방목 가축에 대한 Theileria sergenti 감염 조사 및 외부기생충 구제제 투여의 예방 효능 평가

차승언 전북대학교 일반대학원 2023 국내박사

국토 면적의 약 64%가 산지로 구성되어 있는 우리나라는, 현행 배합 사료 위주의 밀식 사육 방식의 축산업 일변도에서 탈피하여 산지에 초지를 조성하여 산지 방목 축산을 도입하는 것이 좋은 대안이 될 수 있다. 이는 배합사료를 생산하는데 사용되는 수입 곡류를 절감하여 축산업의 경쟁력을 강화시킬 수 있을 뿐만 아니라 초지 조성을 통해 축산업을 친환경 관광산업으로도 육성, 발전시킬 수 있는 6차 산업의 기초가 될 수도 있다. 하지만 국내 산지 내의 초지 조성이 제대로 이루어져 있지 않은 상태이기 때문에 우리나라의 방목형 산지 축산은 그 도입 및 정착도 제대로 되어 있지 않은 실정이다. 따라서 우리나라의 여건에 맞는 산지 축산 질병 관리 시스템 개발이 시급히 이루어져야만 한다. 이에 본 연구에서는 1) 한우의 방목시기 및 방목방법에 따른 혈액학적 변화를 분석하고, 2) 한우의 Theileria sergenti 감염에 따른 혈액학적 변화를 밝히며, 3) 방목 소에서 Theileria sergenti 감염에 대한 ivermectin의 효능을 평가함으로써 산지 축산 가축들의 주요 질병들에 대한 표준화된 조기 감별 및 치료, 관리 매뉴얼 확립 및 현장 적용에 활용하는 기초 근거를 제시하였다. 혈액 검사는 가축에서 질병 진단, 치료 효과 및 예후 결정과 같은 치료 계획을 개발하는 데 사용되었다. 제 1장에서는 봄부터 가을까지 방목한 한우를 대상으로 방목 전후의 적혈구, 백혈구, 혈소판 등 혈구수 변화를 알아보았다. 방목 기간 동안 매일 저녁 방목장에서 축사로 돌아온 가축군(A, n=34)과 방목장에서 축사로 돌아오지 않은 가축군(B, n=21)의 혈구수를 비교하였다. RBC, 헤모글로빈, 헤마토크릿, MCV, WBC, 호중구, 호산구, 단핵구, 림프구 등의 혈액학적 변수는 혈구분석기를 이용하여 측정하였다. 가축군 A는 RBC, MCV, MCHC, WBC, EOS, LYM 값에서 유의미한 차이를 보였다. 가축군 B는 RBC, Hb, HCT, MCV, MCH, PLT, NEU, BAS 값에서 유의미한 차이를 보였다. 특히 방목 전과 비교했을 때 방목 후 적혈구 수가 감소하였다. 방목 전과 비교하여 방목 1개월부터 5개월까지는 낮은 적혈구수를 유지하였다. WBC 수는 방목 4개월부터 증가한 반면 EOS 수는 방목 2개월부터 증가했다. 이러한 결과는 RBC와 WBC의 값이 방목 전후와 방목 기간에 따라 다르다는 것을 시사한다. 나아가, 이러한 혈액 분석값을 바탕으로 방목장에서 사육되는 가축들을 위한 사양관리 방안을 개발할 필요가 있다. 진드기 매개 병원체는 소를 방목하는 데 심각한 문제를 일으킬 수 있다. 그러나 산에서 방목하는 소의 진드기 매개 질병에 대한 정보는 거의 없는 실정이다. 제 2장에서는 한우의 계절 및 방목 형태에 따른 유행성 진드기 매개 감염과 이에 따른 혈액학적 변화를 조사하여 방목 소의 진드기 매개 질병과 관련된 잠재적인 문제점을 파악하는 것을 목적으로 한다. 2014년과 2015년, 봄부터 가을까지 대한민국 3개 지역의 한우 소를 축사 내 사육하거나 산지에 방목하였다. 산지에서 방목한 소의 Theileria sergenti 감염률(54.7%)은 방목하지 않은 소의 감염률(16.3%)에 비해 Theileria sergenti 감염률이 크게 증가하여 진드기 매개 감염의 유병률이 더 높았다(P < 0.001). 따라서 방목 소의 적혈구(RBC) 수치와 헤마토크리트(HCT) 수치는 방목하지 않은 소에 비해 기간 내내 유의미하게 낮았다(P < 0.05). 또한, RBC, hemoglobin (Hb), HCT는 T. sergenti 양성군이 T. sergenti 음성군보다 유의미하게 낮았다(P < 0.05). T. sergenti는 한국에 널리 퍼진 진드기 매개 병원체이다. 산악 지역에서 소를 방목하는 것은 T. sergenti 감염의 증가와 밀접한 관련이 있으며(RR = 3.4, P < 0.001) 결과적으로 RBC 수와 HCT가 감소한다. 따라서 이러한 결과는 한국 산간지역의 한우가 혈액학적 변이를 일으킬 수 있는 T. sergenti 감염 위험이 높다는 것을 시사한다. 이 연구를 통해 T. sergenti 감염에 대한 예방 전략의 필요성이 대두된다. 목초지에서 소를 기르는 것은 동물 복지와 비용 절감에 유익한 것으로 알려져 있다. 그러나 방목은 타일레리아증과 같은 진드기 매개 질병에 걸릴 위험도 크다. 제3장에서는 이러한 질병 및 관련 임상 증상에 대한 ivermectin의 효능을 평가했다. 방목 농장에서 총 68마리의 소를 선택하여 예방적 구충제를 투여하지 않은 대조군(17마리)과 이버멕틴 처리군(51마리)으로 나누었다. 두 그룹 사이의 Theileria sergenti 감염률과 RBC 수, 헤마토크리트 값 및 헤모글로빈 농도 같은 적혈구(RBC) 프로필을 봄(방목 전)과 여름(방목 중)에 비교했다. Major piroplasm surface protein(MPSP) 유전자의 PCR 증폭에 기초하여 12두 소가 T. sergenti 감염에 대해 양성이었다. 계통발생학적 분석 결과, 본 연구에서 확인된 분리주는 3가지 MPSP 유형(1, 2 및 7)으로 구성되어 있음이 밝혀졌다. 방목 중 대조군의 T. sergenti 감염률은 ivermectin 처리군보다 3배 더 높았다. 또한 방목 중 RBC 프로필 수치의 차이는 ivermectin 처리군보다 대조군에서 더 컸다. 특히 대조군에서 헤마토크리트 값이 유의하게 감소하였다. 이 연구의 결과는 ivermectin이 방목 소에서 T. sergenti 감염과 RBC 용혈에 대한 예방 효과가 있음을 보여주었다.

전북지역 한우에서 분리한 Theileria sergenti의 항원성에 관한 연구

김병수 全北大學校 1990 국내석사

A splenectomized 5 monthold calf was inoculated with cryopreserved Theileria sergenti infected korean native cattle in chonbuk district. At peak parasitemia(40%), blood was collected, washed and then theileria sergenti was obserbed to delineate the morphologic characteristic with transmission electron microscope. Also, T.sergenti merozoite was lysed with infected RBC and then isolated by differential centrifugation. Antigenic profile of isolated T.sergenti organism was analyzed by SDS-PAGE and western blotting technique. The result could be summarized as follows: 1. light microscopic observation Micrgraph of the infected erythrocyte with Theileria Sergenti with Giemsa stain(×1000.) T.sergenti of commet form(48%), oval form(20%), dot form(12%), baccilus form(11%), and the other form(9%) are observed on infected erythrocytes. 2. trasmission electron microscopic observation: T.sergenti merozoite were observed on numerous shapes, also cytoplasm cotained rhoptris, food vacuole, and tubule. Merozoite varied from 1.7-2um in diameter, divided by a binary fission. The most infected erythrocytes cotained veil (hemosiderin) 3. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis T.sergenti merozoit was subjected to electrophoresis in a 12% polyacrylamide gel. The gel was stained with 0.1% Coomassian brilliant blue R to visualize protein band. Stained gel revealed at least twelve protein bands of approximately 14Kd, 28Kd, 30Kd, 34Kd, 36Kd, 41Kd, 56Kd, 66Kd, 72kd, 97Kd and 116Kd but normal RBC membrane revealed protein bands of 30-34Kd, 36Kd, 42Kd, 58Kd, 66Kd, 97Kd and 116Kd. 4. Enzyme linked immunoelectrotransfer blot(western blot) T.sergenti antigen recognized by specific anti- T.sergenti antibodies demonstrated 28Kd, 30Kd, 38Kd, 56Kd, 58Kd, 66Kd, 97Kd and 116Kd molecular weight range. Negative reactivities were observed in normal bovine serum with T.sergenti and normal erythrocytic antigens. Predominant protein of T.sergenti merozoite antigen were founded at 28Kd, 30Kd and 41Kd molecular weight. On going studies will analyze the relatively inprtance of those antigens for immunization of T.sergenti in Korean native cattle.

Theileria sergenti merozoite의 합성 polypeptide 백신의 야외 실험

정재명 전북대학교 대학원 1995 국내석사

The immunized six calves(5-6 month old) with 100 /dose of 34 kDa, 45 kDa polypeptide and Theileria sergenti merozoite vaccine(protein contend 100 /dose) which were mixed with aluminium hydroxide to elicit antibodies were challenged in field with tick in endemic pasture of theileriosis from March to September 1994 respectively. All animals were monitored for the erythrocyte numbers, parasitemia, hematocrit and the specific antibody reactions. The vaccinated cattle with 34 kDa polypeptide showed more slightly changes in the erythrocyte numbers, hematocrit, hematological changes after vaccination and challenged than those of nonvaccinated cattle. The cattle were challenged with the tick in the pasture during the summer. The immunological responses demonstrated that vaccination elicited a significant. specific antibody to T. sergenti merozoite soluble antigen due to the 34 kDa and 45 kDa polypeptides vaccine. Immunization with the 34 kDa polypeptide inhibited the production of antigen in cattle infected naturally with T. sergenti while the specific antibody still detected the antigen in the non-immunized cattle. Immunization with 45 kDa polypeptide also inhibited the production of the specific antibody induced by 34 kDa antigen from T. sergenti. However it produced 75 kDa antigen. The vaccine derived from the merozoite of T. sergenti produced the 34 kDa. It was very sensitively detected. The control group which had natural theileriosis revealed 75 kDa and 43 kDa and 32 kDa. The specific bands, 75 kDa antigen from the vaccine derived from the merozoite and 34 kDa antigen from the synthesized polypeptide vaccine were not showed in the natural infection. The vaccine derived from the synthetic polypeptide were evaluated for efficacy and imunogenicity in the pasture infected with tick.

소에 감염된 Theileria buffeli 주요 표면 단백질 유전자의 다양성 분석

이영화 전북대학교 대학원 2009 국내박사

Theileria buffeli (former T. sergenti/orientalis)는 주로 한국, 중국, 일본 등의 극동아시아 지역의 소에 감염되는 진드기 매개성 주혈원충이다. T. buffeli는 소에게 식욕 저하, 발육 부진, 빈혈, 발열, 그리고 황달 등의 임상증상을 나타내며, 중증에서는 유산 및 폐사를 일으켜 양축농가에 많은 경제적 손실을 끼치고 있는 병원체이다. Theileria major surface protein (Msp)은 숙주의 면역계에 의하여 인지되는 주요 항원 단백질이다. 그중 33/34 kDa의 Msp는 T. buffeli 내에서 많은 부위를 차지하는 단백질로서 그 항원성과 면역원성이 높은 막표면단백질로 알려져 있다. 하지만 이러한 T. buffeli의 Msp 유전자의 다양성에 대한 분석 결과의 보고는 미비한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 한국의 T. buffeli에 감염된 소의 Msp gene의 다양성을 분석하고, 그 변화상 및 감염 소의 혈액상과 관계를 분석하고자 하였다. 이를 위하여 먼저 한국의 제주에서 사육되고 있는 젖소 57두, 한우 177두에 대한 혈액검사를 실시하였고, Theileria 18S rRNA PCR 검사 및 유전자 염기서열분석을 실시하여 확인하였다. 양성반응을 나타낸 시료에서 젖소의 경우 빈혈을 나타낸 16두, 정상범위의 10두, 총 26두를 선택하였다. 한우의 경우에는 빈혈을 나타낸 16두, 정상범위의 12, 총 28두를 선택하여 각각의 Theileria Msp gene을 PCR 증폭하였고, 그 염기서열 및 항원성을 분석하였다. T. buffeli Msp의 유전자 염기서열에서는 젖소의 경우 Theileria spp.(China; EU584237), T. sergenti(China; DQ078264), Theileria spp.(Thailand; AB081329), Theileria spp.(Okinawa strain, Japan; AB218442), T. buffeli(Fukushima strain, Japan; AB016280) 그리고 Theileria spp.(Okushiri strain, Japan; D87205)와 각각 99.5%, 99.0%, 99.2%, 98.7%, 99.9% 그리고 98.4%의 유사성을 나타내었다. 한우의 경우 Theileria spp.(China; EU584237), T. sergenti(China; DQ078264), Theileria spp.(Thailand; AB081329), Theileria spp.(Okinawa strain, Japan; AB218442), T. sergenti(Fukushima strain, Japan; AB016280)와 각각 99.5%, 100%, 99.2%, 100% 그리고 98.9%의 유사성을 나타내었다. 또한 DNA 염기서열을 amino acid로 전환하여 그 항원성을 분석한 결과, 항원성에 근거한 분류에서는 젖소의 경우 6개 type 즉 type Ⅰ~Ⅵ으로, 한우의 경우 5개 type 즉 type Ⅰ~Ⅴ으로 분류되었다. 그리고 type Ⅳ의 경우 2개의 아-타입으로 분류되었다. 젖소의 경우 분석된 Msp의 수가 총 52건인데 type Ⅰ이 30, type Ⅱ가 2, type Ⅲ이 8, type Ⅳ가 4, type Ⅴ가 7 그리고 type Ⅵ이 1을 차지하였고 한우의 경우 총 56건 중 type Ⅰ이 22, type Ⅱ가 15, type Ⅲ이 9, type Ⅳ가 7 그리고 type Ⅴ가 3을 차지하였다. 추가로, 아미노산 서열을 토대로 한 항원성 분석과 샘플의 PCV 수치와의 관계를 비교 분석하였다. 한우에서 PCV 수치가 낮은 시료들에서 type Ⅱ의 검출율이 높았는데 type Ⅱ는 GenBank database에 등록되어있는 Ikeda type과 유사성을 나타내었다. 이 Ikeda type은 항원성이 높은 것으로 알려져 있다. 반면 젖소에서는 이러한 양상이 보이지 않았고, 전반적으로 type Ⅰ의 검출율이 높았다. 그리고 젖소에서 type Ⅵ가 1건 검출되었다. 이상의 연구에서부터 한국의 소에 감염된 Theileria Msp gene type과 혈액상과의 관계 규명을 최초로 시도한 결과, 그 Msp gene type이 다양하게 존재하고 있음을 확인할 수 있었으며, 젖소와 한우는 각각 감염된 Theileria의 Msp gene type의 분포에서 서로 다른 양상을 보이고 있음을 알 수 있었다. Theileria buffeli (formerly T. sergenti/orientalis) is the major hemo-protozoan distributed in the Far East Asian countries of Korea, China and Japan. T. buffeli is responsible for the clinical symptoms of anorexia, ateliosis, anemia, fever and icterus in cattle. It also causes abortion and sudden death under severe cases, resulting in economic losses for many livestock farms. Theileria major surface protein (Msp) is the major antigenic protein recognized by the immune system of the host. Among the Msp, the 33/34 kDa membrane surface protein that occupies most of the region within T. buffeli has high antigenicity and immunogenicity. However, few studies have analyzed the genetic diversity of the Msp gene in T. buffeli. Thus, the aim of the current study was to analyze the diversity of the Msp gene in T. buffeli infected cattle, and to characterize the relationship between the diversification pattern and hemogram of the infected cattle. Towards that goal, we conducted complete blood count (CBC) tests for 57 Holstein cattle (HC) and 177 Korean indigenous cattle (KIC) raised in Korea. We also performed PCR test and sequence analysis for a T. buffeli 18S rRNA gene to confirm a positive reaction in conjunction with the DNA sequences. From the samples that showed a positive reaction, a total of 26 HC were selected, including 16 HC with anemia and 10 HC in the normal range, and a total of 28 KIC were selected, including 16 KIC with anemia and 12 KIC in the normal range. For each of these samples, we performed a PCR amplification of the T. buffeli Msp gene and analyzed the base sequence and antigenicity. The DNA sequence of the T. buffeli Msp gene in HC showed 99.0%, 99.2%, 99.9%, 99.5%, 98.7%, 98.4% and 98.4% homology with T. sergenti (China; DQ078264), Theileria spp. (Thailand; AB081329), T. sergenti (Fukushima strain, Japan; AB016280), Theileria spp. (China; EU584237), Theileria spp. (Okinawa strain, Japan; AB218442) Theileria spp. (Okushiri strain, Japan; D87205) and Theileria spp. (Okushiri strain, Japan; D87205), respectively. The T. buffeli Msp gene in KIC shared 100%, 99.2%, 98.9%, 99.5% 100.0% and 99.6% homology with T. sergenti (China; DQ078264), Theileria spp. (Thailand; AB081329), T. sergenti (Fukushima strain, Japan; AB016280), Theileria spp. (China; EU584237), Theileria spp. (Okinawa strain, Japan; AB218442) and Theileria spp. (Okushiri strain, Japan; D87205), respectively. In addition, we performed an antigenicity analysis after translating the DNA sequence into a protein sequence, which enabled us to identify six types of antigenicity as types I~VI in the HC and five types as type I~V in the KIC. Especially, the type Ⅴ antigenicity could be sub-classified into two types. Among the total 52 analyzed Msp genes in the HC, we observed 2, 8, 7, 30, 4 and 1 cases of type I, type II, type III, type IV, type V and type VI, respectively. However, among the 56 Msp genes in the KIC, we found 15, 9, 3, 22 and 7 cases of type I, type II, type III, type IV and type V, respectively. Additionally, a comparative analysis was performed using the antigenicity analysis and its relationship with the PCV values of each sample based on the amino acid sequence. Among the samples showing low PCV values in KIC, the detection of type Ⅰ was high and the their sequences were similar to the Ikeda type registered in the GenBank Database. The Ikeda type has been shown to have a high antigenicity, but such a pattern was not observed in the HC where there was high detection of the type I antigenic type overall. In addition, type VI was detected in only one HC. Using the results from previous studies, we first attempted to classify the type of the T. buffeli Msp gene that were infecting Korean cattle to determine the hemogram relationship. The results of our study helped confirm the presence of diverse types for T. buffeli Msp gene and demonstrated that the HC and KIC showed different patterns for T. buffeli Msp gene type distribution.

신생송아지에 있어서 Theileria sergenti의 감염에 관한 연구

이우종 전북대학교 1994 국내석사

The rate of 67 neonatal calves's infection of Theileria sergenti was investigated in random samples on the farms located in Kyeongki, Chonbuk and Jeju districts of Korea. The criteria used in verifying infection with T, sergenti included the detection of parasites by giemsa's stain. and scridine orange stain in the blood smear slides. Further evidence of current or previous exposure to T. sergenti was based on the demonstration of T. sergenti-specific antibody and antigen by the western immunoblot and the indirect immunofluorescent antibody test in the peripheral blood of the calves. The prevalence rates were 35%, 50% and 100% in Kyeongki, Chonbuk and Jeju provinces respectively and the overall prevalence in all the farms was 43.2% by means of acridine orange stain. The parasites that were observed in the peripheral blood of calves was shown surely by the western immunoblot to the characteristic 34KD antigen among the proteins of T, sergenti(Korean isolate). And the antibody of the neonatal calves reacted at the very highest titer(1:>2,520). These data highlight the significance of T.sergenti in the neonatal calf disease in Korea.

Studies on the immunoprophylaxis of Theileria sergenti

김병수 全北大學校 1993 국내박사

Theileria sergenti의 태반감염에 관한 연구

김진호 全北大學校 1995 국내박사

도입우의 진드기매개 주혈원충 감염상과 theileria sergenti의 치료예방에 관한 연구

서명득 서울大學校 大學院 1982 국내박사

Babesia gibsoni 抗原과 Theileria sergenti를 adjuvant로 接種한 개에서의 免疫效果에 관한 硏究

윤창모 圓光大學校 1992 국내석사

Comparison of Blood Biochemical Values between High and Low Producing Holstein Cows : 젖소에서 고능력우와 저능력우의 혈액화학치에 관한 연구

김성선 Graduate School, Cheju National University 2000 국내박사

젖소의 혈액화학치를 조사하여 산유량 증가를 위한 방안을 제시하고자 유량에 따른 Holstein 젖소의 혈액화학치를 비교하였다. 공시동물은 건강한 3-5산차의 Holstein 젖소 30두로 하였으며 사양관리는 농후사료 1일 6kg을 급여하고 방목시켰다. 실험군의 유량을 분만후 15, 30, 60, 90일에 측정한 후 평균 유생산량을 기준으로 평균 27kg 이하(그룹 A)와 평균 30kg 이상(그룹 B)으로 나누었다. 혈액은 분만 예정 15일전, 분만 당일, 분만후 15일, 30일, 60일, 90일에 경정맥을 통하여 채혈하였다. 각 시기별 유량에서 유량이 적은 그룹A가 유량이 많은 그룹 B 보다 분만후 60일에 급속히 감소하였다. 혈액검사 결과에서 적혈구수, 백혈구수. 적혈구용적 및 총단백질은 유량이 많은 그룹 B가 유량이 적은 그룹 A보다 높았다. 특히 적혈구는 분만당일에(p<0.05), 적혈구 용적은 분만 예정 15 일전에(p<0.01), 백혈구수는 분만 예정 15일전(p<0.05), 분만후 15일(p<0.01), 분만후 90일(p<0.05)에, 총단백질은 분만후 90일에(p<0.05) 유의성 있는 차이를 보였다. 섬유소원은 분만전후 다소 변동이 있었으나 분만 당일부터는 유량이 적은 그룹 A에서 높은 경향이었으며 분만후 15일에는 매우 유의성 있게 높았다(p<0.01), 미량원소인 마그네슘과 칼슘은 실험 전기간 동안 그룹 B가 높았다. 특히 마그네슘은 분만 예정 15일전 (p<0.05), 분만 당일(p<0.05), 분만후 15일(p<0.05). 분만후 60일(p<0.01)에 유의성 있는 차이를 보였다. 칼슘은 분만 예정 15일전, 분만 당일, 분만후 30일에 유의성 있는 차이를 보였다(p<0.01). 무기인은 분만 전후 다소 변동이 있었으나 분만후 15일과 30일에는 유량이 높은 그룹 B가 유량이 낮은 그룹 A보다 유의성 있게 높았다(p<0.05). 혈청검사에서 콜레스테롤 농도는 분만 당일에만 두 그룹간에 비슷하였고 그 외의 시기에서는 그룹 B가 높은 경향이었으며 분만후 90일에는 유의성 있게 높았다(p<0.05). BUN과 글루코오스는 유량에 따른 그룹간 차이가 없이 비슷한 수준이었다. 그리고 비타민 A는 분만 예정 15일전과 분만후 15일에는 그룹 B가 유의성 있게 높았으며(p<0.01) 그 이후에는 그룹간에 비슷한 결과를 보였다. 비타민 E는 유량에 따른 그룹간에 유의성 있는 차이가 없이 비슷한 수준을 보였다. 임상증상을 나타내지는 않았지만 모든 공시동물에서 Therleria sergenti가 관찰되었고 적혈구내 원충의 감염율은 유량에 따른 그룹간 차이가 없이 비슷하였다. 그리고 두 그룹에서 모두 분만 당일에 높은 수치를 보였다. 본 실험 결과는 유량에 따른 그룹간 혈액화학치의 차이가 있음을 시사하였다. This study investigated blood biochemical values between high and low yielding daily cows, in order to suggest a means for the improvement of milk production. A total of 30 Holstein cows (3rd to 5th of parity) were used and assigned to two groups according to milk production levels at 15, 30, 60 and 90 days postpartum. Milk production in each of the two groups was less than an average of 27 kg/day (group A) and more than an average of 30 kg/day (group H). Blood samples were collected by jugular venipuncture from each cow six times at 15 days before the anticipated calving date, within 12 hours postpartum (0 days) and at 15, 30, 60 and 90 days after calving. In hematological values group B was consistently higher than group A in average of RBC, WBC, PCV and total protein. But the level of fibrinogen showed a little fluctuation between the groups at antepartum and 0 days but group A is consistently higher than group B in early lactation. In serum mineral concentrations, group S was consistently higher than group A in both Mg and Ca. Inorganic phosphorus concentrations showed a little fluctuation between the groups at antepartum and at postpartum, but group B is significantly higher than group A at 15 and 30 days after calving (p<0.05). 1n serum biochemical values cholesterol concentrations were consistently higher in group B except at 0 days. BUN and glucose concentrations did not differ between the groups. In the concentration of vitamin A group B is significantly higher than group A at 15 days before the anticipated calving date and at 15 days postpartum (p<0.01) but at 30, 60 and 90 days postpartum both groups are similar. Vitamin E concentrations did not differ between the groups during the experimental period. Parasitemia-levels were similar in both groups at all tunes. It was especially notable that both groups showed highest levels of parasitemia at calving time. Results of this study suggest that raising the levels of Mg, Ca, Pi and vitamin A in serum would be effective in increasing milk production of low producing cows.