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      • Preparation and Characterization of PEGylated TRAIL for Improved Biological Potency via Introtumoral Route

        조수경 성균관대학교 2007 국내석사

        RANK : 1839

        TRAIL/Apo2L is a novel cytokine since it induces apoptosis in a number of tumor cells without affecting normal cells. The cancer-directed, apoptotic potential of TRAIL makes it a promising candidate for therapeutic interventions. TRAIL itself, however, is inactivated rapidly in vivo and thus does not appear to be useful as a therapeutic agent in the long-term treatment. To solve this problem, we suggest the local injection of PEG modified TRAIL at its N-terminus as a cancer therapy, which is able to enhance the biological activity by reducing renal ultrafiltrayion, preventing the approach of antibodies or antigen processing cells and reducing the enzymatic degradation. As systemic delivery of therapeutic agent to tumor is limited because of the physiologic barriers, local drug delivery is more useful for cancer therapy. In the present study, we report here that the administration of TRAIL and PEG modified TRAIL. TRAIL and PEG modified TRAIL resulted in remarkable concentration-dependent cytotoxicity in human head and neck cancer cell. In regard to the side effect, both of two drugs showed no cytotoxicity against the normal epitherial cell compared with human head and neck cancer cell. Consequently, effective antitumor activity by PEG modified TRAIL can be accomplished without any apparent toxicity to normal tissues and organs. In addition, the tumor growth was significantly suppressed in balb/c nude mice intratumorally administered PEG-TRAIL versus TRAIL. The study demonstrates that polyethylene glycol (PEG) can be a useful chemical enhancer to increase intatumoral bioavailability of protein treatments like TRAIL. Tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis inducing ligand (TRAIL)은 종양세포에 대한 선택적인 세포사멸작용으로 인해 매력적인 항암치료제로 각광을 받고 있다. 그러나, TRAIL은 생체 내에서 빠르게 그 활성이 감소되기 때문에 Long-term 치료제로서의 단점을 가지고 있다. 이러한 문제점을 극복하기 위해, N 말단 PEG 접합 TRAIL의 종양 내 투여를 모색하였다. PEG 접합을 통하여 신배설을 감소시키고 항체의 접근을 막으며, 효소적 분해를 감소시켜 생체활성을 증가시킬 수 있다. 또한 약물의 전신순환적 전달은 다양한 신체상 장벽에 의해 극히 제한될 수 있으므로 국소 전달은 항암치료에 매우 유용하다. 본 연구에서는 TRAIL과 PEG 접합 TRAIL의 투여를 보고하였다. TRAIL과 PEG 접합 TRAIL은 구경부암 세포에 뚜렷한 농도 의존적 세포독성을 나타내었다. 항암 약물의 부작용을 고려해보았을 때, 두 약물은 정상 상피세포에서 세포독성을 나타내지 않았다. 따라서, TRAIL과 PEG 접합 TRAIL은 생체 내 정상 조직과 기관에 뚜렷한 독성을 나타내지 않는 효과적인 항암제라고 할 수 있다. 또한, PEG 접합 TRAIL은 balb/c 누드 마우스에 종양 내 투여를 실시하였을 때 TRAIL에 비해 더 증가된 암 성장 억제를 보였다. 이 연구에서는 TRAIL과 같은 단백질 약물의 PEG 접합을 통한 제형화가 약물 국소 전달을 위한 유용한 방법이 될 수 있음을 제시하고 있다.

      • In vitro antimicrobial activity and mode of action of erythorbyl laurate, a novel antimicrobial agent, against Staphylococcus aureus

        조수경 서울대학교 대학원 2014 국내석사

        RANK : 1839

        Abstract Based on the results of susceptibility screening (spot-on-lawn assay) and bactericidal activity, it was found that erythorbyl laurate (6-O-lauroyl-erythorbic acid) had effect on gram positive bacteria. For evaluating antimicrobial activity of erythorbyl laurate against gram positive bacteria, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) were assessed by broth micro-dilution method. With sub-MICs of erythorbyl laurate, gram positive bacteria showed increased lag time (Δλ) and decreased maximum specific growth rate (μmax) compared to control without erythorbyl laurate treatment. S. aureus showed maximum crystal violet uptakes at 1.2-1.6 mM of erythorbyl laurate. Samples treated with positive control, nisin (40 mg/mL), of which mechanism was induction of pore formation on membranes increased permeability similar to maximum crystal violet uptake levels of each bacteria samples treated with erythorbyl laurate. Exposure of S. aureus to erythorbyl laurate at various concentrations showed altered cytoplasmic membrane rupture, and these were assessed by using the Live/Dead BacLight viability kit. Relative live percentage of Staphylococcus aureus reached 0% below 1.6 mM erythorbyl laurate. Morphological analysis was performed by EF-TEM, and inhibitory and bactericidal concentrations indicated that erythorbyl laurate addition caused dissolution of the cytoplasmic space, significant roughing of the membrane, and cytoplasmic convolution. In combination with other antimicrobial agents, nisin, kanamycin, and erythromycin showed great synergistic effect with erythorbyl laurate with 0.281, 0.256, and 0.266 of fractional inhibitory concentration (FIC) index, respectively. Transcriptional changes of S. aureus treated with erythorbyl laurate showed significantly different patterns compared to those of sample without erythorbyl laurate treatment, including genes related with amino acid synthesis, cell envelope, protein function, cellular processes, regulatory function, and signal transduction. Erythorbic acid는 L-ascorbic acid의 이성질체로서 항산화제로 흔히 쓰이며, 상대적으로 L-ascorbic acid에 비하여 경제적인 측면을 가지고 있다. 이러한 이유로 선행연구에서는 erythorbic acid와 항균성을 가지는 중쇄 지방산인 lauric acid를 기질로서 lipase에 의한 esterification을 통하여 erythorbyl laurate를 합성하였고, 이로 인해 항산화성과 항균성을 동시에 지닌 유화제로 사용할 수 있게 되었다. 현재 erythorbyl laurate의 기능성을 분석하여 이를 산업에 이용하고자 다양한 연구가 수행되고 있다. 본 연구는 erythorbyl laurate의 항균성 메커니즘을 규명하고자 다양한 생리화학적 실험법과 전사 분석을 위한 RNA-Seq 기법을 이용하여 대표적인 유해 미생물 중 하나인 Staphylococcus aureus에 대한 erythorbyl laurate의 효과를 검증하였다. Erythorbyl laurate는 그람 양성균에 특이적으로 효과를 보였고, 처리한 erythorbyl laurate의 농도가 증가할수록 유도기(Δλ)는 증가하고 최대비성장률(μmax)은 감소하는 경향을 보였다. Crystal violet과 SYTO 9, propidium iodide를 이용한 실험에서는 erythorbyl laurate에 의한 세포막 손상으로 인해 막 투과성이 변한다는 것을 확인하였다. 형광 현미경과 EF-TEM을 이용하여 이에 대한 형태학적 분석을 수행한 결과, erythorbyl laurate로 인해 세포 내 물질의 방출과 세포 표면의 손상 등의 물리적인 변화가 일어남을 관찰할 수 있었다. 또한 다양한 항균제와의 상승효과에 관해 연구한 결과, erythorbyl laurate는 nisin, kanamycin, erythromycin과 뛰어난 상승효과를 보였다. RNA-Seq 기법을 이용한 전사체 분석에서는 아미노산 합성, 단백질 기능, 세포막과 세포벽의 합성, 신호전달체계와 같은 다양한 세포 내 대사에 관여하는 유전자의 발현 차이를 관찰할 수 있었다. 이러한 결과를 바탕으로 erythorbyl laurate가 세포벽에 자극을 주고 세포막의 손상을 일으키며, 이로 인해 균체의 다양한 대사체계가 영향을 받는다는 것을 알 수 있었다. 본 연구는 효소적 합성을 통해 생산된 erythorbyl laurate를 다기능성 식품첨가물로서 산업에 적용하기 위한 기초 연구로, erythorbyl laurate의 항균력을 검증하고 메커니즘을 밝힘으로써 식품뿐만 아니라 그람 양성균을 제어할 필요가 있는 다양한 분야에서 활용될 수 있는 가능성을 제시하는 것에 의의가 있다.

      • 아동기 외상 경험과 AMPD의 성격 기능 손상 수준(기준A)의 관계 : 특성 5요인과 부적응적 성격 기제 (기준B)의 다중병렬매개효과

        조수경 이화여자대학교 대학원 2024 국내석사

        RANK : 1839

        The purpose of this study is to examine the multiple-parallel mediation effects of the Big Five personality traits and the five domains of maladaptive personality traits in the relationship between childhood trauma experiences and the impairment of personality functioning. For this purpose, an online self-report survey was conducted with 700 adults aged 20 and older, using four scales to measure childhood trauma experiences, impairment of personality functioning, the Big Five personality traits, and maladaptive personality traits. The collected data was analyzed using SPSS 23.0 and model 4 of SPSS PROCESS Macro program. The results of this study are as follows: First, childhood trauma experiences had a positive effect on the impairment of personality functioning. That is, childhood trauma experiences were a significant predictor of the impairment of personality functioning, and the more childhood trauma experiences, the greater the impairment of personality functioning. Second, among the Big Five personality traits, Agreeableness, Conscientiousness, Extraversion, and Neuroticism mediated the relationship between childhood trauma experiences and the impairment of personality functioning. Openness had no mediation effects. Third, among the five domains of maladaptive personality traits, Disinhibition, Detachment, and Negative affectivity mediated the relationship between childhood trauma experiences and the impairment of personality functioning. Antagonism and psychoticism did not mediate the relationship between trauma experiences and the impairment of personality functioning. These findings help to understand the influence of the Big Five personality traits and maladaptive personality traits in the relationship between childhood trauma experiences and the impairment of personality functioning. The results of this study are expected to provide important insights into understanding the underlying structure of how childhood trauma experiences affect the level of impairment in personality functioning. 본 연구의 목적은 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준 간의 관계에서 특성 5요인과 부적응적 성격 기제의 5가지 영역을 매개변인으로 하여 다중병렬매개효과를 검정하는 것이다. 최근 아동기 외상 경험이 성격장애에 미치는 영향에 대한 관심이 높아지면서 관련 연구가 활발히 진행되고 있다. 성격장애 진단을 위해 DSM-5 진단기준이 현재 가장 많이 사용되고 있으나, 이러한 범주적 분류체계에 대한 한계와 비판점이 증가함에 따라 성격장애에 대한 대안적 모델(AMPD)이 주목을 받고 있다. AMPD는 특성 5요인(Big Five personality traits)과 마찬가지로 연속선상에서 적응과 손상의 정도에 따라 성격장애를 차원적으로 개념화하며, 성격 기능 수준(기준 A)과 부적응적 성격 기제(기준 B)로 나누어 평가한다. 기준 A, 성격 기능 손상 수준은 자아(정체성 및 자기주도성)와 대인관계(공감 및 친밀감) 영역으로 구성된다. 기준 B, 부적응적 성격 기제는 적대성(Antagonism), 애착상실 (Detachment), 탈억제(Disinhibition), 부정적 정서성(Negative affect), 정신병적 경향성(Psychoticism)의 5가지 영역으로 이루어져 있다. 부적응적 성격 기제는 특성 5요인의 변형을 통해 병리적 특성에 초점을 맞춘 개념이다. 부적응적 성격 기제의 5가지 영역과 특성 5요인은 개념적 유사성을 가지고 있는데, 본 연구에서는 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준간의 관계에서 특성 5요인과 부적응적 성격 기제의 다중병렬매개효과를 각각 확인함으로써 어떠한 차이가 있는지 살펴보고자 한다. 본 연구는 만 19세 이상의 성인남녀를 대상으로 하였다. 아동기 외상 경험, 특성 5요인, 부적응적 성격 기제, 성격 기능 손상 수준을 측정하는 4가지 척도를 사용하여 온라인 자기보고식 설문을 실시하였다. 수집된 총 700명의 응답 자료는 SPSS 23.0을 사용하여 기술통계 및 상관분석을 실행하였고 SPSS Process Macro를 통해 연구모형을 검증하였다. 본 연구의 주요결과는 다음과 같다. 첫째, 아동기 외상 경험은 성격 기능 손상 수준에 정적인 영향을 미쳤다. 즉, 성격 기능 손상 수준에 아동기 외상 경험이 유의한 예측 요인으로 나타났으며 아동기 외상 경험이 많을수록 성격 기능 손상 수준이 증가했다. 둘째, 특성 5요인의 친화성, 성실성, 외향성, 신경증이 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준의 관계를 매개하는 것으로 나타났다. 개방성은 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준 사이에서 매개효과를 나타내지 않았다. 셋째, 부적응적 성격 기제의 5가지 영역 중 탈억제, 애착상실, 부정적 정서성이 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준 간의 관계를 매개하는 것으로 나타났다. 적대성과 정신병적 경향성은 외상 경험과 성격 기능 손상 수준 사이에서 매개효과를 나타내지 않았다. 본 연구는 최근 주목받고 있는 성격장애에 대한 대안적 모델(AMPD) 연구를 내국인을 대상으로 수행했으며 부적응적 성격 기제와 성격 기능 손상 수준을 함께 살펴보았다는 점에 의의가 있다. 또한, 아동기 외상 경험과 성격 기능 손상 수준 간의 관계에서 특성 5요인과 부적응적 성격 기제가 어떤 영향을 주는지 확인할 수 있었다. 본 연구결과가 아동기 외상 경험이 성격 기능의 손상 수준에 영향을 미치는 과정 이면의 구조를 더 깊이 이해하는 데 중요한 통찰을 제공할 것으로 기대한다.

      • Disparities in Exposure to Secondhand smoke in Seoul

        조수경 서울대학교 보건대학원 2013 국내석사

        RANK : 1839

        Introduction: A lot of studies have shown that Secondhand Smoke(SHS) causes respiratory problems; in addition, several researchers suggested that exposure to SHS at home brings more serious health-risks than exposure to SHS elsewhere. SHS is a problem that requires social regulation to control the start of smoking and to protect non-smokers from nicotine. According to a Korean community health survey in 2011, the prevalence of exposure to secondhand smoke at home was 7.4% in Gangseo-gu and 16.4% in Seongbuk-gu. There is a significant gap of exposure rate among administrative districts. The differences might be caused from socioeconomic factors or other geographic factors. The purpose of this study was (1) to identify the socioeconomic differences in the proportion of subjects exposed to SHS and those not exposed to SHS and (2) to examine the extent of demographic and geographic disparities in exposure to SHS Methods: The data for this study came from 2011 Korean community health survey(KCHS). The study sample consisted of 164 male and 1,627 female who answered never smoked. The dependent variable was experience of exposure to second hand smoke. And independent variables were divided into two groups: individual socio-demographic features and area-level factors. Using the statistical program SAS version 9.3, logistic regression analysis and multilevel analysis were performed to find the differences in socioeconomic status. Results: According to KCHS data, 12 percent of non-smokers were exposed to SHS at home, and women exposed to SHS 10 times more than men. The result of multivariable logistic regression presents that women in 2nd quartile household income level (2nd poorest) were more likely exposed to SHS than women in the wealthiest household income level (OR=1.29, 95% CI= 1.10-1.50). The prevalence rate of SHS in low educational group was higher than prevalence rate in upper groups. Single men and women were more exposed to SHS after adjusting other explanatory variables. Members in household composition with 2 -3 generations was more likely exposed to SHS than any other group in both men and women. There were intercept variances of community level, and smoking prevalence of the districts was significantly associated with SHS exposure. Conclusion: Considerable disparities exist in exposure to SHS. Women with low SES were more vulnerable to SHS than men. Low SES adults may have limited capacity to manage their exposure to SHS. Especially, Women in low SES may experience little benefit from SHS policies. The contextual effect existed. Therefore, considering the factors of area, intervention strategies for health promotion should be planned by targeting on vulnerable people.

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