植物體로 부터 葉綠體 DNA의 分離 = Isolation of Chloroplast DNA from Plants

국문 초록 (Abstract)

식물에 있어서의 유전자 조작은 Agrobacterium의 Ti plasmid를 이용하여 dicotyledon에서 연구가 계속되어 왔다. 다른 식물에서도 DNA의 복제기점을 분리하여 veotor를 구축함으로서 많으ㅏㄴ 실용성을 가질수 있다. 따라서 본실험에서는 식물의 엽록체로부터 자율복제기점을 분리하기 위해서는 다량의 chloroplast DNA가 필요로 한다. 그래서 chloroplast DNA를 여러가지 방법으로 분리하였다. 그 결과는 다음과 같다.
1. Bookjans법을 변형시킨 방법이 다른 방법보다 빨리 쉽게 cp-DNA를 분리할 수 있는 잇점이 있다.
2. Bookjans법으로 엽록체 DNA를 분리하면 sucrose-gradient 방법보다 DNA회수율면에서 월등히 높았다.
3. 인삼잎의 엽록체 DNA의 정제는 Sephacryl S-300, Hydroxyapatite를 이용한 것 보다는 Electroelution을 사용한 것이 회수율이 좋았다.
4. 엽록체 DNA의 제한효소 처리는 인지부위가 -GGCC-인 enzyme만이 cp-DNA를 절단하였으며 이것은 인삼 cp-DNA가 methylation 된것으로 사료된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Gene manipulation in plants has been researched about dicothledon using Ti-plasmid of isolation of replication origins of DNA and construction of vectors in other plants can have a lot of utility. Consequently, much DNA was needed for isolating autonomously replication sequence(ARS) from chloroplast of plants. Therefore, Chloroplast DNA has been isolated using various methods. The resulits are following;
1. The transformed Bookjans method was easier and faster than other method for isolating chloroplast DNA.
2. The isolation of chloroplast DNA with the transformed Bookjans method resulted in much higher yiedl than sucrose-gradient method.
3. The purification of ginseng cp-DNA with electroelution resulted in much higher yield than with sephacryl s-300, hydroxyapatite column chromatography.
4. Ginseng cp-DNA was digested by the treatment of restriction enzymes, -GGCC- recognition sites, which may be thought that cp-DNA is methylated.

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 緖論
• Ⅱ. 材料 및 方法
• 1. 實驗材料
• 2. 實驗方法
• Ⅲ. 結果 및 考察
• Ⅳ. 摘要