 byakangelicol과 oxypeucedanin의 분리능이 매우 향상되었으며, 백지의 70% EtOH 추출물 내의 다른 성분에 대하여 간섭을 받지 않고 13분 이내에 모두 분리할 수 있었다. LC-MS/MS는 positive mode의 multiple reaction monitoring(MRM)에서 5가지 coumarin과 내부표준물질인 gabapentin을 선택적으로 5.5분 이내에 분리하였다. 분석법에 대하여 검증한 결과, 높은 분석 감도와 양호한 직선성, 정밀성, 정확성, 완건성을 가지고 있었다. 또한, HPLC/UV 분석법으로 시중에서 유통되고 있는 백지 (국내산 7가지, 중국산 8가지) 중 5가지 생리활성성분의 함량 시험을 실시하였다. 본 연구에서는 HPLC/UV와 LC-MS/MS를 통하여 동시에 백지의 5가지 생리활성성분을 정량하여 백지의 품질 평가의 기준을 제시하고자 하였다.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서론 1
• Ⅱ. 실험재료 및 방법 6
• 1. 시약 및 기기 6
• 2. 표준액 조제 7
• 3. 백지 생리활성성분의 분석법 개발 8
• 3.1. HPLC/UV 분석 조건 8
• 3.2. LC-MS/MS 분석 조건 8
• 3.3. 분석법의 검증 9
• 3.3.1. 선택성 9
• 3.3.2. 직선성 9
• 3.3.3. 정밀성 및 정확성 10
• 3.3.4. 검출한계 및 정량한계 10
• 3.3.5. 완건성 10
• 4. HPLC/UV를 이용한 시료 중 함량 분석 11
• 4.1. 회수율 시험 11
• 4.2. 함량 분석 11
• Ⅲ. 결과 및 고찰 12
• 1. HPLC/UV를 이용한 백지 생리활성성분의 분석법 개발 12
• 1.1. HPLC/UV 분석 조건 12
• 1.1.1. 칼럼 선택 12
• 1.1.2. 이동상 조성 선택 14
• 1.1.3. 칼럼 온도 선택 16
• 1.2. 분석법의 검증 18
• 1.2.1. 선택성 18
• 1.2.2. 직선성 19
• 1.2.3. 정밀성 및 정확성 21
• 1.2.4. 검출한계 및 정량한계 23
• 1.2.5. 완건성 24
• 2. HPLC/UV를 이용한 시료 중 함량 분석 27
• 2.1. 회수율 시험 27
• 2.2. 함량 분석 29
• 3. LC-MS/MS를 이용한 백지 생리활성성분의 분석법 개발 34
• 3.1. LC-MS/MS 분석 조건 34
• 3.2. 분석법의 검증 38
• 3.2.1. 선택성 38
• 3.2.2. 직선성 39
• 3.2.3. 정밀성 및 정확성 41
• 3.2.4. 검출한계 및 정량한계 43
• 3.2.5. 완건성 44
• Ⅳ. 결론 47
• Ⅴ. 참고문헌 49
• Ⅵ. 국문 초록 53
• Ⅶ. Abstract 54