Mutagenesis를 이용한 무스카린성 아세틸 콜린 수용체의 길항제 선택성에 관여하는 부위규명에 관한 연구 = Analysis of muscarinic acetylcholine receptor domain involved in selectivity of antagonist binding by mutagenesis technipue

국문 초록 (Abstract)

Baculovirus/곤충세포 발현체계를 이용하는 사람의 Hm1, Hm2와 Hm3의 wild type mAChR subtype들과 Hm2/1, Hm2/3의 chimeric 수용체를 생성하여 곤충세포에서 발현시켰다. 재조함 virus에 의해 감염된 세포에서 곤충세포에서 각 수용체 mRNA가 다량 발현된 것을 확인하였고, 생성된 수용체 단백질이 무스카린성 수용체의 ligand와 적절한 친화력(Kd)을 가진 실제 결합능력이 있는 기능성 단백질이라는 것을 확인하였으며 생성된 수용체의 수(Bmax)가 mammalian cell에서 발현되는 정도와 비교해 더욱 다량으로 발현되었음을 관찰하였다. Hm2/1, Hm2/3의 chimeric 수용체들에 대한 결합분석을 통해 TM VI 부위로부터 시작되는 C-말단부위에 mAChR의 약물학적 분류에 사용되는 길항제의 mAChR subtype에 대한 선택성에 부분적으로 중요한 부위를 함유하는 것으로 보인다.
현재 길항제들의 subtype 선택성에 더욱 중요하게 관련된 부위를 찾기 위해 더 많은 종류의 chimera 및 site-directed mutagenesis에 의한 돌연변이 들을 발현 중에 있으며, mAChR subtype 수용체의 구조 변화가 세포내의 신호전달과의 coupling 기능에는 어떠한 효과를 나타내는지 조사하고 있다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Endothelial cells in vivo must be stimulated to become motile in order for tissue generation to occur. The mechanisms through which motility is induced are currently unknown. In the present study, we found that exogenously-added histamine could increase the motility of the cultured endothelial cells through a wounded monolayer. Terfenadine, an antagonist of histamine H1 receptor, significantly inhibited the cell motility in the same kind of experiment, whereas ranitidine, an antagonist of histamine H2 receptor, did not show any effect on the cell motility. Our results show that motility enhancement of the cultured endothelial cells during wounding by histamine occur via a histamine H1 receptor.

목차 (Table of Contents)

• 1.서론
• 2.실험 재료 및 방법
• 3.결과
• 4.논의
• 5.결론
• 6.참고문헌
• 7.발표논문 및 초록