A Two component signal transduction system required for the virulence of vibrio vulnificus

Jin, Yeon Soo Chonnam National Univ. Graduate School 2001 국내석사

Cloning and molecular biological characterization of norM gene for putative norfloxacin efflux protein in Vibrio vulnificus

Kim, Seol Chonnam National Univ. Graduate School 2001 국내석사

A Vibrio parahaemolyticus NorM (Vp-NorM) has been reported as the multidrug efflux protein to norfloxacin, ciprofloxacin, ethidium, streptomycin, and kanamycin. A Escherichia coli Y dhE (Ec-YdhE) has also been known as the gene for multidrug efflux protein to norfloxacin, ciprofloxacin, acriflavine and tetraphenylphosphonium ion. The Vp-NorM shows high sequence similarity with Vp-NorM, but two proteins differ somehow in substrate specificity. This study was aimed to examine whether the Vibrio vulnificus NorM (Vv-NorM) regulates the susceptibility of norfloxacin or not. The Vv-norM gene for putative norfloxacin efflux protein was cloned from the cosmid library of V. vulnificus ATCC 29307. The deduced primary structure of Vv-NorM showed 75% identity and 85% positive with that of the Vp-NorM and showed 50% identity and 69% positive with that of the Ec-YdhE. The Vv-norM null mutant of V. vulnificus MO6-24/O was constructed by allelic replacement using a positive selection suicide vector and showed similar susceptibility to norfloxacin compared with that of the wild type strain. A plasmid carrying the wild type Vv-norM gene was transformed in the cells of E. coli KAM3 lacking the major multidrug efflux system AcrAB. The transformant harboring plasmids also showed similar susceptibility to norfloxacin compared with that of the E. coli KAM3, when MICs were measured. These results suggest that norM gene in V vulnificus is not related to development of multidrug efflux protein to norfloxacin. A Vibrio parahaemolyticus NorM (Vp-NorM) has been reported as the multidrug efflux protein to norfloxacin, ciprofloxacin, ethidium, streptomycin, and kanamycin. A Escherichia coli Y dhE (Ec-YdhE) has also been known as the gene for multidrug efflux protein to norfloxacin, ciprofloxacin, acriflavine and tetraphenylphosphonium ion. The Vp-NorM shows high sequence similarity with Vp-NorM, but two proteins differ somehow in substrate specificity. This study was aimed to examine whether the Vibrio vulnificus NorM (Vv-NorM) regulates the susceptibility of norfloxacin or not. The Vv-norM gene for putative norfloxacin efflux protein was cloned from the cosmid library of V. vulnificus ATCC 29307. The deduced primary structure of Vv-NorM showed 75% identity and 85% positive with that of the Vp-NorM and showed 50% identity and 69% positive with that of the Ec-YdhE. The Vv-norM null mutant of V. vulnificus MO6-24/O was constructed by allelic replacement using a positive selection suicide vector and showed similar susceptibility to norfloxacin compared with that of the wild type strain. A plasmid carrying the wild type Vv-norM gene was transformed in the cells of E. coli KAM3 lacking the major multidrug efflux system AcrAB. The transformant harboring plasmids also showed similar susceptibility to norfloxacin compared with that of the E. coli KAM3, when MICs were measured. These results suggest that norM gene in V vulnificus is not related to development of multidrug efflux protein to norfloxacin.

A Two Component Signal Transduction System Required for the Virulence of Vibrio vulnificus

陳延洙 전남대학교 2001 국내석사

V.vulnificus는 연안해수에 서식하는 미생물로서 간질환 , 습관성 과음 , 기타 면역저하 등의 기저질환 있는 환자에서 기회감염을 일으킨다. 이 병원균은 감염 과정에서 급격한 환경변화를 접하게 되는데, 균의 입장에서 효과적인 감염을 위해서는 이와 같은 환경 변화를 신속히 파악하고 다양한 독력 인자의 발현을 적절하게 조절할 필요가 있다. 그람 음성균이 환경의 변화에 적절히 적응하여 생존하는데 있어 신호전달계가 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 이들 중 가장 대표적인 것이 two component signal transduction system 으로서 환경 변화를 감지하는 sensor 와 sensor 로부터 전달된 신호를 수용하여 하위 유전자들의 발현을 제어하는 response regulator로 구성되어 있다. 저자는 V. vulnificus genomic library 로부터 하나의 two component signal transduction system 유전자 군을 클로닝하고 염기서열을 결정하였으며, 이 부위가 독력 조절에 중요한 역할을 하는 단백질을 암호화하고 있음을 증명하였다. 저자가 새로이 명명한 vvgR 유전자는 sensor 단백질을 암호화하고 있고, 역방향으로 전사되는 VvgS 유전자는 response regulator를 암호화하고 있는 것으로 추정되었다. VvgS 단백질은 conserved domain 조사결과 tripartite hybrid sensor kinase 아 부류에 속하는 것으로 판단되며 , VvgR 단백질은 아미노 말단 부위에 receiver domain 을 가지고 있었다. Sensor vvgS 유전자를 돌연변이 시킨 결과, HeLa 세포주에 대한 세포독성이 현저히 감소하였다. 반면에 외독소인 hemolysin 과 protease 의 생성은 오히려 소폭 증가하는 경향을 나타내었다. 한편, HeLa 세포주에 대한 세포 부착능은 vvgS 돌연변이에 의해서 소폭 감소하였으나, V.vulnificus의 운동성은 돌연변이에 의한 영향을 받지않았다. 마우스 대한 치사능 실험에서, vvgS 돌연변이 균주는 정상 균주와 비교할 때 장관 감염 시에는 대략 83배, 복강을 통한 감염 시에는 9배 정도 LD_50 값의 증가를 보였다. 이러한 결과를 종합해 볼 때, VvgRS two-component system 은 V. vulnificus가 숙주에 감염되는 과정의 독력 인자 발현에 중요한 역할을 담당할 것으로 사료된다. V. vulnificus is an estuarine bacterium that opportunistically infects humans with underlying hepatic diseases, a heavy alcohol drinking habit, and other immunocompromised conditions. This microorganism experiences a very dramatic change in environmental parameters during the infection process. For successful infection, the pathogen should monitor its environment and coordinately regulate the expression of various virulence factors. In Gram-negative microorganisms, a number of signal transduction apparatus has been reported to be involved in cognate bacterial responses to environmental changes. Among them, one of the most well studied apparatus is the two-component signal transduction system that is composed of a sensor monitoring environmental parameters and a response regulator regulating multiple down stream genes. A locus in V vulnificus genome has been cloned and sequenced, which had similarities with the two-component signal transduction system. The locus proved to play an important role in regulating virulence. The locus encoded a putative sensor kinase, designated as vvgS, and a divergently transcribed putative response regulator, designated as vvgR. VvgS is predicted to be a protein belonging to the tripartite hybrid sensor kinase subfamily such as ArcB and BvgS. VvgR shows similarities to well known response regulators. An insertional mutation of vvgS in V. vulnificus led to a remarkable decrease of cytotoxicity to HeLa cells, while the production of exotoxins hemolysin and protease slightly increased by the vvgS mutation. Adhesion to HeLa cells only slightly decreased. However, the vvgS mutation had no effect on the motility of V. vulnificus. The vvgS mutation resulted in a significant decrease of lethality to mice. Intragastrical LD_50 to suckling mice was 83 fold higher than the isogenic wild type strain, while intraperitoneal LD_50 to adult mice was 9 fold higher. These results suggest that vvgS-two-component system should playa very important role in regulating virulence of V. vulnificus during the host infection process.

이성관계에서 안정애착이 갈등해결전략과 관계만족도에 미치는 영향 : 자기효과와 상대방효과

연수진 부산대학교 2013 국내석사

The purpose of this study is to investigate the effect of secure attachment on conflict resolution strategies and relationship satisfaction in romantic relationships. This study also applied the Actor-Partner Interdependence Model(APIM; Kenny, 1996) to analyze dyadic data. For this purpose, sample of 131 non-married adult couples in ongoing romantic relationships were asked to complete Revised Adult Attachment Sale(RAAS), Rahim Organizational Conflict Inventory(ROCI-Ⅱ), and Relationship Satisfaction Scale. Structural equation modeling is used. The result were as follows. First, there were gender difference in secure attachment, conflict resolution strategies and relationship satisfaction. Second, secure attachment for women positively affected their own conflict resolution, relationship satisfaction, and relationship satisfaction for men. Whereas secure attachment for men did not have an effect on conflict resolution strategies and relationship satisfaction. 본 연구는 이성관계에서 안정애착이 자신과 상대방의 갈등해결전략과 관계만족도에 미치는 영향을 자기-상대방 상호의존성 모델(Actor-Partner Interdependence Model: APIM)에 근거하여 검증하였다. APIM은 자신의 특성이 자신의 결과에 미치는 영향 뿐 아니라 상대방의 결과에 미치는 영향도 함께 분석할 수 있게 해주는 짝 자료 분석 방법으로 본 연구에서는 커플들의 갈등해결전략과 관계만족도에 미치는 안정애착의 효과를 살펴보았다. 연구대상은 이성관계를 맺고 있는 미혼의 성인 커플 131쌍이었다. 연구결과, 안정애착과 적응적 갈등해결전략, 관계만족도에서 모두 남자가 여자보다 높은 점수를 보였으며, 부적응적 갈등해결전략은 여자가 남자보다 더 많이 사용하는 것으로 나타났다. 구조방정식 모델링을 통한 APIM 분석 결과, 여자의 안정애착은 자신의 갈등해결전략과 관계만족도에 긍정적인 영향을 미쳤으며, 남자의 관계만족도에도 긍정적인 영향을 미쳤다. 또한 여자가 안정애착을 형성할수록 파트너인 남자가 부적응적 갈등해결전략을 덜 사용하는 경향을 보였다. 반면 남자는 갈등해결전략과 관계만족도에 있어 안정애착의 영향을 거의 받지 않는 것으로 나타났다.

(A) study of electrical, structural and optical characteristics of doped ZnO electrode for chalcopyrite solar cells

김진수 Graduate School, Korea University 2014 국내박사

Compound Cu-In-Ga-Se (CIGS) thin film solar cell is one of most promising sources for the demands on renewable energies, because of its outstanding energy conversion efficiency. The front electrode of CIGS solar cells are transparent conductive material. Transparent Conducting Oxide (TCO) thin films are generally used for transparent electrode. Sn-doped In2O3 (ITO) thin films are regarded as the representative of TCO due to its low resistivity (~1x10-4 Ωcm) and transparency (~85%) obtained easily in commercial fabrication. But ITO thin films show the best electrical and optical properties when they are deposited at elevated temperatures (250 ~ 300℃), and CIGS absorption layer damaged at high temperature over 250℃. From this reason, CIGS solar cells are using ZnO based transparent electrode such as Al, Ga, B and F doped ZnO as their window electrode. First, the optical properties of the impurity doped ZnO thin films were analyzed by taking into account for the non-parabolicity in the conduction band. The Drude parameters and the optical band gap shift were analyzed by using the carrier density dependent effective mass determined by the first-order non-parabolicity approximation. The Drude parameters were obtained by applying simple Drude model combined with Lorentz oscillator model for the optical transmittance and reflectance spectrum. The correlation between the optical and Hall analyses were examined by taking the ratios of carrier density, mobility and the resistivity of optical to Hall measurements and by introducing a parameter which represent the ratio of the resistances to electron transport from the inside of the lattice and from the crystallographic defects. Also, it was shown that the measured shifts in optical band gaps could be well represented by theoretical estimation in which the band- gap widening due to band-filling effect and the band gap renormalization due to many-body effect derived for a weakly interacting electron-gas model were combined and the carrier density dependent effective mass was incorporated. ZTO films are known to be feasible to form amorphous phase, which provides a smooth surface morphology as well as etched side wall, when deposited by conventional sputtering technique, and therefore have a potential to be applied for the transparent thin film transistors. ZTO thin films were prepared by combinatorial sputtering of ZnO and SnO2 targets, and the dependence of their electrical and optical properties on the composition and deposition parameters was examined. The Sn content in the films varied in the range of 35 ~ 85 at.%. Deposition was carried out at room temperature, 150 and 300 oC, and the oxygen content in sputtering gas varied from 0 to 1 vol.%. Sn-rich films had better electrical properties, but showed large oxygen deficiency when deposited at low oxygen partial pressure. ZTO films with Sn content lower than 55 at.% had good optical transmission, but the electrical properties were poor due to very low carrier concentration. High Hall mobility of larger than 10 cm2/Vs could be obtained in carrier density range 1017~ 1020 cm-3, and etching rate was measurable for film with Sn content up to 70 at.% by suing a diluted HCl solution, indicating that there is a good possibility of utilizing ZTO films for device application. Ga-doped ZnO (GZO) thin films for CIGS solar cell application were fabricated on the buffer window layer made of intrinsic ZnO (i-ZnO) or Zn-Sn-O (ZTO) thin films which were pre-formed on glass substrates, and the effect of buffer layer on the electrical and structural properties of GZO films was investigated by making direct comparison with the GZO films grown on the bare glass substrate in the same batch. GZO films, which showed good crystallinity and electrical properties when deposited on the bare glass substrate, exhibited deteriorated crystallinity when deposited on the buffer i-ZnO layer, especially at deposition temperature of 150oC. The deteriorated electrical properties of the GZO films grown on the buffer i-ZnO layer at 150oC were found to be closely related with the poor crystallinity which was affected by the poor crystallinity of i-ZnO buffer layer. GZO films formed on amorphous ZTO layers gave comparable crystallinity and electrical properties with those grown on the bare glass substrates, indicating ZTO film as a possible alternative buffer layer for CIGS solar cells.

한국문화교육에서의 TV드라마 활용 방안 연구 : 여성결혼이민자를 대상으로

김수연 忠南大學校 大學院 2013 국내석사

Many studies on cultural education in the field of Korean education as a foreign language have been conducted to date. However, most of them have addressed cultural education as auxiliary to Korean language education or have been limited to certain cultural spheres such as everyday culture. Nevertheless, in the case of immigrant wives living in South Korea, they may experience difficulty in everyday life if they do not receive education on all cultural spheres, to which they are exposed. With education, the method, or “how” to teach, is as important as the contents, or “what” to teach. This is because even when meaningful contents are taught, if they are not properly conveyed to learners, the effectiveness of education will decrease. Consequently, the purpose of the present study lies in exploring cultural education methods using TV dramas, which are media capable of arousing learners’ interest and helping their understanding through the employment of diverse senses, and confirming the possibility of realizing this in actual Korean culture classes. I elucidated the purpose of the present study and reviewed earlier studies on Korean cultural education targeting immigrant wives and Korean cultural education using TV dramas. According to the results, there were insufficient studies addressing all spheres of Korean culture, and studies on Korean cultural education using TV dramas left something to be desired because they mostly relied on the researchers’ intuition instead of reflecting learners’ demands. II established linguistic culture, spiritual culture, artistic culture, everyday culture, institutional culture, and historical culture as the cultural spheres to be addressed in Korean cultural education and examined whether education on all six cultural spheres was currently implemented in classes. According to the results, while education on all cultural spheres was implemented, not all cultural categories under each cultural sphere were addressed. In addition, according to the results of investigations on learners, learners continued to experience difficulty with cultural categories on which education had already been provided. To resolve such problems, learners in the Korean language classes offered by the Education Total Support Center for Daejeon Immigrant Woman’s Rights were surveyed to reflect their demands. III examined the educational utility value of TV dramas to use them in Korean cultural education and explored how TV dramas were used in actual education. The results led to the conclusion that Korean culture classes conducted using TV dramas as classroom media could be constructed effectively because they can properly reflect the strengths and educational value of TV dramas. Based on the educational value and the results of investigations on learners’ demands, five criteria for selecting TV dramas were established. Based on them, the TV drama My Husband Got a Family (Neongkuljjae Gulleoon Dangsin) was selected. IV designed a model of classes using TV dramas <Table 4-5> to explore the actuality of classes using the TV drama My Husband Got a Family. <Table4-5> was constructed thus : 'introductory stage' ? 'developmental stage (pre-viewing stage ? viewing stage ? post-viewing stage)' ? 'organizational stage'. It analyzed the cultural spheres of the TV drama My Husband Got a Family and, out of these spheres, analyzed cultural categories deemed to be educationally valuable in terms of the six cultural spheres of linguistic culture, spiritual culture, artistic culture, everyday culture, institutional culture, and historical culture. By using the class model using TV dramas and the cultural spheres evident in the TV drama My Husband Got a Family, six plans for Korean cultural education were presented. The present study has the strength of having designed plans for education on all spheres of Korean culture in reflection of learners’ demands and designed and presented a class model for Korean cultural education. However, because verification through actual classes did not occur, it was not possible to analyze the results in terms of their effect and problems. Consequently, follow-up research that verifies the tenets and findings of the present study through actual classes is necessary.

대기업 사무직 근로자의 주관적 경력성공과 지속학습활동, 경력정체성 및 경력적응성, 프로티언 경력지향성간의 구조적 관계

신수진 고려대학교 대학원 2016 국내박사

본 연구는 대기업 사무직 근로자의 주관적 경력성공과 지속학습활동, 경력정체성 및 경력적응성, 프로티언 경력지향성간의 구조적 관계를 구명하고, 주관적 경력성공에 이르는 변인들 간의 관계에서 경력개발지원의 조절효과를 구명하는 것을 연구 목적으로 하였다. 이를 통해 개인의 경력 목표 달성과 동시에 조직의 성과 향상을 위해 조직이 집중해야 하는 요인이 무엇인지에 대한 방향성을 제공하는데 초점을 두었다. 이를 위해 첫째, 지속학습활동, 경력정체성 및 경력적응성, 프로티언 경력지향성과 주관적 경력성공에 이르는 순차적 과정에 대한 모형 및 이들 관계에서의 다양한 경로에 대한 모형이 적합한지 살펴보았다. 둘째, 지속학습활동, 경력정체성 및 경력적응성, 프로티언 경력지향성과 주관적 경력성공의 관계에서 변인간 직접효과에 대해 알아보았다. 셋째, 지속학습활동, 경력정체성과 경력적응성 및 프로티언 경력지향성과 주관적 경력성공의 관계에서 변인간 매개효과를 확인하였다. 넷째, 경력개발 모형의 각 변인간의 관계에 있어 조직의 경력개발지원이 조절효과를 나타내는지 살펴보았다. 본 연구의 모집단은 경력 3년 이상의 국내 대기업 사무직 근로자 전체이나, 현실적으로 모든 대기업 사무직 근로자를 대상으로 조사하는 것은 불가능하므로, 제조업 상위 20개 기업에서 종사하는 경력 3년 이상의 사무직 근로자를 본 연구의 목표 모집단으로 설정하였다. 조사도구의 신뢰도와 타당도 검증을 위해 전문가를 통한 내용타당도 검증 및 목표 모집단 내 3개 기업의 108명을 대상으로 예비조사를 실시하였다. 본조사에 대한 자료 수집은 2016년 4월 1일부터 4월 20일까지 제조업 상위 20개 기업 중 15개 기업에 600부를 배포하여 총 453부가 회수되었다(회수율 75.5%). 이 중에서 불성실 응답 및 이상치로 판정된 자료를 제외하고 총 432부가 분석에 사용되었다. 자료 분석은 SPSS WIN 23.0과 AMOS 23.0 통계 패키지 프로그램을 사용하여 빈도, 백분율, 평균, 표준편차와 같은 기술통계와 연구모형 검증 및 변인 간 관계 분석을 위한 구조방정식 모형 분석을 실시하였다. 주요 연구 결과로는 첫째, 경력개발에 대한 Hall의 기존 모형인 순차적 모형(완전매개모형)과 본 연구에서의 제안 모형(부분매개모형)을 경쟁모형으로 설정하여 모형의 적합도를 평가한 결과, 본 연구에서 제시한 모형이 보다 적합한 것으로 나타났다. 둘째, 변인간의 직접효과를 검증한 결과, 지속학습활동은 경력정체성과 경력적응성에 유의한 정적 영향을 미치는 것으로 나타났다. 또한 경력정체성과 경력적응성 모두 프로티언 경력지향성에 통계적으로 유의미한 영향을 주는 것으로 나타났다. 주관적 경력성공에 영향을 미치는 변인들 중에는 지속학습활동과 경력적응성, 프로티언 경력지향성이 직접적으로 영향을 미치는 것으로 나타났다. 그러나 지속학습활동과 프로티언 경력지향성의 관계 및 경력정체성과 주관적 경력성공의 관계는 통계적으로 유의하지 않은 것으로 나타났다. 셋째, 지속학습활동과 주관적 경력성공의 관계에서 경력정체성 및 경력적응성, 그리고 프로티언 경력지향성의 매개효과를 검증하였다. 연구 결과, 지속학습활동과 프로티언 경력지향성의 관계에서 경력정체성과 경력적응성이 완전매개효과를 지니는 것으로 나타났다. 또한 지속학습활동과 주관적 경력성공의 관계에서 경력적응성은 매개효과를 가지나, 경력정체성은 매개효과가 없는 것으로 나타났다. 마지막으로, 지속학습활동과 주관적 경력성공의 관계에서 경력정체성과 경력적응성 및 프로티언 경력지향성의 2차 매개효과를 분석한 결과, 경력적응성 및 프로티언 경력지향성은 2차 매개효과를 가지나, 경력정체성 및 프로티언 경력지향성의 2차 매개효과는 없는 것으로 나타났다. 넷째, 주관적 경력성공의 선행 변인인 지속학습활동, 경력정체성 및 경력적응성, 그리고 프로티언 경력지향성과 주관적 경력성공의 관계, 그리고 지속학습활동과 경력정체성 및 경력적응성의 관계에서의 경력개발지원의 조절효과를 알아보기 위해 다집단 분석을 실시하였다. 분석 결과, 지속학습활동과 경력정체성, 그리고 지속학습활동과 경력적응성의 관계에서 경력개발지원 인식에 따른 조절효과가 있는 것으로 나타났다. 본 연구에서는 기존에 이론적, 단편적으로만 논의되어왔던 경력개발 모형의 전 과정을 실증적으로 검증하였을 뿐만 아니라, 기존 이론에서 주장했던 주관적 경력성공을 위한 선행 조건들의 순차적 과정보다 다양한 경로로 이루어진 모형이 더 적합함을 밝혀 기존 이론적 모형을 개선하였다는데 의의가 있다. 또한 개인 차원의 요소들로 이루어진 경력개발 과정에서 조직 차원 요소인 경력개발지원의 효과를 확인함으로써 조직이 구성원의 경력개발을 위해 어느 부분에 보다 집중해야하는지를 밝혀냈다는 점에서 가치가 있다. 본 연구를 통해 개인의 경력개발 및 주관적 경력성공을 위해 가장 우선시되어야 하는 요소는 다양한 형태의 지속적 학습활동임이 밝혀졌다. 이에 조직 차원에서도 구성원들의 지속적 학습활동을 지원하기 위해 개인의 특성과 경력 목표를 고려한 다양한 제도 및 프로그램들이 요구되고 있으며, 이는 궁극적으로 구성원들의 조직몰입 증대 및 조직 목표 달성에 기여할 것으로 기대된다.