Atrial Natriuretic Peptide 관련 유전자 분석

조미경 계명대학교 대학원 2014 국내석사

ANP (Atrial Natriuretic Peptide) is a peptide hormone that is expressed in mainly atria. It expresses natriuretic, diuretic, vasorelaxant and antimitogenic effects to maintain normal homeostasis. In addition, the development of biomarkers for diagnosis of cardiovascular disorders is constantly being carried out by a measurement of ANP concentration in plasma and ANP mRNA at the genetic level. In this study, tissue specific expression of ANP was investigated to compare its expression level in various tissues, and to identify possible isoforms. In addition, ANP related genes which might be involved in homeostasis were also investigated. Eva1c, a non-coding RNA (ncRNA), intergenic DNA were identified by PCR using ANP primers designed based on rat genomic DNA. The ncRNA was chosen for further analysis. It has been reported to be located at Chromosome 5 as along with the ANP gene. Primers were designed based on ncRNA sequences to determine the correlation between ncRNA and ANP, after which RT-PCR was carried out. This ncRNA was transcribed in the kidneys, liver, lungs, spleen, testes, and ovaries. Rather, the ANP gene was amplified by RT-PCR in the brain, heart, kidneys, liver, spleen, testes and ovaries. The detailed function of ncRNA is now under investigation. ANP (Atrial Natriuretic Peptide)는 심방에서 주로 발현되는 peptide계 호르몬으로, 이뇨작용과 혈압 감소 등을 중재하여 체내 항상성 유지에 관여한다. 또한 ANP의 혈장 내 농도 측정과 mRNA의 발현정도를 측정하는 방식으로 심혈관성 질병진단의 biomarker 개발 연구가 지속적으로 진행되고 있다. 본 연구에서는 ANP의 조직 특이적 발현을 연구하여 혹시나 조직별로 서로 다른 isoform이 있지 않은지, 또한 발현의 정도가 차이나지 않는지 비교하고자 하였다. 또한 ANP 관련 유전자 분석을 통하여 항상성에 관여하는 새로운 유전자를 탐색하고자 하였다. Rat의 genomic DNA에서 ANP primer를 이용하여 관련 유전자를 증폭한 결과 Eva1c, non-coding RNA (ncRNA), intergenic DNA를 확인하였다. 이 세 가지 유전자 중 ncRNA를 중점적으로 연구하였다. ncRNA는 아직 특별한 기능이 밝혀진 바가 없으며, ANP와 동일한 5번 염색체에 위치하는 것으로 보고되어 있다. 이러한 점에 근거하여 ncRNA와 ANP와의 연관성을 알아보기 위해 이 염기서열에 준하여 primer를 설계하였다. ncRNA primer를 사용하여 RT-PCR을 실시한 결과 신장, 간, 폐, 비장, 정소, 난소에서 발현됨을 확인하였다. 이와 별도로 ANP primer를 사용하여 RT-PCR을 실시하였으며, 뇌, 심장, 신장, 간, 비장, 정소, 난소에서 ANP band가 발현됨을 확인하였다. 향후 ncRNA의 분석을 계속 진행하여 ANP와의 연관성 및 구체적인 생물학적 기능을 더욱 자세하게 파악할 것이다.

Studies on genome editing-mediated precise modification of cellular host factors for control of avian influenza virus in chicken

박영현 서울대학교 대학원 2020 국내박사

Avian influenza virus (AIV) outbreaks have not only caused enormous economic losses in the poultry industry worldwide, but they also have a high potential to cause infection and lethality in humans, which has aroused concerns about the emergence and pandemic spread of high pathogenic avian influenza virus (HPAI). Currently, vaccine-mediated prevention and therapy is the most efficient way to control the influenza virus. However, vaccination strategies against AIV have limited practical effectiveness, as vaccines must be reformulated in response to each seasonal outbreak due to the high plasticity and rapid evolution of AIV. Since viruses must utilize the host cellular machinery during their lifecycle to produce progeny, targeting of the cellular host factors required by the virus might serve as an alternative strategy to vaccination for controlling AIV replication and growth. Recent technological advances in genome editing afforded by the clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 (CRISPR/Cas9) system have enabled highly efficient and precise modification and targeted disruption of genes of interest. The precise modification of host factors used by AIV via genome editing technology is considered an innovative solution for the development of AIV-resistant chickens. The first study was performed to investigate the functional roles of species-specific host restriction factor acidic nuclear phosphoprotein 32 family member proteins (ANP32) in viral polymerase activity and replication of AIVs through CRISPR/Cas9-mediated genome editing system in chicken. The ANP32A, one of ANP32 protein members, has been identified as the host restriction factor for the viral polymerase (vPol) activity of AIVs. Although ANP32A belongs to the conserved ANP32 family, the functional roles of which during viral replication remain unclear. In this study, targeted knockout of chicken ANP32A was performed using CRISPR/Cas9-mediated genome editing to examine the functional roles of ANP32A and other members of the ANP32 family. First, the cANP32A-knockout DF-1 clones and the fifth exon of cANP32A modified DF-1 clones via homology-directed repair (HDR) were established. Next, it was revealed that knockout or precise modification of cANP32A resulted in a significant reduction in AIV replication. Furthermore, via knockdown and enforced expression experiments, cANP32B and cANP32E are not involved in AIV replication. Intriguingly, co-expression of all of the human ANP32 family members in cANP32A-lacking DF-1 cells resulted in reduced vPol activity that depended especially on the PB2-Glu627 (PB2-E627) rather than on the PB2-Lys627 (PB2-K627). It was notable that chicken ANP32A only, not ANP32B and ANP32E, plays a pivotal role in supporting vPol activity of AIVs. Furthermore, the human ANP32C, ANP32D, and ANP32E have suppressive effects on vPol activity in contrast to human ANP32A and ANP32B. These findings suggest that each chicken and human ANP32 family member had different effects on vPol activity, implying that species-specific vPol activity of AIVs could be caused by the differential functions and overall competency of ANP32 family members. Based on the differential role of ANP32 family members in supporting of vPol activity, the functional role of the 27 residues (149-175 residues of ANP32 proteins) in supporting of vPol activity was further investigated. It was reported that ANP32A plays a pivotal role in host range restriction of the vPol AIVs between birds and mammals since chicken ANP32A additionally contains the 27 residues (182-208 residues) duplicated from 149-175 residues. However, the molecular understanding and functional role of these 27 residues in supporting of viral polymerase activity of AIVs have not been fully elucidated yet. It was found that the deletion of 27 residues from hANP32A or swapping of the 27 residues from hANP32C to hANP32A lost the competency to support the vPol activity, whereas swapping of the 27 residues from ANP32A to ANP32C confer the supporting competency in vPol activity. From the pairwise comparison between ANP32A and ANP32C, it was demonstrated that the both of Asp149 (D149) and Asp152 (D152) residues are critically involved in supporting of vPol activity independent of PB2 627 residues. Furthermore, it was found that the D149 and D152 residues are involved in hydrogen bond and electrostatic interaction with viral proteins for supporting of vPol activity, respectively. In addition, via co-immunoprecipitation assay, it was revealed that mutation of these residues resulted in a significant reduction of the protein interaction between ANP32A and vPol. Finally, it was demonstrated that HDR-mediated precise substitution of D149Y and D152H of chicken ANP32A resulted in a significant reduction of viral replication. This study can contribute to understand the molecular insight of ANP32A function and develop the AIV-resistant chicken via precise modification of ANP32A with current genome editing technology. Next study was conducted to examine which of importin α family members are involved in the transportation of viral proteins of avian influenza virus in chicken DF-1 fibroblast cells. Influenza viruses inevitably utilize the cellular transporters for initial transcription and replication of their viral genome at nuclei of host cells upon host infection. The importin α family members have been known to be involved in nuclear import of influenza viruses in mammalian host. Furthermore, it was reported that interspecies restriction of influenza viruses between birds and mammals could be caused by differential utilization of the importin α family in different influenza virus strains, especially avian or mammalian-adapted viruses. In human hosts, avian viruses utilize importin α3 for nuclear import of PB2 and NP, whereas mammalian viruses preferentially exploit the importin α7 instead of importin α3. In contrast to human hosts, however, importin α specificities have not been yet identified in chicken cells. Therefore, chicken importin α family members was targeted by using the CRISPR/Cas9-mediated gene editing system to demonstrate the functional role of importin α family members in viral transportation and replication of AIVs in chicken host cells. It was found that importin α1 and importin α4 are mainly involved in cellular transportation of viral PB2, but not of NP proteins. These results provide a novel understanding of the functional roles of importin α family members in cellular transportation of influenza virus in chicken, and the implications for the development of antiviral drugs and strategy for generation of AIV-resistant animals. Based on the researches, this studies demonstrated that CRISPR/Cas9-mediated genome editing or precise modification of host factors such as ANP32A and importin α family members could restrict the replication and growth of AIVs in the chicken host cell. These findings suggest that our genome editing system could be utilized for the development of AIV-resistant chicken system, and could contribute to facilitate a profound understanding of virus infection and pathogenesis in avian species, providing the chances to establish a novel avian model for academic fields as well as an industrial area. Based on the researches, it was demonstrated that CRISPR/Cas9-mediated genome editing or precise modification of host factors such as ANP32A and importin α family members could restrict the replication and growth of AIVs in the chicken host cell. These studies suggest that the genome editing system could be utilized for the development of AIV-resistant chicken system, and could contribute to facilitate a profound understanding of virus infection and pathogenesis in avian species, providing the chances to establish a novel avian model for academic fields as well as an industrial area. 조류 인플루엔자 바이러스(AIV)는 지난 수 십년 간 전세계 가금 산업에서 막대한 경제적 손실을 초래했고, 최근에는 인간에게 감염을 일으켜서 사망을 초래할 수 있는 고병원성 인플루엔자 바이러스 (HPAI) 출현에 대한 우려로 사회적 문제로 대두되고 있다. 그동안 백신 매개 예방 및 치료는 인플루엔자 바이러스를 제어하는 가장 효율적인 방법으로 인식되어 왔지만, 조류 인플루엔자 바이러스가 백신에 빠르게 적응하고 진화하게 됨에 따라 계절별 발병에 대응하여 백신을 새롭게 개발해야 하기 때문에, 가금류에서 백신 매개 조류 인플루엔자의 예방 및 치료에 대한 실질적 효과가 제한적인 상황이다. 한편, 바이러스는 생활 주기 동안 바이러스 RNA의 복제 및 전사 그리고 단백질 번역을 위해서 숙주 세포 내에 있는 관련 숙주 인자들을 반드시 이용해야 하기 때문에, 바이러스가 필요로 하는 세포 숙주 인자의 표적화 및 제어는 조류 인플루엔자 바이러스의 복제 및 증식을 제한 할 수 있는 혁신적 전략으로 백신 매개 치료법에 대한 대안으로 대두 되고 있다. 최근 CRISPR/Cas9 매개 유전자 편집 시스템의 기술적 진보로 인해 목표 유전자에 대한 매우 효율적인 유전자 knockout 뿐만 아니라 원하는 서열로 정확한 변형이 가능하게 되었다. 유전자 편집 기술을 통해 조류 인플루엔자 바이러스가 이용하는 숙주 인자의 정확한 교정은 조류 인플루엔자 바이러스 저항성 닭의 개발을 위한 혁신적인 해결책으로 주목 받고 있다. 본 연구에서의 첫 번째 주제는 CRISPR/Cas9 시스템을 매개로 닭에서 유전자 편집을 통해서 조류 인플루엔자 바이러스의 전사 활성 및 복제에 관여하는 ANP32 단백질 구성원들에 대한 기능적 조사를 하는 것이다. ANP32 단백질 구성원 중 하나 인 ANP32A는 최근 조류 인플루엔자 바이러스의 바이러스 전사 활성에 대한 숙주-특이적 제한 인자로 밝혀 졌다. ANP32A는 보존 된 ANP32 가족 구성원에 속하지만, 바이러스 복제 동안 기능적 역할은 아직까지 불명확하다. 본 연구에서 ANP32A 및 ANP32 단백질의 다른 구성원들의 기능적 역할을 조사하기 위해 CRISPR/Cas9 매개 유전자 편집 시스템을 사용하여 하여 닭 ANP32A를 표적화 (targeting) 하였다. 먼저, cANP32A 유전자가 knockout 된 DF-1 클론과 HDR-mediated 정밀 유전자 교정을 통해 닭 ANP32A의 다섯 번째 exon이 결여된 클론을 확립하였다. 다음으로, cANP32A의 knockout 또는 정밀 교정으로 인해 바이러스의 전사 활성 및 복제가 현저하게 감소되었다는 것을 입증하였다. 또한, 닭 AN32 구성원의 유전자 knockdown 및 과발현 실험을 통해서 cANP32B 및 cANP32E가 조류 인플루엔자의 전사 활성 및 복제에 관여하지 않는 것을 밝혔다. 닭에서는 ANP32B 및 ANP32E가 아니라, ANP32A만이 조류 인플루엔자의 바이러스 전사 활성을 지지하는 데 중요한 역할을한다는 것을 보여 주었다. 흥미롭게도, ANP32A가 결핍된 닭 세포에서 인간 ANP32 가족 모든 구성원의 공동 발현은 조류 특이적 PB2-672E에 대해 감소 된 바이러스 전사 활성을 초래 하였다. 이는 인간 ANP32C, ANP32D 및 ANP32E가 인간 ANP32A 및 ANP32B와 대조적으로 바이러스 전사 활성에 대한 억제 효과를 갖기 때문인 것으로 밝혀졌다. 본 연구 결과를 종합해 볼 때, 닭과 인간의 각기 다른 ANP32 가족 구성원으로 인해 조류 인플루엔자 바이러스의 전사 활성 및 복제에 대해 서로 다른 영향을 미친다는 것을 밝혔다. 이는 조류 인플루엔자의 종에 따른 차별적인 활성 양상이 ANP32 가족 구성원의 차별적인 기능 및 전반적인 능력에 의해서 좌우 될 수 있음을 시사 한다. 이어서, 바이러스의 전사 활성 및 복제에 대한 ANP32 가족 구성원의 차별적인 역할에 대한 연구를 기반으로, 바이러스의 전사 활성 지원에 대한 27개 아미노산 잔기 (ANP32 단백질의 149-175 번째 서열)의 기능적 역할을 조사했다. 최근에 발표된 연구 결과에 따르면, 닭 ANP32A는 149-175 잔기에서 복제된 조류 특이적 33개의 아미노산 잔기(176-208 번째 서열)를 추가로 가지고 있기 때문에, 포유 동물과 달리 닭을 포함한 다수의 조류 종은 PB2-627 잔기 특이적 전사 활성 제한을 극복할 수 있는 것으로 밝혀 졌다. 다시 말해, ANP32A 유전자에 추가적인 33개 잔기가 있는 닭과 같은 조류 종에서는 조류 인플루엔자 바이러스가 증식을 잘할 수 있지만 그렇지 않은 포유류 종에서는 조류 인플루엔자 바이러스가 포유류 특이적인 적응적 돌연변이가 일어나기 전까진 증식을 잘 하지 못한다. 이처럼 ANP32A 단백질에서 추가적인 33개 잔기의 역할이 중요하다는 것이 알려졌지만, 조류 인플루엔자 바이러스의 전사 활성 및 복제에 있어, 닭과 인간에서 공통적으로 존재하는 ANP32A 및 다른 ANP32 구성원들의 27개 잔기의 분자 이해 및 기능적 역할은 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 본 연구에서, hANP32A에서 27개 잔기의 결실 또는 hANP32C에서 hANP32A로의 27개 잔기의 교환은 vPol 활성을지지하는 능력을 상실하는 반면, ANP32A에서 ANP32C로 27개 잔기의 교환은 바이러스 전사 활성의 지지 능력을 부여한다는 것을 발견 하였다. ANP32A와 ANP32C 사이의 단백질 서열 비교를 통해서, 149D 및 152D 잔기가 바이러스 전사 활성 지지에 결정적으로 관여 함을 확인 하였고, 149D 및 152D 잔기가 vPol 활동을 지원하기 위해 각각 수소 결합 및 정전기 상호 작용으로 관여하는 것을 밝혀냈다. 마지막으로, 유전자 편집 기술 매개 정밀 교정을 통해 닭 ANP32A의 D149Y 및 D152로의 정교한 치환 돌연변이가 바이러스 복제의 유의미한 감소를 초래한다는 것을 입증 하였다. 본 연구는 ANP32A 및 ANP32 구성원들의 조류 인플루엔자 전사 활성 및 복제에 대한 분자적 역할에 대한 심도 있는 이해를 바탕으로, 유전자 편집 기술을 활용하여 닭 ANP32A를 정밀하게 교정함으로써 조류 인플루엔자 저항성 닭을 개발하는 데 활용 될 수 있을 것으로 판단 된다. 마지막으로, 닭 세포에서 조류 인플루엔자 바이러스의 바이러스 성 단백질의 수송에 어떤 importin α 가족 구성원이 관여 하는지를 조사 하였다. 인플루엔자 바이러스는 숙주 감염 시, 핵에서 바이러스 유전체의 초기 전사 및 복제를 위해 필연적으로 숙주 세포의 세포 수송 체를 이용한다. Importin α 구성원은 포유 동물에서 인플루엔자 바이러스의 핵으로 이동에 관여하는 것으로 알려져 왔는데, 조류와 포유류 사이의 인플루엔자 바이러스의 종간 제한은 인플루엔자 바이러스의 importin α 가족 구성원의 차별적 이용에 의해 야기 될 수 있다고 보고되었다. 인간에서, 조류-특이적 인플루엔자 바이러스는 PB2 및 NP의 핵으로의 이동을 위해 importin α3 를 사용하는 반면에, 포유류-특이적 인플루엔자 바이러스는 importin α3 대신 importin α7을 우선적으로 이용한다. 그러나 인간 숙주와는 달리, 닭 세포에서 importin α 특이적 친화성은 여전히 밝혀지지 않았다. 따라서, CRISPR/Cas9매개 유전자 편집 시스템을 사용하여 닭 importin α 가족 구성원을 표적화함으로써, 닭 숙주 세포에서 바이러스 수송에서 importin α 가족 구성원의 기능적 역할을 구명하였다. 결과적으로, importin α1 및 importin α4 가 NP 단백질의 수송에는 관여하지 않는 것으로 보이나 PB2 단백질의 세포 수송에는 어느 정도 관여한다는 것을 발견 하였다. 따라서, 본 연구 결과는 닭에서 인플루엔자 바이러스의 세포 수송에 importin α 가족 구성원의 기능적 역할에 대한 깊은 이해를 통해, 항 바이러스 약물 개발 및 조류 인플루엔자 저항성 모델 동물 개발에 활용 될 수 있음을 시사한다. 본 연구 결과들을 바탕으로, CRISPR/Cas9 시스템을 통해 ANP32A 및 importin α 가족 구성원과 같은 숙주 인자의 유전자 편집 또는 정밀 교정에 성공하였으며, 이를 통해서 닭 숙주 세포에서 조류 인플루엔자 바이러스의 복제 및 성장이 제한 될 수 있음을 검증하였다. 본 연구 결과들은 조류 종에서 바이러스의 감염 및 발병 메커니즘에 대한 깊은 이해를 향상 시킬 뿐만 아니라, 확립된 유전자 편집 시스템을 활용하여 산업계 및 학계에서 활용 가능한 조류 인플루엔자 저항성 조류 모델을 개발하는데 기여 할 수 있을 것으로 판단 된다.

ANP 기반 도시환경정비사업의 변화관리 요인 도출 및 중요도 산정

신승윤 서울시립대학교 일반대학원 2012 국내석사

대규모로 진행되는 도시환경정비사업의 경우, 다수의 참여주체의 요구 및 내/외부적인 요인에 의하여 사업의 환경, 주체, 법규, 계획 등이 빈번히 변화되는 특성을 지닌다. 이처럼 대규모로 진행되는 도시환경정비사업에서는 다수의 변화의 가능성을 가지고 있는 만큼, 전체 사업의 업무프로세를 기반으로 변화요인을 정의하여 사업추진단계별로 발생 가능한 변화요인을 사전에 인지하고 체계적으로 관리할 수 있는 방안이 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 도시환경정비사업과 같이 다수의 변화 가능성이 내재된 사업의 체계적인 변화관리를 위하여, 업무프로세스를 기반으로 주요 변화관리 요인을 도출하였다. 또한 ANP방법론을 활용하여 도출된 변화요인들에 대한 외적, 내적 특성을 반영함으로써 사업 추진단계별 특성화된 주요 변화요인들의 중요도를 정량적으로 제시하였다. 본 연구의 내용 및 결과를 요약하면 다음과 같다. 첫째, 기존문헌 고찰을 통하여 변화관리에 대하여 정의하였고, 도시환경정비사업 정의 및 유형을 제시하였다. 변화요인의 도출을 위하여 도시환경정비사업 관련 선행연구 분석을 실시하였으며, 이를 통해 총 38개의 문제요인과 77개의 리스크 관리요인을 도출하였다. 둘째, 3건의 도시환경정비사업 사례를 대상으로 실제 변화요인에 대한 분석을 실시함으로써, 총 11개의 변화요인을 도출하였으며, 이를 기반으로 문제점 및 개선방향을 제시하였다. 셋째, 도출된 변화요인들을 기반으로 추진단계별 변화요인에 대한 빈도분석을 실시하였으며, 이를 통해 주요 변화관리 시점인 사업시행단계를 선정하였다. 또한 앞서 선행연구 및 사례분석을 통해 도출된 126건의 변화요인을 대상으로 추가, 삭제, 통합을 거쳐 42건의 변화요인을 제시하였다. 넷째, 시행단계에서 발생 가능한 변화요인들간의 상관관계를 분석하기 위하여 외적 변화요인과 내적 변화요인으로 분류를 하였다. 외적 변화요인은 도시환경정비사업 특성을 반영하기 위하여 기존 PMBOK과 전문가 면담을 통하여 총 5개의 외적 변화요인을 도출하였다. 다섯째, 외적 변화요인에 내재된 내적 변화요인들을 도출하기 위하여 기존에 도출된 42개의 변화요인을 대상으로 설문조사를 실시하였다. 이를 통해 14개의 변화요인을 도출하였으며, 전문가 면담으로 통하여 6개의 변화요인을 추가함으로써 총 20개의 내적 변화요인을 도출하였다. 여섯째, 전문가 면담조사를 통해 분석된 외적 변화요인과 내적 변화요인의 상관관계를 바탕으로, ANP를 활용하여 외/내적 변화요인의 중요도를 산정하였다. 분석결과, 철거 및 보상문제, 업체간 과다경쟁, 추가부담금 문제, 조합설립 소요시간 순으로 중요도가 분석되었다. 일곱째, 기존 연구와의 차별성을 제시하기 위하여 AHP와 ANP를 통해 도출된 중요도를 비교하였다. 이를 통해 도시환경정비사업과 같이 대규모로 추진되는 사업에서의 외적, 내적 요인의 분류의 필요성과 기존 연구와의 차별성을 제시하였다. 여덟째, 마지막으로 전문가 면담을 통한 추진단계별 변화요인들에 대한 타당성 및 실제 사례에서의 적용가능성을 검토하고, 본 연구의 차별성 및 연구의 한계를 제시하였다. 본 연구에서 제시한 사업추진단계별 주요 변화요인은 기존 사업수행단계별로 한정하여 요인을 관리하는 체계에서 벗어나 사업의 업무프로세스 전반을 기반으로 변화를 관리함에 따라, 사전에 발생 가능한 변화에 유기적으로 대응할 수 있을 것으로 사료된다. 또한 변화관리 요인들에 대한 데이터 축적 등을 통해 기존 사례의 문제점 및 추이분석 등을 실시함으로써, 향후 유사한 사업 수행 시 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 기대된다. 한편 이러한 사업 추진단계별 변화관리 요인의 경우, 사업의 특성 및 규모 등이 상이한 도시환경정비사업에 일률적으로 적용하기에는 한계가 있다. 따라서 각 사업별 특성에 따른 새로운 변화요인에 대한 정의에 따라 변화요인을 도출하고, 이를 기반으로 변화의 대응방안에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다. For urban renewal projects progressing in large scale, it carries a characteristic that frequently changes the environment, subject, law, plan and the like by a demand from various participants and internal/external factors. As such large-scale urban renewal projects have a lot of possibilities of change, it requires setting a plan to recognize the possible variable factors by each project operation stage and to manage it systematically by defining the variable factors on the basis of working process of the entire project. Therefore this research has produced a factor of main variable management based on working process for systematic variable management on the projects that inherent various possibilities of change as urban environment refurbishment projects. And it also suggests the status of main variable factors characterized by project operation stages quantitatively through reflecting external and internal features for variable factors produced from utilizing ANP methodology. Summary of the details and results in this research is as follows. Firstly, it defines variable management with considering the existing literatures and suggests a definition and types of urban renewal projects. Advanced analysis related to urban renewal projects has performed in order to derive variables and it has derived 38 problematic factors 77 risk-manageable factors through such analysis. Secondly, it has derived total 11 variables by performing an analysis on actual variables targeting 3 cases of urban environment refurbishment projects and presents problems and a direction for improvement on the basis of such. Thirdly, it has performed frequency analysis on variables by operation stages based on produced variables and has selected project operation stage which is a point of management of main variables through this. And it also presents 42 variables through case analysis and advanced studies. Fourthly, it has classified variables into external variable and internal variable in order to analyze a correlation between possible variables at a trial stage. Total 5 external variables have been derived through existing PMBOK and interviewing experts so to reflect the features of urban environment refurbishment projects. Fifthly, a survey has been performed targeting previously derived 42 variables so as to derive internal variables inherent in external variables. 14 variables have been derived through this and total 20 internal variables have been achieved by adding 6 more variables through interviewing experts. Sixthly, the importance of internal/external variables has been estimated by utilizing ANP on the basis of a correlation between external variables and internal variables analyzed by expert interview. As a result of analysis, the importance has been analyzed in order of demolition, compensation, excessive competition between companies, additional burden charge and delay on establishing the union. Seventhly, importance derived from AHP and ANP has been compared in order to present a differentiation with existing researches. It suggests the necessity of classifying external/internal factors for the large scale projects such as urban environment refurbishment projects and a differentiation with existing researches through this. Eighthly, it has lastly reviewed the applicability for actual cases and the validity on variables for operation stages through expert interview and presents a differentiation of this research and limitation of the study. Main variables for each project operation stage suggested in this research are considered as being able to organically counteract possible changes beforehand with managing changes on the basis of the entire working process for the project rather than being under the existing system managing the factors by limiting them by project operation stages. With carrying out analysis on progress and problems of existing cases through accumulating data for variable manageable factors in the future, it can be utilized for primary data when advancing the similar project henceforth. On the other hand, there is a limit to apply characteristics and scales of the projects onto urban environment refurbishment projects uniformly in case of such variable manageable factors for each project operation stage. And it is also considered that an additional research on counterplan for derived variables is required.

적출 쥐 심장에서 화학물질이 ANP분비에 미치는 영향

김재우 경북대학교 1990 국내석사

ANP 분비에는 심방확장 이외에 어떤 화학물질에 의해서도 분비가 촉진될 수 있을 것이다. 따라서 본 실험에서는 직접적으로 화학 물질의 영향을 보기 위해 심장을 체외로 끄집어내어 Langendorff 표본을 만들어 ANP분비를 조사하였다. 실험동물은 Wistar 숫쥐를 사용하였으며 심장을 끄집어내어 대동맥으로 modified Krebs-Henseleit 용액을 관류하며 15분간 안정화 시킨 후 자율신경 수용체에 작용하는 norepinephrine (10^-6M), phenylephrine (10^-6M), isoproterenol (10^-6M), acetylcholine(10^-5M)과 angiotensin (10^-7, 10^-6M) 및 nifedipine (10^-7, 10^-6M)을 관류액에 첨가하여 5, 10분에 심박수, 심실내압, 심수축력을 반영할 수 있는 심실내압 변화율 및 ANP 분비량을 측정하였다. Norepinephrine은 심박수, 심실내압, 수축력을 증가시켰다. 그리고 용출량 증가와 함께 ANP 분비도 증가하였다. 그러나 phenylephrine이나 isoproterenol에 의해서는 ANP분비에 차이가 없었다. Acetylcholine은 심박수를 감소시켰다. 용출량은 감소하였지만 ANP분비는 주입 10분에만 반대로 증가하였다. Angiotensin II에 의해서는 용출액량은 감소하였고 반대로 ANP 분비는 증가하였으며 10^-6M의 반응이 더 컸다. Nifedipine에 의해서는 용출액량이 증가하고 ANP분비는 반대로 감소하였으며 10-^6M 농도에서 반응이 더 컸다. 측정인자와 ANP 분비의 상관관계를 조사해 보면 용출액량과 ANP 분비량 사이에 역상관관계가 있었으며 그 회귀식은 다음과 같았다. △ ANP = 37.6 - 18.03 × △ Flow (r = -0.44) 이었다. 이상의 결과를 종합하면 체액조절에 중요한 물질인 ANP 분비는 자율신경 신경전달물질인 norepinephrine과 acetylcholine에 의해 직접적으로 분비가 촉진되며 관상혈류량에 의해서도 조절될 수 있는 것으로 생각된다. Secretion of ANP nay be caused by many factors including chemical substances as well as atrial distention. In order to observe the direct effect of chemicals to secrete ANP in the heart, the heart was isolated into a Langendorff preparation. The heart was excised from male Wistar rats and perfused with modified Krebs-Henseleit's solution through the aorta. After a stabilizing period of 15 min, some of the autonomic drugs were added to the perfusate, namely, norepinephrine (10^-6M), phenylephrine (10^-6M), isoproterenol (10^-6M), acetylcholine (10^-5M), plus angiotensin II (10^-7, 10^-6M) and nifedipine (10^-7, 10^-6M). Heart rate, intraventricular pressure, rate of change of intraventricular pressure which reflects the ventricular contractility and ANP secretion were measured at 5 and 10 min. Norepinephrine increased the heart rate, intraventricular pressure and ventricular contractility. It also increased volume of effluent as well as secretion of ANP. But ANP secretion was not altered by phenylephrine or isoproterenol. Administration of acetylcholine decreased the heart rate and volume of effluent, but increased ANP secretion at 10 min. Angiotensin II produced a decrease in volume of effluent but a increase in ANP secretion. The effect of angiotensin II was greater in 10^-6M. Nifedipine caused an increased volume of effluent and a decrease of ANP secretion. Its effect was greater in 10-6M. A correlation analysis of measured parameters and the ANP secretion revealed the existence of correlation as follows: △ ANP secretion = 37.6 - 18.03 × △ Flow (r = -0.44). Above results suggest that the secretion of ANP, one of important regulatory substances of the body fluid, might be controlled by autonomic nervous transmitters such as norepinephrine and acetylcholine. And the secretion also seems to be inversely proportional to the rate of coronary blood flow.

ANP를 이용한 전자 폐기물의 역물류 모델링

조혹관 경성대학교 대학원 2009 국내석사

Effect of Serotonin on the Regulation of Atrial ANP Release : ANP 분비 조절에서 serotonin의 역할

조춘화 Chonbuk National University Graduate School 2004 국내박사

Serotonin은 혈소판에 고농도로 존재하며 혈소판이 활성화될 때 혈액내로 유리되어 혈액순환을 따라 순환기계에서 여러 가지 중요한 작용을 한다. Serotonin은 15개의 수용체를 통하여 다양한 생리기능을 하는데 그 중 serotonin은 심방의 수축력과 박동수를 증가한다는 것이 알려져 있다. 한편 심방은 atrial natriuretic peptide (ANP)를 합성하고 분비하는 주된 장소로서 ANP는 renin-angiotensin-aldosterone계와 함께 체액조절에 깊이 관여한다. ANP 분비는 여러 가지 요인에 의해 조절되는데 그중 심방 역동성의 변동이 주된 요인이다. 그러나 serotonin이 ANP분비조절에 미치는 영향과 그 기전에 대해서는 잘 알려지지 않았다. 이 연구의 목적은 박동하지 않은 쥐의 관류 심방 모형을 이용하여 serotonin이 심방의 ANP 분비 조절에 미치는 영향을 구명하고자 하였다. Serotonin은 농도 의존적으로 stretch에 의한 ANP 분비를 억제하였다. 5-HT_(2) 수용체의 선택적 길항제인 methyl-5-hydroxytriptamine maleate (methyl-5-HT)에 의한 ANP 억제효과는 serotonin보다 3배정도 강력하였다. serotonin과 methyl-5-HT에 의한 ANP 억제효과는 5-HT_(2) 수용체 선택적 차단제인 ketanserin처리에 의해서 차단되었으나 5-HT_(4) 수용체 선택적 차단제인 RS23597-190처리에 의해서는 강화되었다. Phospholipase C 억제제인 neomycin, protein kinase C 비선택적 억제제인 staurosporine 또는 chelerythrine을 전처리 하였을 때 serotonin의 stretch에 의한 ANP 억제효과가 약화되었다. Serotonin을 쥐의 복강내에 투여하였을 때 혈장내의 ANP 농도는 감소하였으며 renin 농도는 증가하였다. 5-HT_(4) 수용체 선택적 길항제인 2-[1-(4- piperonyl) piperazinyl] benzothiazole (PPB)는 stretch에 의한 ANP 분비를 증가하였다. 5-HT_(4) 수용체 선택적 차단제인 RS23597-190 또는 SB203186을 전처리 하였을 때 PPB에 의한 ANP분비의 증가효과는 완전히 차단하였으며 5-HT_(2) 수용체 선택적 차단제인 ketanserin 전처리에 의해서는영향을 받지 않았다. Adenylyl cyclase 억제제인 MDL12330, protein kinase A 억제제인 KT5720 또는 H89를 전처리 하였을 때 PPB에 의한 ANP유리의 증가효과는 영향을 받지 않았다. Serotonin, methyl-5-HT 또는 PPB는 단일 심방근세포 내의 Ca^(2+) 농도에 영향을 미치지 않았다. 이상의 결과는 serotonin에 의한 ANP 억제효과는 5-HT_(2) 수용체를 경유한 phospholipase C 경로를 통하여 나타나며 5-HT_(2) 수용체와 5-HT_(4) 수용체는 ANP 분비조절에서 반대 역할을 함을 암시한다. Circulating serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) secreted mainly from enterochromaffin cells, is stored in platelets and the activated platelets release serotonin, causing multiple cardiac effects. Serotonin mediates its diverse physiologic effects through at least 15 different receptor subtypes. Serotonin receptors mediate positive inotropic and chronotropic effects in atria. On the other hand, the atria are composed of specific myoendocrine cells which synthesize and secrete atrial natriuretic peptide (ANP), an antagonistic peptide of the renin-angiotensin-aldosterone system involved in the regulation of the fluid balance in the body. The secretion of atrial ANP is closely related to changes in atrial hemodynamics. However, little is known about the effect of serotonin on the regulation of atrial ANP secretion and its receptor-mediated mechanisms. The aim of this study was to investigate physiological role of endogenous serotonin on the regulation of atrial ANP secretion from isolated perfused nonbeating rat atria. Serotonin, an endogenous 5-HT receptor agonist, caused concentration-dependent suppressions of stretch-induced ANP secretion, which were less pronounced than those caused by α-methyl-5-HT maleate (methyl-5-HT), a 5-HT_(2) receptor selective agonist. The suppression of stretch-induced ANP secretion due to serotonin and methyl-5-HT was attenuated by ketanserin, a 5-HT_(2) receptor antagonist, and accentuated by RS23597-190, a 5-HT_(4) receptor antagonist. The suppressive effect of serotonin on ANP secretion was attenuated by neomycin (phospholipase C inhibitor), staurosporine and chelerythrine (nonselective protein kinase C inhibitor). In vivo, serotonin also decreased plasma ANP concentration and decreased plasma renin concentration. In contrast, 2-[1-(4-piperonyl) piperazinyl]benzothiazole (PPB), a 5-HT_(4) receptor selective agonist, caused an accentuation of stretch-induced ANP secretion, which was completely blocked by RS23597-190 or SB203186 HCl, but not by ketanserin. This effect was not affected by MDL12330 (adenylyl cyclase inhibitor), KT5720, or H89 (protein kinase A inhibitor). The intracellular Ca^(2+) concentration in single atrial myocytes was not changed by serotonin or agonist for either 5-HT_(2) or 5-HT_(4) receptor. These results suggest that serotonin inhibits atrial ANP secretion through 5-HT_(2)receptor and phospholipase C and PKC pathway. 5-HT_(2) and 5-HT_(4) receptors may have an opposite actions on the regulation of ANP secretion.

신성 고혈압 쥐에서 DNP계의 변조

김선영 전북대학교 대학원 2007 국내박사

본 연구는 일측 신동맥 결찰로 유도된 신성 고혈압이 신장 내의 DNP 계를 어떻게 변조시키는지를 밝히고자 수행되었다. Goldblatt 고혈압 쥐에서 혈장과 조직 내 이뇨호르몬들의 만성적 변화와 정상일 때와 고혈압 상태일 때의 이뇨호르몬들의 수용체를 알아보고자 하였다. 또한 HE 염색으로 병리적 증상을 관찰하고, 수용체의 특성을 구명하기 위해 in vitro receptor autoradiography 및 receptor membrane binding assay, guanylyl cyclase 활성화를 통해 생성된 cGMP의 측정, 신장과 심장 내 mRNA의 발현양을 알아보고자 RT-PCR, 신장 내 단백질의 변화양상을 관찰하기 위해 Western blot을 실시하였다. 신성고혈압 모델을 위해 210 ± 4 g의 수컷 Sprague-Dawley를 실험동물로 사용하였다. 2K1C 고혈압 유도 후 8 주째에, 꼬리동맥에 간접혈압측정법을 이용하여 수축기 혈압을 측정하였고, 혈장과 조직 내 ANP와 DNP의 함유량을 방사면역측정법을 통해 측정하였다. 대조군에 비해 2K1C 고혈압 쥐에서의 수축기 혈압은 (50>㎜Hg) 높았다. 혈장 내 ANP와 DNP의 함유량은 대조군과 비교할 때 2K1C 고혈압 모델에서 더 높았다. 클립을 끼운 신장 (왼쪽 신장)의 수질 내 ANP와 DNP의 양은 피질에서보다 높았다. RT-PCR에 의한 ANP의 mRNA 발현양은 2K1C 고혈압군의 클립한 신장, 특히 수질부에서 현저히 높았으며, 심장에서도 대조군에 비해 현저히 높게 나타났다. 또한, Western blot에 의한 ANP의 단백질 수준에서도 클립한 신장에서 대조군에 비해 현저한 증가양상이 나타났다. 125I-ANP와 125I-DNP의 특이적 결합장소는 신장 내에서 사구체, 수질, 신동맥, vasa recta bundle에 주로 분포하였다. 특히, 이 특이적 결합력은 클립하지 않은 쪽에 비하여 클립한 신장의 사구체에서 더 높았다. 동위원소로 표지된 ANP (125I-ANP)와 DNP (125I-DNP)를 사용하여 이 두 이뇨호르몬 간의 혈액과 혈액 내 펩타이드 분해효소로부터의 안정성을 비교하였다. 즉 125I-ANP와 125I-DNP를 각각 쥐 혈장에 넣어 37℃에서 1, 2, 4 시간 단위로 배양하였다. 125I-ANP의 분자적 성상은 배양 1시간 내에 빠르게 변하였으나, 125I-DNP에서는 배양 4시간에서도 안정성을 유지하고 있었다. 신성 고혈압 쥐의 혈장 내 125I-ANP와 125I-DNP는 대조군의 혈장에 비해 보다 빠르게 분해되는 양상을 나타내었다. 또한, ANP와 DNP는 쥐 신장의 피질과 수질의 막단백질에서 guanylyl cyclase를 활성화시켜 cGMP를 생성함이 발견되었다. cGMP 생성능은 clipped > control > non-clipped 이었고, 피질은 수질에 비해 cGMP 생성능이 현저히 적었다. ANP와 DNP는 신장의 피질과 수질 모두에서 NPR-A subtype에 보다 선택적으로 결합하는 이뇨호르몬으로서 비슷한 cGMP 생성 능력을 가지고 있음이 관찰되었으나, NPR-B subtype에 보다 선택적인 CNP에 대해서는 거의 cGMP가 생성되지 않았다. 클립한 신장 내에서 수축된 신세뇨관과 사구체가 관찰되었다. 또한, haemopoietic tissue와 인접한 장소에서 괴사와 섬유화가 진행되어 있었고, 염증성 세포도 관찰되었다. 이상의 결과로 보아, 혈장과 조직 내 ANP와 DNP의 증가양상은 신기능과 혈액동력학의 변조로 간주되는 병태생리적 조건이며, 이는 고혈압을 저해하는 작용을 하는 것을 시사한다. 또한, ANP와 DNP의 수용체의 결합능력의 변조는 높아진 혈압에 의해 유도되는 신장 내 구조의 상해를 반영하는 것으로 추론할 수 있다. The present study was aimed to identify the modulation of intrarenal natriuretic peptide systems in renal hypertension caused by unilateral renal artery stenosis. I examined the chronic changes of plasma concentrations and tissue contents of natriuretic peptides (NPs) and characterized NPs receptor binding in the glomeruli of rat kidney by in vitro autoradiographic analysis using 125I-ANP, -DNP and unlabelled selective ligand for NP receptor subtype. I also observed the pathological symptoms from HE staining in the 2K1C (2 kidney 1 clipped) hypertensive rats. Renal hypertension was induced in male Sprague-Dawley rats weighing 200-220 g by constricting the left renal artery with a silver clip 0.22 ㎜ wide while leaving the right kidney untouched. Systolic blood pressure was measured weekly with a tail cuff method. Studies were performed on animals eight weeks after induction of hypertension. NPs in plasma and tissues were measured by specific radioimmunoassay. Systolic blood pressure in 2K1C hypertensive rats was significantly higher (>50 mmHg) than that in the sham group. Plasma ANP and DNP levels were also higher in 2K1C rats compared with the sham group. ANP and DNP contents of renal medulla in clipped kidney were higher than those of renal cortex. Specific 125I-ANP and -DNP bindings were localized mainly in glomeruli, inner medulla, intrarenal arteries and vasa recta bundles of rat kidney. Especially, these specific bindings were increased in the glomeruli of the clipped as compared with the non-clipped kidney. The comparison of reverse-phase HPLC profiles of 125I-ANP and -DNP were performed by incubation of these molecules in rat plasma at 37℃ for 1, 2, and 4 hours. After incubation, 125I-ANP was quickly degraded within 1 hour. But 125I-DNP was more stable than ANP until for 4 hours in plasma. 125I-ANP and -DNP in plasma from rat with 2K1C hypertension were degraded faster than those of sham rats. Glomeruli and renal tubules were shrinked in clipped kidney. Incidence of necrosis or fibrosis was appeared adjacent to the hemopoietic tissue. The prolonged stenosis of unilateral renal artery results in severe hypertension and cardiac hypertrophy. The mechanism that sustains the hypertension after renal ischemia may change with time and involve the sympathetic nervous system, the adrenal glands, or structural adaptations of the resistance vessels. These results indicate that the increases of ANP and DNP levels in plasma and tissues were shown in pathophysiological conditions characterized by modulations of cardiac/renal function and systemic hemodynamics. The augmented synthesis and release of ANP and DNP may serve to counteract the hypertension. The modulation of ANP and DNP receptor bindings is supposed to reflect to the damage of intrarenal structures caused by the high blood pressure.

Histamine에 의한 심장호르몬 ANP 유리의 조절

안해선 全北大學校 2002 국내박사

심방의 ANP 분비는 심방의 역동성에 의하여 조절되며 cyclic nucleotide와 Ca^2+등에 의하여 영향받는다. 그러나, 심방 ANP 분비 조절에서 내인성 요인은 알려지지 않았다. Histamine은 심장 조직에 풍부하게 존재하나 심장 호르몬 분비에 대한 영향은 아직 알려져 있지 않다. 이 연구는 histamine이 심방 ANP 분비에 대한 내인성 조절 요인이 될 수 있는가 하는 의문을 구명하고자 하여 가토 관류 심방에서 histamine에 의한 ANP 분비의 특성 변화를 밝힌 것이다. 박동하지 않는 관류 심방에서 심방근 세포는 심방 내압 변동 의존적으로 ANP 유리를 증가 시켰다. 이때, histamine은 용량 의존적으로 ANP 유리를 억제하였으며, histamine H₂ 수용체 촉진제인 dimaprit도 유사한 효과를 보였다. Histamine에 의한 ANP 유리 억제는 histamine H₂ 수용체 길항제인 ranitidine에 의하여 차단되었다. 박동하는 관류 심방에서 histamine은 ANP 분비의 증가와 감소를 보였다. ANP 분비의 증가는 심방근 세포외액 이동량의 증가에 의하며 감소는 심방근 세포로부터 ANP 유리의 억제에 의하였다. Histamine H₁ 수용체 길항제는 ANP 유리의 억제를 차단하였으며, H₂ 수용체 길항제는 ANP 분비의 증가와 유리의 억제 모두를 차단하였다. 이상의 연구 결과는 histamine이 기계적 자극에 의한 ANP 분비를 촉진하기도 하고 그 유리를 억제하기도 하는 이중적 역할을 가지고 있음을 보이는 것이다. 또한 이 연구는 histamine에 의한 ANP 분비의 증가는 H₂ 수용체를 경유하고 심방근 세포로부터 ANP 유리의 억제는 H₁과 H₂ 수용체를 경유하여 나타남을 암시하였다. Atrial secretion of atrial natriuretic peptide (ANP) has been known to be controlled by atrial dynamics or atrial volume changes. However, specific regulators for the ANP secretion have not yet been defined. Histamine is present in cardiac tisssues in micromolar concentration. Intrinsic role for the regulation of atrial ANP secretion is unknown. The present study was designed to define the effect of exogenous histamine on atrial secretion of ANP. Experiments were performed in beating or non-beating perfused rabbit atria. In non-beating atria, histamine inhibited an accentuation of ANP secretion induced by atrial distension-and-reduction in terms of extracellular fluid (ECF) translocation (rate of atrial myocytic ANP release) in a volume change-dependent manner. Chlorpheniramine, an inhibitor of histamine H_1 receptor failed to modulate histamine-induced inhibition of atrial myocytic ANP release. Ranitidine, an inhibitor of histamine H_2 receptor blocked histamine-induced inhibition of atrial ANP release. Dimaprit, an agonist of histamine H_2 receptor inhibited accentuation of ANP release by atrial volume changes. In beating atria, histamine elicited dual effects in atrial ANP secretion, an increase followed by an inhibition. The increase in ANP secretion was coincident with an increase in ECF translocation, while the decrease was closely related with an inhibition in myocytic ANP release. Chlorpheniramine failed to modulate histamine-induced increase in ANP secretion and partially blocked an inhibition in myocytic ANP release. Ranitidine blocked histamine induced changes in ANP secretion, ECF translocation and myocytic ANP release. This study suggests that histamine has dual effects on the regulation of atrial ANP secretion via histamine H₂ receptor: an increase in ANP secretion by an increase in atrial dynamics and ECF translocation and an inhibition by a decrease in myocytic ANP release.

흰쥐 심근경색 동물모델에서 혈장내 ANP의 변화

이환기 전북대학교 대학원 2007 국내석사

Atrial natriuretic peptide (ANP) is associated with the variety of disorders of myocardial function. However, the effect of myocardial infarction (MI) on the ANP has not been fully described. Thus, this study investigated the effect of myocardial infarction on atrial natriuretic peptide (ANP) in rats with experimental myocardial infarction (MI) induced by left coronary artery ligation. Animals were divided into 11 groups with sham operation and normal animals for each group. Ligation of the left coronary artery was performed in male Sprague-Dawley male rats at 60 days of age. Rats of sham operation had a similar procedure without having the suture tightened around the coronary artery. MI and sham rats were sacrificed at 1, 3, 6, 12 and 18h and 1, 3, 5, 7, 14 and 30 days after ligation of left anterior descending coronary artery with normal anmials for each group. Myocardial infarct size was assessed by planimetry and perimetry. ANP levels in plasma was determined by radioimmunoassay. No significant differences were observed in infarct size among the groups. The concentrations of plasma ANP were significantly increased at 1, 3, 6, 12, 18, and 24 hr after left coronary artery ligation compared to intact and sham animals. However, this parameter was not significantly different at 3, 5, 7, 14, and 30 days after ligation compared to the other two groups. These results show that plasma ANP levels are markedly increased in the early phase of myocardial infarction in the male rat. In addition, plasma ANP level can be a useful biomarker for diagnosis in acute myocardial infarction. ANP는 여러 가지 다양한 심근 기능장애로 인한 질환과 연관성이 있으나 심근경색에서 ANP의 효과는 명학하게 기술되어 있지 않다. 따라서 이 연구는 왼쪽관상동맥을 결찰하여 실험적으로 유도시킨 흰쥐 심근경색 모델에서 ANP의 변화에 관한 연구를 시도하였다. 60일령의 수컷 SD 흰쥐를 이용하여 실험군, Sham 대조군, 정상대조군동물과 함께 각각 11개 그룹으로 나누고 실험군은 왼쪽관상동맥을 결찰하였고 Sham 대조군은 실험군과 수술과정은 유사하나 관 상동맥을 묶지 않았다. 대조군과 실험군은 왼쪽내림관상동맥을 결찰 후 1, 3, 6, 12, 18시간 후와 1, 3, 5, 7, 14, 30 일후에 대조군과 함께 희생시켰다. 심근경색 의 크기는 planimetry 와 perimetry로 측정하였고 혈장내 ANP 농도는 방사면역 측정법을 적용하여 측정하였다. 전 실험군에서 심근경색의 크기는 유의적인 차 이를 보이지 않았다. 혈장 ANP의 농도는 왼쪽관상동맥을 결찰한 후 1, 3, 6, 12, 18, 24 시간에 대조군에 비하여 유의적으로 증가하였으나 심근경색 후 3, 5, 7, 14, 30일에서는 실험군에서 대조군과 비교하여볼 때 유의적인 차이가 없었 다. 이러한 결과는 수컷 Rat에서 심근경색 후 ANP 농도는 초기에 명확하게 증 가함을 알 수 있었고 나아가 ANP 농도는 급성 심근경색에 진단에 있어서 유용 한 생물학적 지표로 이용할 수 있는 가능성을 제시하고 있다.

AHP 및 ANP기법을 이용한 물류거점 평가 모델 구축에 관한 연구

박현순 명지대학교 대학원 2013 국내석사

세계는 지금 물류의 전쟁을 치르고 있다. 다국적 기업의 등장과 글로벌 마인드의 정착, 또한 제품들의 품질이 평준화가 되면서 기업별 또는 공동화 된 물류 전략으로서 운송 능력 확보는 기업 뿐만 아니라 국가적인 이익을 가져다 주는 이슈로 자리 잡게 되었다. 물류라는 용어가 익숙하게 받아들여진지 오래 되었지만 우리나라는 무분별한 물류정책과 기업마다 표준화되지 않은 물류사업 진출로 정작 정확한 물류발전의 좌료를 규정하기에는 부족한 실적이다. 특히 보관분야에 있어서 물류센터, 물류거점, 창고 등의 입지선정이 단순한 부동산 투자 목적으로 전락하여 실제적인 물류기능 수행이 고려되어 있지 않기도 하다. 이에 보관분야에 물류거점 등의 입지선정에 대한 연구가 필요하다. 한편, 최근에는 정성적 정보를 활용하여 다양한 의사결정이나 순위를 결정하는 다기준분석법이 주목을 받고 있다. 그 대표적인 기법이 AHP기법과 ANP기법이다. 이 두 기법은 객관적 또는 정량적 평가요인 뿐만 아니라 주관적 평가요인도 수용할 수 있는 유연성과 복잡한 의사결정문제를 비교적 쉽게 접근할 수 있다는 장점으로 그 활용도가 늘어가고 있다. 본 연구는 물류거점 평가에 있어 주요 요인 간 상호작용에 의해 의사결정이 이루어진다는 관점을 기초로 하여 연구를 수행하였다. 이에 물류 업종 전문가들이 물류거점 평가시 고려하는 요인들이 무엇이고, 이들 요인들이 우선순위는 어떠한지를 AHP기법과 ANP기법을 비교, 분석하여 해당 기법들의 차별성을 검증하고자 연구를 진행하였다. 본 연구는 물류거점 평가를 위해 선행연구들의 내용을 바탕으로 평가에 필요한 요인을 도출하여 변수로 설정하고 물류에 종사하는 담당자와 전문가들의 설문을 통해 AHP와 ANP기법을 활용하여 각 요인들의 중요도 및 우선순위를 도출하여 물류거점 선정에 합리적 의사결정을 내리는데 도움이 되고자 한다. Logistics is an important topic in international trade and economy. Due to multinational companies, globalization, and product standardization, logistics strategies and capacities are emerging as an essential key to successful business for not only individual companies but also entire nations. In Korea, the term “logistics” has been used for a long time but it has not been thoroughly understood. It is also difficult to diagnose current issues in logistics and suggest improvements because of senseless logistics policies and business practices lacking standardization. In particular, the storage sector faces challenges since decisions over logistics centers and storage are more focused on their property investment value than actual logistics strategies. In light of this, there is a need for further study regarding effective logistics location for storage. In research methodologies, the Multi-Criteria Analysis (“MCA”) which uses multiple qualitative data gains attentions in decision making processes. The AHP and ANP methods are typical MCA. The two methods are widely used because they are applicable to not only objective/ quantitative factors but also subjective evaluation factors. They also provide easy approaches to complex decision making processes. This study was conducted based on the view that decisions regarding logistics center evaluation are related to the interaction of major factors. Pursuant to this, the researcher studied 1) factors that logistics specialists consider when they evaluate logistics centers and 2) analyzed and prioritized the factors through AHP and ANP methods. This study aims at helping to make rational decisions regarding logistics center locations. In the study, the researcher set variables from evaluation factors in existing research about logistics center evaluation. The researcher also questioned logistics professionals and prioritized the factors through AHP and ANP methods.