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      • 가토안에 삽입된 Ahmed방수유출장치에서 방수의 유출이 술 후 여과포의 조직화학적인 변화에 미치는 영향

        김영일 고신대학교 2002 국내박사

        RANK : 233263

        목적: 난치성 녹내장환자에 주로 사용되는 방수유출장치는 전방에 삽입된 실리콘관을 통해 방수가 유출되어 안구 적도부 후방에 위치한 본체에서 여과포를 형성하여 안압을 조절하게 된다, 이렇게 형성된 후여과포는 일반적인 성유주절제술 후 윤부에 형성되는 여과포와는 달리 결막이 두껍고 테논낭이 풍부한 안구 적도부 뒤쪽에 위치하며 방수유출장치의 본체와 테논낭 사이에 형성되는 점을 볼 때, 후여과포로의 지속적인 방수 유출이 여과포의 투과성, 여과포의 두께, 세포밀도, 섬유아세포의 증식정도에 어떠한 영향을 미치는가에 대해 알려진 바가 없다. 저자는 동물실험을 통해 후여과포로의 여러 가지 양상의 방수유출 모델을 만든 후 각각의 모델의 양상에 따른 후여과포의 조직학적 변화를 분석하여 방수의 유출이 후여과포의 투과성에 어떠한 영향을 주는지 알아보고자 하였다. 방법: 이전에 안약 및 수술을 시행한 적이 없는 정상적인 안구를 가진 약 1.5에서 2.5 Kg의 New Zealand산 백색의 가토 12마리를 각각 4마리씩 A, B, C 세군으로 나누어 한쪽안에 녹내장 여과장치의 일종인 Ahmed 방수유출장치(Model AGV-S1, New World Medical Co. USA) 녹내장 장치를 무균적으로 결막하에 수술로 삽입하였으며, A군은 Ahmed 방수유출장치의 본체를 테논낭 하에 삽입한 후 본체와 연결된 실리콘관을 전방내 삽입하지 않은 상태에서 8-0 vicryl로 결막을 연속 봉합하여 후여과포내로 방수의 유출이 없게 하였고, B군과 C군에서는 실리콘관은 전방내에 2-3 mm정도 유지되도록 전방내로 삽입하였다. C군은 전방과 본체사이의 공막에 노출되어 있는 실리콘관을 5-0 prolene과 항께 8-0 prolene으로 결찰하여 후여과포내로의 방수의 유출이 되지 않도록 하였지만 술 후 5-0 prolene을 제거할 경우 방수의 유출이 가능하게 하였으며, B군은 수술직후부터 정상적인 방수의 유출이 가능하게 하였다. 술 후에 항생제와 스테로이드 정안약을 1일 2회 점안하였으며, 추가로 안압약은 사용하지 않았다. 술 후 1주일간격으로 안압 및 전안부 검사와 후여과포 형성 및 안구상태를 관찰하여 감염 및 실리콘관의 위치 등을 검사하였다. 술 후 4주후 C군의 prolene을 제거하였으며 술 후 16주후에 방수유출장치에 의해 형성된 후여과포의 조직학적 소견을 알기 위해 A, B, C군의 가토를 희생시킨 후 안구적출을 시행하고 10% 포르말린용액에 24시간 보관 후 각 표본의 후여과포 부위를 절제하고 Hematoxylin & Eosin (H&E) 염색, 면역조직화학 염색 후 광학 현미경적인 조직소견, Collagen 염색소견, 전자현미경 소견을 관찰하였다. 결과: 술 전과 술 후의 안압을 비교하면, B군과 C군은 후여과포내 방수가 유입된 후 안압이 하강되었으며, 조직학적 소견에서 A군은 술 후 내벽의 교원질섬유의 증식과 외벽에서 염증세포와 혈관조직이 관찰되었으며, C군은 술 후 초기에는 B군보다는 내벽에서 교원질섬유의 구조가 더 조밀하였으나 술 후 16주에는 두군이 비슷한 후여과포의 조직양상을 보였다. B군과 C군은 A군에 비하여 염증세포 및 섬유모세포의 수가 감소하였고 교원질섬유층의 간격이 증가되며 미세낭포가 관찰되었다. 결론: 저자는 가토에 Ahmed 방수유출장치를 삽입 후, 방수의 유입 유무와 시기를 달리함에 따른 방수에 의한 후여과포의 변화를 알 수 있었다. 후여과포 내로 방수의 유출은 성유모세포의 증식을 억제하고 교원질섬유의 낭성구조 발생을 자극함을 알 수 있었다. Background: An Ahmed glaucoma valve for poor controlled glaucoma regulates intraocular pressure with a filtering bleb which is formed at the body of the posterior equator by the aqueous humor through the valve from anterior chamber. This posterior bleb locates posteriorly to the equator in which the conjunctiva and Tenon's layer are more abundant between the body of the valve and tenon's layer. There had been no report about the influence of aqueous humor to bleb, histologically; bleb filteration, thickness, cell density, proliferation of fibroblasts. Author studied the histologic changes of posterior filtering blebs on experimental models with rabbits. Materials & Methods: Ahmed glaucoma valve was implanted to normal 12 rabbits from 1.5 kg to 2.5 kg without previous operation history. Ahmed glaucoma valve (Model AGV-S1, New World Medical Co. USA) was implanted under the conjunctiva by operation with aseptic procedures. In 4 of 12 rabbits(group A), the tube of Ahmed glaucoma valve was not inserted into the anterior chamber. In other 4 rabbits, the conjunctiva was closed after the tube was inserted into the anterior chamber (group B). In another 4 rabbits, 5-0 prolene ligation was done around the Ahmed S1 implant tube, then tube was inserted in the anterior chamber. After 4 weeks, tube ligation was removed (group C). Histologcal specimens were obtained in each group at postoperative 16 weeks. Histologic findings of the dissected bleb were examined with light microscopy an electron microscopy after hematoxyline and eosin (H & E), collagen and immunopathologic stains. Results: Postoperative intraocular pressure(lOP) decreased in group B and C after some influx of aqueous humor into the bleb. In group A, histopathologically, proliferation of collagen fibers, inflammatory cells, and fibrous-vascular tissue were found and arranged coarsely. In group C, more dense collagen fibers were found than in group B at early postoperative period, but at 16 weeks, both groups showed similar histological structure. Inflammatory cells and fibroblasts were decreased and the gap between collagen fibers and microcysts were increased in group B and C at 16 weeks. Conclusion: We find that the histological changes of posterior bleb with Ahmed glaucoma valve implantation depend on the influx of aqueous humor and the time of influx. This study shows that aqueous humor inhibits cell proliferation, especially fibroblast, and contributes to microcystic change.

      • 각막신생혈관 생성 억제에 있어서 Bevacizumab 결막 하 주사와 안약점안 간의 비교

        김동윤 울산대학교 2010 국내석사

        RANK : 233263

        목적 : 쥐에서 실험적으로 각막신생혈관을 유발한 후 점안한 bevacizumab 과 결막하주사한 bevacizumab의 효과에 대해 비교 하였다. 대상과 방법 : Sprague-Dawley (SD) rat 40마리40안의 각막 중심부에 silver/potassium nitrate applicator 를 8초동안 접촉하여 화상을 일으키고 10마리씩 네 그룹으로 나누었다. A 군은 화상 유발 후 2일째부터 bevacizumab 12.5mg/ml 을 하루 3회 점안하였으며, B 군은 bevacizumab 12.5mg/ml 0.02cc 를 화상 유발 후 2일째, 4일째에 결막하 주사를 하였다. 음성대조군으로 생리식염수를 화상 유발 후 2일째부터 점안하였으며(C군) , 생리식염수 0.02cc (D군)를 화상 유발 후 2일째, 4일째에 결막하 주사하였다. 치료시작 1 주째, 2주째에 세극등에 부착된 카메라를 이용하여 각막의 영상을 얻었다. 얻어진 영상은 이미지 분석 프로그램을 이용하여 각막면적에 대한 신생혈관면적의 백분율(%)을 구하여 각각의 군과 대조군을 비교하였다. 결과 : 1주째에 전체각막면적에 대한 신생혈관면적 비율은 각 군간에 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 2주째 bevacizumab 을 점안한A군, bevacizumab을 주사한 B군, 생리식염수를 점안한C군, 생리식염수를 주사한 D군의 전체각막면적에 대한 신생혈관면적 비율은 각각 16.48±5.57%, 26.36±6.10%, 29.45±7.72%, 26.18±7.97% 였다. A 군이 다른 군들에 비해 통계적으로 유의하게 낮은 것으로 나타났다(Kruskal-Wallis test, p<0.05). 결론 : Bevacizumab 의 점안은 bevacizumab 의 결막하 주사보다 SD rat에서 각막의 화학손상에 의해 유발되는 각막신생혈관 형성을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다. Purpose: To compare the effect of subconjunctival injection of bevacizumab and topical bevacizumab on experimental corneal neovascularization in rats. Methods: Forty Sprague-Dawley(SD) rats were involved, divided equally into four groups. The corneal center of SD rats were cauterized with a silver/potassium nitrate applicator for 8 seconds. After cornea burn, bevacizumab(12.5mg/ml) was administered topically three times per day(Group A) and subconjuctivally on day 2 and 4 after cauterization(Group B). For Negative control saline was administered topically three times per day(Group C) and subconjuctivally on day 2 and 4 after cauterization(Group D). Digital photographs of the cornea were taken on 1 week and 2 weeks after treatment and analyzed to determine the area of cornea covered by neovascularization as a percentage of the total cornea area. Results: One week after treatment, the area of neovascularization at the cornea surface was not statistically different between groups. Two weeks after treatment, the area of neovascularization at the cornea surface was 16.48±5.57% in group A, 26.36±6.10% in group B, 29.45±7.72% in group C, 26.18±7.97% in group D. The neovascularized area in group A was significantly reduced than that of group B,C,D (p<0.05). There was no difference among group B, C, D (p>0.05). Conclusion: Topical Bevacizumab is more effective in inhibiting corneal neovascularization following chemical injury in the SD rat than subconjuctivally injected bevacizumab.

      • 섬유아세포에서 자외선 노출후 생성된 Inflammatory cytokines과 금속단백분해효소에 대한 Interleukin-4와 Interleukin-10의 억제효과

        김병래 翰林大學校 2003 국내박사

        RANK : 233263

        Currently, we receive a greater lifetime exposure to ultraviolet radiation due to increased UV reaching the earth's surface. Chronic exposure to UV irradiation is associated with severe external eye disease, squamous metaplasia and age related macular degeneration. This response to UV exposure appear to be mediated by the release of cytokines such as IL1, IL6, IL8 and tumor necrosis factor-α (TNF-α). On the other hand, IL4 and IL10 are known as immunomodulatory cytokines and expected to be potential therapeutic agents in certain inflammatory diseases due to their suppressive effects of inflammatory reaction. The purpose of this study is to evaluate the effects of IL4, IL10 on the expression of inflammatory cytokines and metalloproteinases in cultured normal human dermal fibroblasts following UVB (312 nm) irradiation. We examined the changes of the viability of the cultured normal human dermal fibroblast (NHDF) at 1, 3, 5 minutes following UVB irradiation. TNF-α and IL-1β mRNA expression from NHDF following UVB irradiation was determined by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and quantified by densitometer. MMP-1, MMP-3 concentration after UVB exposure was measured by ELISA. After the cells were treated with various concentrations of IL4, IL10, IL4 + IL10 (0.5-50 ng/ml) and irradiated with UVB for 5minutes, we examined the changes of TNF-α, IL-1β mRNA in NHDF and MMP-1, MMP-3 in culture media. There were no statistically significant changes of the cell viability at 1, 3, 5 minutes following UVB irradiation. TNF-α and IL1β expressions were up-regulated at 3 minutes and 5 minutes of UVB exposure. TNF-α and IL-1β expression was inhibited at all concentrations of IL4, IL10, IL4 + IL10 (0.5-50 ng/ml) which was treated before UVB irradiation. The inhibitory effects were decreased when the concentrations were increased. MMP-1 and MMP-3 production decreased significantly at all concentrations of IL4, IL10 and IL4 + IL10 in dose dependent manner. Furthermore, the maximal inhibitory effect was achieved at 50 ng/ml of IL4 + IL10. In conclusion, we proved that UVB is a potent inducer of inflammatory cytokines such as TNF-α and IL-1β. IL4 and IL10 down-regulated these cytokines, suppressed the production of MMP-1, MMP-3.

      • 당뇨 각막에서 신경성장인자의 항 세포자멸사 및 항 염증효과

        박진형 울산대학교 대학원 2015 국내박사

        RANK : 233263

        Purpose: To examine the effects of nerve growth factor (NGF) on apoptosis and inflammation in diabetic cornea using human corneal epithelial cells (HCECs) and streptozotocin-induced diabetic rat cornea. Methods: The effects of NGF on high glucose-induced apoptosis were investigated in HCECs using Annexin-V and PI staining, and cleaved caspase-3 and BAX expression levels. The effects of NGF on inflammatory response were examined using quantified IL-1β and TNF-α expression levels by multiplex cytokine analysis, and NF-kB activation and IkB-α degradation by western blot analysis. Diabetes was induced by intraperitoneal streptozotocin injection in male Sprague–Dawley (SD) rats. The SD rats were divided into 3 groups. (1) Control group (2) Diabetic control group (3) NGF group; Topical NGF were given 3 times a day for 3 weeks. Apoptosis was detected by TUNEL assay. The expressions of caspase-3 and IL-1 β were studied by immunohistochemistry in corneal tissues. Results: High glucose at 25 mM stimulated ROS generation, apoptosis, and release of inflammatory cytokines in HCECs. The addition of NGF markedly reduced the high glucose-induced ROS activation, Annexin-PI-positive cells, and levels of cleaved caspase-3, BAX, IL-1β, and TNF-α in HCECs. Enhanced apoptotic and inflammatory responses and expressions of cleaved caspase-3 and IL-1 β in the diabetic corneas of rat were observed. These responses were markedly reduced by NGF. Conclusions: Apoptosis and inflammation were enhanced in diabetic cornea and NGF contributed to reduction of apoptotic and inflammatory response in vivo and in vitro conditions. NGF may be a novel therapeutic approach for managing diabetic keratopathy.

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