상추에서 Homogentisic Acid Phytyltransferase 유전자 발현 조절에 의한 총 토코페롤 함량의 증가

이효정 전북대학교 대학원 2007 국내석사

Tocopherol 은 다양한 건강증진효과가 입증된 식물에서 유래한 성분이다. 잎상추는 식용으로 소비가 많은 채소이지만 Tocopherol 함량이 낮아 건강기능적 품질이 낮다. 잎상추에 Tocopherol 함량을 증가시켜 건강기능성 품질을 향상시키고자 Tocopherol 생합성과정에서 조절자 역할을 하는 homogentisic acid phytyltransferase(HPT) 유전자의 형질전환에 의한 발현조절을 시도하였다. Synechocystis 에서 분리한 HPT (ScHPT) 를 잎상추에 형질전환하여 유전자가 도입된 계통을 육성하였다. 형질전환 상추에서 ScHPT 발현양이 증가함에 따라 총 토코페롤 함량이 증가하였다. 이는 전이 유전자 발현조절을 통하여 건강기능성이 향상된 상추품종의 개량이 가능함을 의미한다. Tocopherol 함량이 증가되어 건강기능성이 향상된 상추 품종의 개발은 기능성 식품소재의 개발과 생산자 및 소비자의 이익 증진에 기여할 수 있을 것으로 기대된다. Tocopherols are typical phytochemicals whose multiple health-promoting effects are demonstrated by plethora of sound scientific evidences. Oriental leaf lettuce is one of the favorite vegetables but it contains low levels of tocopherol. A transgenic approach was attempted to enhance heath-promoting quality of lettuce by elevating tocopherol contents via ectopic expression of the rate-limiting gene in tocopherol synthesis, homogentisic acid phytyltransferase (HPT). A complementary DNA sequence of HPT from Synechocystis (ScHPT) was stably transformed into lettuce genomic DNA via the Agrobacterium-mediated transformation. Transgenic T0 plants contained one to three copies of ScHPT trangene. The transgene was stably inherited to and expressed in the progeny of T1 and T2 generations. The elevated transcriptional expression of ScHPT transgene resulted in an increased total tocopherol in transgenic lettuce plants. This result supports the rate-limiting role of HPT in tocopherol biosynthesis and suggests feasibility of enhancing tocopherol content of lettuce via transgenic regulation of HPT expression. Development of lettuce cultivars with enhanced heath-promoting quality contributed by well-characterized mutifuctional phytochemicals such as tocopherol will be beneficial for both producers and consumers.

사람에서 들기름 투여시 Tocopherol 첨가여부가 Peroxidation 첨가여부가 Peroxidation 수준 및 혈장 지질조성에 미치는 영향

김성은 경희대학교 대학원 1991 국내석사

Age-related Changes of α-Tocopherol Tranfer Protein Expression in Rat Liver

김한석 Osaka Medical College 1996 해외박사

음식중에는 gamma-tocophero이 alpha-tocopherol보다 많이 포함되어 있지만, 생체내에서는 반대로 alpha-tocopherol이 10배 정도 많이 존재하고 있는 것으로 알려져 있다. 최근 생체내의 tocopherol 선별에는 간장중의 alpha-tocopherol transfer protein (TTP)이 관여하고 있을 가능성이 시사되고 있다. 신생아기에는 상대적으로 alpha-tocopherol이 낮고 gamma-tocopherol이 높다. 이것은 신생아기의 항산화능에 영향을 주고 있다고 생각되지만, 지금까지 이 기구는 상세하게 해명되어 있지 않았다. 본 연구에서는 신생아기의 간장중 TTP의 발달성 발현의 변화와 비타민 E의 동태와의 관련성을 검토하였다. 구체적으로 발달에 의한 신생아 래트 간장중 alpha-tocopherol 수송 단백질(TTP) 발현량의 상대적 변동과 혈장중 tocopherol 치와의 관련성을 검토하였다. TTP 발현은 항 TTP항체를 이용한 western blotting에서 측정하고, tocopherol치는 ECD(Electoronic Chemical Detection)를 장착한 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)에서 측정하였다. 출생 직후보다 4주 사이의 변화를 검토하였다. TTP는 출생 직후 지극히 소량이었지만, 생후 2주까지 발현량은 급속히 증가해 4주에는 adult 레벨에 이르고 있었다. 혈장중의 alpha-tocopherol / gamma-tocopherol 비는 TTP 발현과 일치해 상승하고 있어, TTP 발현량과 tocopherol의 식별능에는 정상관이 있다고 생각되었다. 포유기간에는 TTP 발현에 수반해 alpha-tocopherol의 선택성이 상승하고 있어, TTP 발현과 alpha-tocopherol의 선택성은 신생아기에 있어도 밀접하게 관계하고 있는 것을 알았다. 또 간세포에서의 TTP 발현을 조절하는 인자를 간세포 초대 배양계를 이용해 검토하였다. 간세포 초대 배양계를 이용한 실험에서는 배양계로 옮긴 간세포중의 TTP는 20시간후에 급속히 소실하고 있었다. 이 소실은 배양계에 EGF(Epidermal Growth Factor)를 첨가하는 것으러서 촉진되고, 데키사메사존(dexamethasone)을 첨가하는 것으로서 억제되었다. EGF는 세포의 탈분화를 촉진해, 데키사메사존은 억제하는 것이 알려져 있다. 이러한 현상은 TTP가 간세포의 분화에 특이적으로 발현하고 있는 것을 시사하는 것이었다. 본 연구에서 신생아기의 특이적인 비타민 E의 동태는 비타민 E의 선택적 흡수에 관계하고 있는 TTP의 간장중 발현이 낮은 것이 원인이라는 가능성이 밝혀졌다. 또 TTP 발현은 간세포분화에 따라 조절되는 것도 밝혀졌다. 위의 결과는 생체내의 중요한 항산화물질인 비타민 E의 신생아기 생체내 동태를 이해하는데 유용하다라고 생각되었다. Developmental changes in expression of α-tocopherol transfer protein (α-TTP) after birth were investigated using rats with respect to plasma changes of tocopherols. The expression of α-TTP in the neonatal rat liver, which was very low immediately after birth, increased steadily during the two weeks of life before weanling and reached the adult level at four weeks. During the suckling period, the plasma ratio of α-tocopherol to γ-tocopherol linearly increased, because plasma α-tocopherol which was low immediately after birth, increased rapidly during the period, while γ-tocopherol remained unchanged. The increase in the ratio seemed to correlate with the developmental expression of α-TTP in the liver during this period. The ratio also reached the adult level after four weeks. The expression of α-TTP was investigated using primary cultured rat hepatocytes. The expression of α-TTP was found to be extremely low after 20 h of culture. The decrease in α-TTP expression was exacerbated by adding epidermal growth factor to the culture medium and was inhibited by adding dexamethasone. These observations suggest that expression of α-TTP may be affected by the state of hepatic differentiation.

Alpha-tocopherol protects H2O2-induced tight junction occludin disruption

육기환 Graduate School, Yonsei University 2006 국내박사

Vitamin E is the most important lipid-soluble antioxidant in humans. Although alpha-tocopherol is suggested that it has protective effect from many diseases, little is known about the prevention of occludin alteration in tight junction of blood-brain barrier (BBB) under pathologic insults producing reactive oxygen species (ROSs). In this study, the effects of alpha-tocopherol on H2O2-induced tight junction occludin were studied with primary culture of rat brain microvessel endothelial cells. Alpha-tocopherol had no apparent cytotoxicity up to 2.8 mM. The preincubation with alpha-tocopherol suppressed the H2O2-induced cytotoxicity in AlamarBlue assay and phase contrast microscopy. In confocal laser microscopy and western blot, H2O2-induced loss of occludin was suppressed by preincubation with alpha-tocopherol. The present findings provide evidence that alpha-tocopherol may be beneficial for cellular protection from pathologic insults. Since alpha-tocopherol was demonstrated to have far fewer adverse effects, it would become a noteworthy nutrient or drug for treatment of neurodegenerative diseases. 비타민 E는 지용성 항산화제로 널리 알려져 있다. 그 중 α-tocopherol 은 부작용이 거의 없어 노화에 따른 여러 질환에서 영양소나 치료제로서 주목 받고 있다. 많은 질환에서 -tocopherol 의 보호 효과가 알려져 있지만 활성 산소종이 발생되는 병적인 조건에서 혈액뇌장벽의 치밀이음부 occludin 에 대한 효과는 거의 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 쥐의 뇌 미세혈관 내피세포를 일차 배양하여 -tocopherol 이 과산화수소에 의한 치밀이음부 occludin 의 변화를 보호할 수 있는지를 관찰하였다. -tocopherol 은 매우 높은 농도 (2.8 mM) 에서도 세포 독성이 나타나지 않았다. AlamarBlue assay와 위상차 현미경을 통해 관찰한 결과, -tocopherol 을 전처치 하면 과산화수소에 의한 세포독성이 억제되었다. 공초점현미경과 western blot 을 통해 관찰한 결과, 과산화수소에 의한 occludin 의 소실은 -tocopherol 을 전처치하여 막을 수 있었다. 이 결과는 α-tocopherol 이 여러 질환으로부터 뇌 미세혈관 내피세포를 보호하는 효과를 나타내며 α-tocopherol 이 부작용이 거의 없으므로 퇴행성 신경질환의 치료에 이용될 수 있음을 제시하고 있다. 앞으로의 연구에서는 혈액뇌장벽에서 활성 산소종에 의한 치밀이음부 occludin 의 변화를 억제하는 α-tocopherol 의 기전을 밝혀야 할 것이다.

The Effects of the Antioxidant α-Tocopherol on Cisplatin-Induced Ototoxicity in HEI-OC1 Auditory Cells : HEI-OC1 세포에서의 Cisplatin 이독성에 대한 alpha-tocopherol의 효과

SUNG KYUN KIM 연세대학교 일반대학원 2016 국내석사

목적: Alpha-tocopherol은 methylated phenol계열로 지용성 항산화물질로서 알려져 있으며 유리기를 줄이고 항산화 역할을 하는 비타민 E의 다른 형태이다. 저자는 alpha-tocopherol의 항산화 효과가 cisplatin에 의한 세포독성을 보호할 수 있음을 토대로 HEI-OC1 청각세포에서 cisplatin유발 이독성에 대한 효과를 알아보았다. 실험 재료 및 방법: 10 μM 농도의 alpha-tocopherol을 24시간동안 HEI-OC1세포에 전처치 한 후, 15 μM 농도의 cisplatin을 추가하였다. 48시간 후 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)를 이용하여 세포 생존율을 측정하였으며 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) 형광 염료를 이용하여 세포내 활성산소 농도를 측정하였다. 이후 Annexin V-FITC and propidium iodide (PI) 염색으로 세포자멸사의 패턴을 분석하였고 caspase3/CPP32 형광분석 키트를 이용하여 caspase-3 활성도를 측정하였다. 또한 면역 블로팅을 통해 poly-ADP-ribose polymerase(PARP)를 분석하였다. 결과: HEI-OC1 세포에 10 μM의 alpha-tocopherol을 전처치한 결과 cisplatin 유발 이독성에 대한 보호효과가 있음을 확인하였고 이독성으로 인하여 상승된 활성산소의 양도 유의하게 감소함을 알 수 있었다. Alpha-tocopherol을 전처치한 군은 cisplatin 단독군에 비해 활성산소를 15% 감소시켰고, 세포 괴사 및 후기 세포자멸사의 비율이 50% 감소하였다. 또한 alpha-tocopherol은 caspase-3 활성도 및 PARP 양을 감소시켰다. 결론: 본 연구는 HEI-OC1 청각 세포에서 cisplatin 유발 이독성에 대한 alpha-tocopherol의 보호효과에 대한 것으로, alpha-tocopherol은 cisplatin유발 이독성으로 인하여 증가된 활성산소를 유의하게 감소시키며 세포자멸사를 줄이는 역할을 하는 것으로 판단된다. Objectives: Alpha-tocopherol is a class of methylated phenols, known as fat-soluble antioxidants, and is a different form of vitamin E, which reduces free radicals and acts as an antioxidant. We hypothesized that the antioxidative effect of α-tocopherol could protect against cisplastin-induced cytotoxicity, and thus evaluated its effects on cisplatin-induced ototoxicity in HEI-OC1 auditory cells. Methods: HEI-OC1 cells were pretreated with α-tocopherol at a concentration of 10 μM for 24 h, and then exposed to 15 μM cisplatin for 48 h. The cellular viability was measured by using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) method. The intracellular reactive oxygen species (ROS) level was measured by using a fluorescent dye, 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA). Both Annexin V-FITC and propidium iodide (PI) staining were performed to analyze the pattern of apoptosis. The enzymatic activity of caspase-3 was assayed with caspase3/CPP32 fluorometric assay kit. Also, it was assessed by immunoblotting technique of poly-ADP-ribose polymerase (PARP). Results: Pretreatment with 10 μM α-tocopherol protected HEI-OC1 auditory cells against cisplatin-induced cytotoxicity. Alpha-tocopherol significantly reduced the cisplatin-induced increase in ROS. Alpha-tocopherol treatment induced a 15% reduction of ROS and 50% decrease in necrosis and late apoptosis as compared to cisplatin treatment. Alpha-tocopherol also decreased the activation of caspase-3 and reduced levels of PARP. Conclusion: This study was investigated the protective effects of α-tocopherol on cisplatin-induced ototoxicity in an auditory cell line. Tocopherol significantly reduced a cisplatin-induced increase in ROS, thereby inhibiting cisplatin-induced cytotoxicity.

FeSO_(4), ZnO, Tocopherol 및 그 混合物에 의한 비스켓 油脂 安定性

이태하 建國大學校 大學院 1990 국내석사

본 연구는 비스켓에 영양강화제로 첨가되는 FeSO_(4), ZnO, D-δ-tocopherol 그리고 그 혼합물이 비스켓 유지 안정성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 이것들을 각각 유지에 대해 0.02% 첨가한 비스켓을 제조하고, 60℃, 형광등(10,000lux) 조사하에서 5일간 저장하면서 과산화물가와 산가를 측정하였다. 1. 비스켓에 FeSO_(4)를 첨가하면 비스켓 유지의 산패가 촉진되어 과산화물가와 산가는 대조구에 비해 각각 35.1%, 19.6% 높았다. ZnO의 첨가시는 산패에 큰 영향을 주지 않았다. 2. D-δ-tocopherol을 첨가하면 비스켓유지의 산패가 크게 억제되어 과산화물가와 산가는 대조구에 비해 각각 53.1%, 71.7% 낮았다. 3. Tocopherol과 FeSO_(4)를 혼합 첨가하였을 경우 대조구보다 산패가 억제되었다. This study was carried out to investigate the effects of ferrous sulfate, zinc oxide, D-δ-tocopherol and their mixtures added to biscuit on stability of vegetable fat in biscuit. 0.02 % of fermus sulfate, zinc oxide and D-δ-tocopherol to biscuit fat content was respectively used in making biscuit. The biscuit samples were stored under 10,000 lux at 60℃ for 5 days and peroxide value and acid value of biscuit fat were investigated every 24 hours. The following results were obtained. 1. When 0.02% of ferrous sulfate to biscuit fat was added oxidation of biscuit fat was accelerated, and peroxide value and acid value of the fat showed respectively 35.1%, 19.6% higher than in control group. Zinc oxide showed no effect on oxidation of biscuit fat. 2. When 0.02% of D-δ-tocopherol to biscuit fat, was added, oxidation of the fat was interrupted and peroxide value and acid value of the fat showed respectively 53.1%, 71.7% lower than in control group. 3. The mixture of ferrous sulfate and D-δ-tocopherol showed antioxidative effect on vegetable fat in biscuit.

우리나라 성인 남자의 혈장 tocopherol 수준과 관련 요인 분석

김경자 韓南大學校 大學院 2006 국내석사

체내에서 비타민 E는 유리라디칼로 인한 산화 스트레스를 줄여줌으로써 만성질환의 예방에 중요한 역할을 하고 있다. 그러나 우리나라 성인 남자를 대상으로 혈중 비타민 E 영양상태 및 이에 영향을 미치는 요인에 대해 조사하고 분석한 연구는 많지 않은 실정이다. 따라서 본 연구는 우리나라 성인 남자의 혈중 tocopherol의 농도를 조사하고 이에 영향을 미치는 요인들을 생활양식, 식이성요인, 혈장 지질, 항산화 효소 및 DNA 손상도 등을 중심으로 살펴보고자하여 시도되었다. 대전지역에 거주하는 19∼84세 사이의 성인 남자 314명을 대상으로 설문조사를 실시하여 흡연, 음주, 운동 습관 등의 생활양식을 알아보았고, 24시간 회상법과 식품 섭취빈도 조사를 통해 식이성 요인을 조사하였다. 대상자의 혈액을 채취하여 임파구 DNA 손상정도, 적혈구 항산화 효소를 측정하였으며 혈장을 분리하여 혈장 tocopherol과 혈장 지질 수준을 측정하였다. 연구대상자의 평균 나이는 35.5세, BMI는 23.8±0.2 kg/m^(2)였다. 대상자의 혈장 α-tocopherol 수준은 1936 μg/dl, γ-tocopherol 수준은 181 μg/dl로 혈장 TC, TG, LDL-C 수준(r=0.418, r=0.419, r=0.353; p<0.001)과 유의적인 양의 상관관계를 보였으며, 이러한 경향은 γ-tocopherol에서도 유사하게 나타났다. 혈장 α-tocopherol 수준은 생활습관인 흡연, 음주 및 운동습관에 따라 변화를 보이지 않았다. 그러나 혈장 중성지방 당 γ-tocopherol 수준은 비흡연자에 비해 흡연자에서 유의적으로 더 낮게 나타났다(p<0.05). 식이성 요인 중에서는 혈장 α-tocopherol 수준이 비타민 E 섭취량과 음의 상관관계를 보인 반면, γ-tocopherol 수준은 비타민 E 섭취량과 양의 상관관계를 보였다. 녹차, 과일 및 야채 섭취 빈도는 대상자의 혈장 tocopherol 수준에 영향을 미치지 않았다. 적혈구 superoxide dismutase (SOD) 활성도와 혈장 tocopherol 사이에 음의 상관관계가 나타났으며, 임파구 DNA 손상정도와 혈장 α-tocopherol은 음의 상관관계를 보였다. 본 연구결과 우리나라 남자 성인의 혈장 α-tocopherol 수준에 영향을 미치는 요인은 혈장 지질, 비타민 E 섭취량, 적혈구 SOD 활성, 혈장 TRAP 및 임파구 DNA 손상인 것으로 조사된 반면, 혈장 γ-tocopherol 수준에 영향을 미치는 요인은 흡연, 혈장 지질, 비타민 E 섭취량 및 임파구 DNA 손상 등으로 관찰되어 tocopherol의 형태에 따라 영향요인이 다른 것으로 나타났다. 앞으로 tocopherol 형태에 따른 영향요인에 대한 광범위한 연구가 더 이루어져야 할 것이다. Vitamin E in the body system plays an important role in preventing chronic diseases by decreasing the oxydized stress by free-radical. However, there are not enough researches nor analysis on Vitamin E 's nutrition levels in blood, especially in Korean adult men, and the primary factors of Vitamin E nutrition level in blood. Therefore, this thesis is to examine Korean adult men's tocopherol density in blood and the primary factors of it. I classified the factors in the life style, diet plan, blood plasma lipid, deoxidation enzyme, and DNA damaged degree. The survey was done on 314 Korean adult men aging from 19-84 residing in Taejon city to find their smoking ,drinking and exercising habits. Using recall method in 24 hours and survey on food taking frequency , we could research upon the diet factors. By gathering blood from those questioned, we could measure damaged degree of lymph cell DNA, red corpuscle deoxidizing enzyme, and we could find the degree of plasma tocopherol and plasma lipid by taking out plasma. The average age of the researched people was 35.5, BMI was 23.8±0.2 kg/m^(2). The researched people's plasma level was; α-tocopherol level was 1936 μg/dl, γ-tocopherol level was 181 μg/dl, which showed similar mutual relation with plasma TC, TG, LDL-C level(r=0.418, r=0.419, r=0.353; p<0.001), and this tendency was shown in γ-tocopherol similarly. Plasma α-tocopherol level did not show any difference as smoking, drinking and exercising habits changed.. However, γ-tocopherol level per plasma neutral fat showed much lower figure in smokers than non smokers(p<0.05). Amongst diet factors, plasma α-tocopherol level showed negative with Vitamin E intake, while γ-tocopherol level showed positive with Vitamin E intake. The frequency of taking green tea, fruits and vegetables did not necessarily affect to the plasma tocopherol level of the researched people. A red corpuscle superoxide dismutase (SOD) activity and plasma tocopherol showed negative correlation , and damaged level of lymph cell DNA and plasma α-tocopherol showed negative correlation. As a result of this research, the factors that affect Korean adult men's plasma a-tocopherol are plasma lipid, Vitamin E intake, a red corpuscle SOD(superoxide dismutase)activity, plasma TRAP and damaged level of lymph cell DNA, while the factors that affect γ-tocopherol level are smoking, plasma lipid, vitamin E intake, and damaged level of lymph cell DNA. Different types of tocopherol had different factors, There should be wider range of researches about factors in different types of tocopherol.

Vitamin A와 α-Tocopherol투여가 어린 흰쥐 간조직내 2-acetylaminofluorene- Hydroxylation에 미치는 영향

송태숙 이화여자대학교 대학원 1985 국내석사

대두유의 공업적 정제과정 중 탈취공정이 트랜스지방산 생성과 토코페롤 함량에 미치는 영향

김지인 연세대학교 공학대학원 2003 국내석사

대두유의 탈취공정에서 유발될 수 있는 트랜스지방산 생성과 토코페롤 손실이 인체의 건강에 미치는 영향으로 인해 유지업계의 현안으로 대두되고 있다. 일반적으로 대두유의 관능적 품질(organoleptic quality)과 산화 안정성(oxidative stability)의 개선을 위해서 감압스팀증류 (steam distillation under vacuum)에 의한 탈취공정(deodorization)을 거치게 된다. 그러나 고온의 탈취공정으로 인해 유발되는 이화학적 변화의 주요 부작용으로 기하이성질체화 반응 (geometric isomerization)에 의한 트랜스지방산(trans fatty acids)의 생성과 증류 및 열분해에 의한 안정성의 저하로 토코페롤(tocopherols) 함량의 감소가 초래된다. 따라서, 트랜스지방산 함량과 토코페롤 함량은 탈취공정의 적합 수준과 탈취 대두유의 영양학적 품질을 지시하는 주요 인자로 작용한다. 본 연구의 목적은 대두유의 정제를 위한 공업적 탈취공정에서 주요 탈취장치별 트랜스 지방산 생성율과 토코페롤 손실율을 평가하여 탈취장치, 운전조건 그리고 탈취 대두유 품질의 현수준을 확인하고 탈취기술의 새로운 대안을 제시하기 위한 것이다. 국내 정제업체 중에서 조사 대상인 gas lift pump를 내장한 tray 탈취장치(Type I-TG), structured packing를 장착한 packed column 탈취장치(Type II-PC) 그리고 thin-film panel이 부착된 tray 탈취장치(Type III-TF)가 운전되고 있는 대표적인 3개 회사와 시중으로부터 미탈취 대두유(refined-bleached soybean oils)와 탈취 대두유(refined-bleached-deodorized soybean oils)를 수집하였다. 탈취공정에서 탈취장치에 따라 트랜스지방산 함량이 0.54~0.87%(평균 0.71%) 생성되어 국제 관리 규격인 1.0% 보다 낮은 수치로 분석되었고, 토코페롤 함량은 24~33%(평균 28%) 감소된 748~856 ppm(평균 791 ppm)이 검출되어 항산화능을 발휘하는 최저 수준인 340~600 ppm을 초과하여 보전된 것으로 분석되었다. 탈취장치별 트랜스지방산 생성율/토코페롤 손실율의 순위는 Type II-PC: 0.54%/24% < Type I-TG: 0.73%/28% < Type III-TF: 0.87%/33%의 순으로, Type II-PC가 상대적으로 양호한 성적을 보였다. 이러한 결과로부터 트랜스지방산의 생성과 토코페롤의 손실은 탈취장치의 stripping unit 구조보다는 주로 탈취온도, 탈취시간 등의 운전조건에 의해 영향을 받으며 탈취장치의 stripping unit 구조에 따른 특이한 유의적 차이를 보이지 않았음을 알 수 있었지만, 증류효율이 높은 stripping unit의 기하학적 구조에 의한 온화한 탈취 운전조건의 적용에 의해서 개선될 수 있음을 시사하였다. 현재 국내의 대형 유지정제 및 가공업체에서 운전되고 있는 탈취장치의 대부분은 이번 조사 대상의 탈취장치 범주에 속하기 때문에 국내에서 생산되는 탈취 대두유의 전반적인 품질은 종래의 품질 규격인 풍미와 색택 그리고 안정성을 유지하면서 고품질 유지의 새로운 규격인 트랜스지방산 저함량 유지와 토코페롤 고함량 보전의 조건을 비교적 충족시키고 있는 것으로 추정된다. 그러나 소비 시장에서 요구하는 더욱 엄정한 권장 기준 즉, 트랜스지방산 함량 0.5% 이하의 생성과 토코페롤 함량 900 ppm 이상의 보전을 위해서는 보다 발전된 탈취방식에 대한 검토가 필요한 시점이다. 따라서, 현재의 고온장시간(260°C/60분) 탈취방식에서 1차 저온장시간(230°C/30~45분)과 2차 고온단시간(250°C/10~15분)의 2단 가온 탈취방식(dual temperature deodorization), tray/packed column 조합 탈취장치 그리고 dry ice condensation unit에 의한 고진공생성장치(high vacuum production technology)를 통합한 새로운 탈취기술로의 전환이 요구된다. It becomes an emerging issue due to health implication that formation of trans fatty acids and loss of tocopherols can be induced by high temperature treatment used in the industrial deodorization of soybean oil. Crude soybean oil is generally treated by refining process including a deodorization step by steam distillation under vacuum for improvement of organoleptic quality and oxidative stability. The level of formation of trans fatty acids by geometric isomerization and loss of tocopherols by distillation removal/thermal degradation due to decreased heat stability is a sensitive index of the degree of undesirable changes during deodorization. The main objective of this study was to evaluate the effects of deodorization step on formation of trans fatty acids and loss of tocopherols during industrial refining of soybean oil and to propose a latest alternative deodorization technology. Refined-bleached soybean oils and refined-bleacheddeodorized soybean oils were obtained from some markets and 3 refinery factories, which are operating with the selected industrial deodorizers: a tray deodorizer with gas lift pump(Type ITG); a packed column deodorizer with structured packing(Type II-PC); a tray deodorizer with thin-film panel(Type III-TF). The result demonstrated that trans fatty acids were created in the range of 0.54% to 0.87% and losses of tocopherol were occurred in the scope of 24% to 33%(contents of retention : 748~856 ppm). This favorable result means that the contents of trans fatty acid were lower than 1% of target figure for international quality standard and the contents of tocopherol were higher than 340~600 ppm of minimum level for prevention of oxidation. Most of major refineries in domestic are presently operating with ones similar to selected industrial deodorizers investigated in this study. So it can be evaluated that they fully meet the requirement for lower formation of trans fatty acids and higher retention of tocopherols as new indexes of international quality standard for high quality edible oils and fats. In comparison at selected industrial deodorizers, there is no especially significant difference even though Type IIPC showed the lowest formation of trans fatty acids and the highest retention of tocopherols among selected industrial deodorizers. This result represented that formation of trans fatty acids and loss of tocopherol were not influenced by different geometric feature of stripping units at selected deodorizers but mainly by deodorizing temperature & deodorizing time. However, a stripping unit with higher vaporization efficiency leads milder operation condition for deodorization and it can induce lower formation of trans fatty acids and higher retention of tocopherols. It is nowadays required for advanced deodorization technology to satisfy more strict level of the customer’s requirements i.e., the contents of trans fatty acid lower than 0.5% as well as the contents of tocopherol higher than 900 ppm and loss of tocopherols lower than 25%. Therefore, the conventional operating conditions in local should be revaluated in direction to reduce formation of trans fatty acids and loss of tocopherols during deodorization. In conclusion, it is recommended that the present deodorization with severe operating conditions of high temperature/long time (260°C/60 min) in common should be switched to a novel deodorization technology: a tray deodorizer integrated with structured packing under mild operating conditions of dual temperature deodorization process (230°C/30~40min & 250°C/10~15 min) based on dry ice condensation unit for high vacuum production.

Protective effects of α-tocopherol and captopril against hydrogen peroxide-induced apoptosis on human lung epithelial cell line L-132 : α -Tocopherol과 captopril의 human lung epithelial cell line L-132에서 과산화수소수에 의한 세포사멸 보호효과

황은구 The Graduate School Kyung Hee University 2003 국내박사

Vitamin E인 α-tocopherol과 angiotensin converting enzyme inhibitor인 captopril이 lung epithelial cell line인 L-132 세포에서 과산화수소수 (H2O2)에 의하여 유발된 세포사멸에 보호작용이 있는지를 연구하기 위하여 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 측정, flow cytometric 분석, DNA fragmentation 측정, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), Western blot, 그리고 caspase-3 효소 활성도 측정을 시행하였다. 형태학적인 그리고 생화학적인 분석을 통하여 과산화수소수는 L-132 세포에서 세포사멸을 유발시켰고, α-tocopherol과 captopril에 의하여 이러한 세포사멸이 억제되었다. 또한 α-tocopherol과 captopril은 과산화수소에 의하여 증가된 bax mRNA의 발현과 caspase-3의 활성도를 억제하였으며 그리고 bcl-2 mRNA의 발현을 증가시켰다. 본 실험의 결과 α-tocopherol과 captopril은 사람 폐포 상피세포에서 과산화수소에 의하여 유발되는 세포사멸을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있었다. To investigate whether α-tocopherol, also known as vitamin E, and captopril, an angiotensin converting enzyme inhibitor, possess protective effects against hydrogen peroxide (H2O2)-induced apoptosis in the lung epithelial cell line L132, MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay, flow cytometric analysis, DNA fragmentation assay, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), Western blot, and caspase-3 enzyme assay were performed. Through morphological and biochemical analyses, it was demonstrated that L-132 cells treated with H2O2 exhibit several features of apoptosis. On the other hand, cells treated with H2O2 and α-tocopherol or captopril showed decreased occurrence of apoptotic features. In addition, it was found that treatment with α-tocopherol or captopril inhibits H2O2-induced increase in the levels of bax and caspase-3 and that it enhances the level of bcl-2 expression. These results suggest that α-tocopherol and captopril may have protective effects against H2O2-induced apoptosis in human lung alveolar epithelial cells.