반면형 방진마스크의 누출부위 분포조사

허지연 가톨릭대학교 대학원 1994 국내석사

제대혈 유래 CD34 양성세포로부터 적혈구 분화유도와 microarray를 이용한 유전자 발현변화 분석

김창기 연세대학교 대학원 2005 국내석사

RBCs are produced by erythropoiesis in the bone marrow with a help of erythropoietin (EPO), which is a key factor for RBCs production. For Ex vivo generation of RBCs, a lot of studies used sequential culture protocols, which were consisted of the expansion period without EPO and the differentiation period with EPO. In this study, we have tried to generate RBC from CD34+ cells in cord blood using 3 steps culture protocol and also evaluated the changes in immunophenotypic characteristics and genetic profiles according to EPO concentration and culture duration.Using mini-MACS columns, CD34+ cells were isolated from cord blood. The culture procedure comprised three steps. For each step, cells were cultured sequentially for 7 days in a serum free liquid medium with specific combinations of growth factors for 21 days. [1st step: Flt3-ligand (Flt3-L), thormbopoietin (TPO) and stem cell factor (SCF); 2nd step: IGF-1, SCF, EPO; 3rd step: IGF-1, EPO] To evaluate the EPO effect on proliferation and differentiation, cells were cultured with three different EPO concentrations (0, 3, 10 & 20 UmL). Cell count and morphology were monitored during this period. For phenotyping, antibodies to CD34, CD38, CD45 and glycophorin A (GPA) were used and phenotype analyses were performed on an EPICS XL. The genetic profile of cultured cells was analyzed by 17,000-gene microarray analysis.As erythropoietin concentration increased, cell expansion was also increased, showing a maximum expansion at 20 Uml (233-fold amplification). The cell population showed a gradual decrease in expression of CD34 and CD45 whereas the expression of GPA was not prominent in any conditions (less than 3%). Through the SAM (significant analysis of microarray), 125 genes that showed significant results were selected. When we analyzed genes associated with erythropoiesis, we observed increased expression in glycophorin A, rhesus blood group, CcEe antigens, erythrocyte membrane protein band 4.2 and erythropoietin receptor gene as cultures progressed.Our study shows that erythropoietin enhance a proliferation of hematopoietic progenitor cells as well as a differentiation to erythroid lineage. Our culture system did not achieve pure production of RBCs, but induced genetic changes that indicated erythroid differentiation. 적혈구는 골수의 조혈모세포에서 여러 단계를 거쳐 생성되며, erythropoietin (EPO)은 적혈구 생성에서 가장 중요한 성장인자로 알려져 있다. 대부분의 적혈구 분화를 위한 시험관내 배양은 EPO를 첨가하지 않고 조혈모세포의 증식을 촉진하는 단계와 EPO의 자극을 통해 적혈구 분화를 유도하는 단계로 구성된다. 따라서 본 연구에서는 제대혈 유래 조혈모세포로부터 적혈구로 분화시키는 과정에서 EPO를 첨가하는 시기와 농도를 달리하여 첨가하는 방법을 통해 RBC 분화에 미치는 EPO의 효과를 평가하였으며, 연구의 최종목표는 제대혈 유래 CD34 양성 세포로부터 적혈구 분화를 유도하고자 하였다.건강한 산모의 제대혈에서 Ficoll-Hypaque 및 MACS system을 이용하여 CD34 양성세포를 분리하였으며, 배양은 여러 성장인자의 조합을 달리하여 세 단계로 총 21일간 진행하였다. 배양 첫 1주간은 stem cell factor, Flt-3 ligand, thrombopoietin을 첨가한 배지에서 CD34 양성세포의 증폭을 유도하였으며, EPO는 배양 8일부터 21까지 3 UmL의 농도로 첨가하였다. 또한 EPO의 농도에 따른 효과를 알아보기 위하여 배양 초기부터 EPO를 0, 3, 10 그리고 20 UmL의 농도로 첨가하여 배양을 진행하였다. 배양기간 동안 세포의 수와 형태를 관찰하였고 유세포분석기를 이용하여 CD34, CD38, CD45, glycophorin A (GPA)의 표현변화를 측정하였다. 또한 분화과정에서 유전자의 변화를 알아보기 위해서 high density microarray 방법을 이용하여 유전자의 발현 정도를 분석하였다.세포증식은 모든 배양 조건에서 배양 14일에 가장 높았고 그 이후 감소하기 시작하였다. EPO 농도에 따른 배양 효과를 비교하였을 때, EPO를 20 UmL 농도로 첨가한 경우에서 세포수가 가장 많이 증가하는 것을 관찰할 수 있었다. 그러나 3주 배양 시 유핵 적혈구 및 적혈구의 전형적인 세포는 거의 관찰되지 않았으며 유핵세포에서의 GPA의 표현도 낮게 측정되었다. Microarray 분석에서 false detection rate (FDR)이 0.74%인 유전자는 총 125개였다. 이중 배양 7일에 비해 14일에서 그 발현이 3배 이상 증가한 유전자가 17개 있었으나, 적혈구 분화와는 상관성이 낮은 유전자였다. 그러나 적혈구 분화와 관련이 높은 유전자 항목을 개별적으로 분석한 결과 glycophorin A, Rhesus blood group CcEe antigens, erythrocyte membrane protein band 4.2 그리고 erythropoietin receptor 유전자의 발현이 배양이 진행되면서 증가함을 알 수 있었다.결론적으로 조혈모세포로부터 적혈구를 생산하고자 할 경우 EPO의 농도와 세포 증식간에는 양의 상관성이 있었다. 또한 배양 초기부터 EPO를 첨가하는 경우에서 더 많은 세포수가 증가하여 EPO를 후기 배양에 첨가하는 기존 방법보다 우수한 것으로 생각되었다. 그러나 3주 배양이 진행되는 과정에서 적혈구 분화에 관련된 유전자들의 발현은 증가하였으나 배양세포의 형태나 표현형 분석 결과 적혈구 계열 세포보다는 다른 계열 세포로의 분화가 더 많이 관찰되었다. 따라서 적혈구 분화배양의 순수도를 높이기 위하여 성장인자 조합 외에도 미세 환경 조성과 조혈모세포와 보급세포와의 상호작용 등 적혈구 분화에 미치는 요소에 대한 연구가 더 필요할 것으로 생각된다.

감마나이프 수술 환자의 정위적 틀 고정을 위한 침윤 마취 시 통증 완화 중재의 효과

장영준 전북대학교 2017 국내박사

The infiltration anesthesia right before the stereotactic frame fixation for Gamma Knife Surgery causes pain. The purpose of this study was to compare effects of three interventions on pain, blood pressure and heart rate in patients who were about to get Gamma knife surgeries. The three interventions were EMLA cream plus vapocoolant spray (Vasocoolant thereafter, n=26), EMLA cream plus 10% Lidocaine spray (Lidocaine thereafter, n=23), and EMLA cream only (EMLA thereafter, n=25) from a university-affiliated Hospital in J City, South Korea. The study utilized the equivalent control-group posttest design. Pain was assessed in both subjectively (numeric rating scale) and objectively (Galvanic Skin Response tester). Subjective pain was assessed twice - after the infiltration anesthesia and after removing the screws - and objective pain was assessed during the infiltration anesthesia. Blood pressure and heart rate were assessed twice; before and after the infiltration anesthesia. Data was collected from August 3 to December 31, 2016 and analyzed with SPSS 18.0 using frequency, percentage, χ²-test, Fisher’s exact test, ANOVA, and ANCOVA. The results of this study are summarized as follows; 1. The subjective pain scores after the infiltration anesthesia from Vapocoolant group were significantly lower than the scores from both Lidocaine and EMLA group (F=14.79, p<.001). 2. The objective pain scores during the infiltration anesthesia from Vapocoolant group were significantly lower than the scores from both Lidocaine and EMLA group (F=15.34, p<.001). 3. The subjective pain scores after removing the screws were not statistically different between the three groups of Vapocoolant, Lidocaine, and EMLA (F=2.10, p=.144). 4. The systolic blood pressures after the infiltration anesthesia were higher than those before the procedure in three groups. However, the differences of systolic blood pressures in Vapocoolant group were significantly smaller than those from both Lidocaine and EMLA groups (F=5.63, p=.005). 5. The diastolic blood pressures after the infiltration anesthesia were higher than those before the procedure in three groups, too. However, the differences of diastolic blood pressures in three groups were similar (F=3.08, p=.052). 6. The heart rates after the infiltration anesthesia were higher than those before the procedure in three groups. However, the differences of heart rates in Vapocoolant group were significantly smaller than those from both Lidocaine and EMLA groups (F=6.42, p=.003). In conclusion, the most effective intervention to relieve pain and to lower blood pressure and heart rate changes due to the infiltration anesthesia for stereotactic frame fixation was EMLA cream plus vapocoolant spray. Thus, it is highly recommended to apply vapocoolant spray in addition to EMLA cream as a nursing intervention for patients under Gamma knife surgeries.

다문화아동에 대한 교육복지 지원정책 분석 연구

지세진 경남과학기술대학교 2016 국내석사

다문화아동에 대한 교육복지 지원정책을 정부부처와 시,도교육청을 중심으로 살펴보고 시사점과 개선방안을 도출하였다. 첫째. 다문화아동에 대한 지원정책 수혜의 불균형이다. 둘째, 정책의 효율성의 미비이다. 셋째, 지원대상간의 추진정책 이념의 통일성의 부재이다. This study examined the current situation of policies focusing on the home pages of such government branches as the Ministry of Gender Equality and Family, the Ministry of Education, and the Ministry of Health and Welfare, and such Metropolitan and Provincial Offices of Education as Seoul Metropolitan Office of Education, Gyeonggido Office of Education, and Busan Metropolitan Office of Education, to grasp and analyze the current situation of the education and welfare supporting policies for children of multicultural families. The categories of children of multicultural families in this study were limited to children of international marriage families, children of foreign workers' families, and North Korean defectors' families, and the cases of the Unites States, Canada, France, and Germany were examined to analyze foreign policies for multicultural children and to derive some implications through the analysis. The analytic results of this study are as follows. First, there exist imbalances among the beneficiaries of the supporting policies for multicultural children. If we look into the policies of government branches and Metropolitan and Provincial Offices of Education, those beneficiaries tend to concentrate into the families of international marriage women immigrants. And even though the Ministry of Education has been providing the children of North Korean defectors' families with the supporting policies since several years ago, there have been almost no support for the children of foreign workers' families. Secondly, the efficiencies of the policies are inadequate. Even though South Korea arranges the competency building policy for multicultural children as part of policies of embracing all of them, and proceeds with the policy of having them cultivate responsible attitude toward peace, human rights, and diversity as the U.S. does, those policies haven't been working in the field. Thirdly, there is lack of unity among the ideologies of policies across the support targets. Something very strange is happening like that on the one hand exclusion policy has been adopted for foreign workers and their children, and assimilation policy for international marriage women immigrants and their children, on the other multiculturalism highlighting integration is emphasized from the standpoint of overall societal discourse, This study has its meaning in that it prepares and analyzes improvements to the policies for multicultural children in Korea, by investigating the current situation of the education and welfare supporting policies for school age children of multicultural families through home pages of government branches and Metropolitan and Provincial Offices of Education, and deriving implications for improvements from the policies for multicultural children of advanced foreign countries.

과체중 및 비만 임부를 위한 생활습관중재 프로그램의 효과

최혜경 전북대학교 일반대학원 2018 국내박사

This is a quasi‐experimental research of non‐equality control design to test the effects of the program on weight gain, dietary habits, fatigue and pregnancy stress, blood pressure, and birth weight after providing a lifestyle intervention program using Cox's Interaction Model of Client Health Behavior for overweight and obese women. The subjects of this study were women who received prenatal care at A Women's Hospital and B Women's Hospital in J province, they are overweight and obese pregnant women before pregnancy, and there are a total of 52 patients who met the criteria of selection including 25 in the experimental group and 27 in the control group. The lifestyle intervention program consisted of a total of 12 weeks and consisted of interactions involving physical activity and nutrition education, information provision, decision control and professional technical skills. The measurement variables were body weight, dietary habits, fatigue and pregnancy stress, blood pressure before and after the program, and neonatal birth weight after delivery was measured. The data collection period was from February 1, 2017 to August 31, 2017. The results of this study are as follows. 1. The experimental group before and after the lifestyle intervention program was more effective than the control group in increasing the appropriate weight gain owing to higher rate of the appropriate weight gain as compared with that of the control group(χ²=6.17, p=.013). 2. The experimental group before and after the lifestyle intervention program had higher eating habit scores than the control group, and the lifestyle intervention program was effective in improving eating habits(t=1.93, p=.029). 3. The experimental group before and after the lifestyle intervention program had less fatigue increase than the control group, and the lifestyle intervention program was effective in suppressing the fatigue increase in the pregnant women(t=-2.32, p=.012). 4. The experimental group before and after the lifestyle intervention program was less effective in reducing pregnancy stress than the control group, and the lifestyle intervention program was effective in suppressing the increase in pregnancy stress(t=-1.87, p=.034). 5. There was no difference in the ratio of normal blood pressure between the experimental group before and after the lifestyle intervention program and the control group, and the lifestyle intervention program had no effect on the blood pressure of the pregnant women(χ²=1.45, p=.538). 6. There was no difference in the ratio of optimal childbirth rates between the experimental group before and after the lifestyle intervention program and the control group, and the lifestyle intervention program did not show any effect on neonatal weight (χ²=1.88, p=.368). Based on Cox's Interaction Model of Client Health Behavior, the lifestyle intervention program contributed to suppressing the excessive weight gain, fatigue and the stress increase in the pregnant period. Based on the results of this study, this study is to propose the following suggestions. First, this study suggests that the program should be used as an intervention for prenatal care during pregnancy under the integrated management of nurses in clinical practice. Second, it suggests that the provision of this program should be extended to pregnant women with high body mass before pregnancy. Third, it suggests follow‐up studies in relation to the implementation of lifestyle intervention and postpartum weight congruence of the participants who participated in the intervention.

문제음주 대학생을 위한 사회인지이론 적용 절주프로그램의 효과

김수미 전북대학교 일반대학원 2018 국내석사

동영상교육이 암 환자의 사전연명의료의향서 작성에 미치는 영향

강지수 전북대학교 일반대학원 2019 국내석사

Purpose : The purpose of this study was to evaluate the effects of video education on cancer patient's Advanced Directives(AD) knowledge, attitude, wirte intention, and writing. Methode : To evaluate the effects of video education on cancer patient's Advanced Directives(AD) knowledge, attitude, wirte intention, writing and this study employed a non-equivalence control group and non-synchronized design as a quasi-experimental research. The target population of this study was a 50-years-old over older adult who was diagnosed with cancer in South Korea and a close-out population was also cancer patients who visited a University Hospital in Jeollabuk-Do. Control group were educated by verbal with leaflet and experimental group were educated by video program developed by researcher for 10 minute and supplement with leaflet. The tool used for the knowledge were modified and supplemented by Hong, Sunwoo and Kim, Shinmi (2013), and the tools for the attitude of AD were developed by Nolan and Bruder (1997) on the Advance Directive Attitude Scale (ADAS). The instrument of intention to write was used by Jeong, Hyeyoung (2014). The AD form provided by the Ministry of Health and Welfare was used. Period for collecting the data was from September 4, 2018 to November 5, 2018. The collected data were statistically analyzed by using SPSS Statics 25. Result : The results of this research are as follows. 1. Cancer patients who took the video education had a better knowledge of AD than cancer patients who took the education by using leaflets. With controlling effect by age, the participation of video education was found to have a statistically significant effect on the change of knowledge on the AD (F=52.82, p<.001). 2. Cancer patients who took the video education had a better attitude of AD than cancer patients who took the education by using leaflets. With controlling effect by age, the participation of video education was found to have a statistically significant effect on the change of attitude on the AD (F=12.21, p<.001). 3. Cancer patients who took the video education had a better intention to write of AD than cancer patients who took the education by using leaflets. With controlling effect by age, the participation of video education was found to have a statistically significant effect on the change of the intention to write on the AD (F=18.22, p<.001). 4. Cancer patients who took the video educatinon had a significantly higher rate of writing Advanced Directives than the control group treated with leaflets (χ2=13.87, p<.001). Conclusion : The results of this research show that providing information by using video is an more effective educational media for knowledge, attitude, writing intention, and writing of cancer patients's AD As a result, it can be said that it is very appropriate to use the video education as educational media for the Advanced Directives of cancer patients.

발달장애아동 어머니의 회복탄력성 예측 모형

조유영 전북대학교 일반대학원 2019 국내박사

본 연구는 발달장애아동 어머니를 대상으로 회복탄력성을 설명하고, 이에 영향을 미치는 요인 간에 인과적 관계를 규명하기 위하여Haase 등 (2014)의 회복탄력성 질병 모델 RIM (Resilience In Illness Model)과 선행연구의 문헌고찰을 토대로 양육스트레스, 사회자원, 가족자원, 적극적 대처가 회복탄력성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 가설적 모형을 구축하고 검증한 구조모형연구이다. 해당기관의 기관윤리심의위원회의 승인(JBNU 2018-08-006-001)을 받은 후, 2018년 10월 19일 부터 2018년 10월 30일까지, 전라남도와 전라북도, 제주도 등 3개 지역의 특수학교, 소아재활 치료 전문 의료기관 및 치료센터, 장애아동 가족지원 사업을 하고 있는 민간기관과 사회복지시설(장애인복지관)에서 서비스를 받고 있는, 20세 이하의 발달장애아동을 돌보는 어머니 214명을 대상으로, 자가보고식 구조화된 설문지를 이용하여 자료수집 하였다. 본 연구에서 사용된 도구는 회복탄력성은 신우열, 김민규과 김주환(2016)이 한국인에 맞게 개발한 한국형 회복탄력성지수(KQR-53)를 홍은숙(2017)이 장애아 부모를 대상으로 타당성을 검증한 도구를, 적극적 대처를 측정하기 위해 Amirkhan (1990)이 개발한 스트레스 대처전략 검사지(the Coping Strategies Indicator; CSI)를 신혜진, 김창대(2002)가 타당성 검증을 한 도구를, 가족자원과 사회자원은 김미혜(2016)가장애아 어머니를 대상으로 만든 도구를, 양육스트레스는 황경자(2002)의 연구에서 사용한 양육스트레스 도구를 사용하였다. 1) 대상자의 양육스트레스는 5점 만점에 3.30±0.89점, 사회자원은 4점 만점에 2.93±0.43점, 가족자원 4점 만점에 2.98±0.03점이며, 적극적 대처는 3점 만점에 2.23±0.04점, 회복탄력성은 5점 만점에 3.51±0.04점으로 나타났다. 2) 본 연구의 가설적 모형의 부합도 검정결과 적합도 지수는 χ2(p) =69.27(<.001), Normed χ2=1.87, GFI=.94, NFI=.93, CFI=.97, TLI=.95이고, RMSEA=.06, SRMR=.06으로 본 연구는 좋은 적합도 기준을 충족하였다. 3) 본 연구의 모형에서 제시한 경로에 대한 유의성 검정결과, 가설적 모형에서 설정한 10개의 경로 중 통계적으로 유의한 경로는 7개이고, 가족자원에 영향을 미치는 양육스트레스, 사회자원의 설명력은 41.4%, 적극적 대처에 영향을 미치는 양육스트레스, 사회자원, 가족자원의 설명력은 58.9%, 회복탄력성에 영향을 미치는 양육스트레스, 사회자원, 가족자원, 적극적 대처의 설명력은 55.5%이었다. 4) 가설검정 결과, 발달장애아동 어머니의 회복탄력성에 직접적으로 영향을 미치는 요인은 적극적 대처와 가족자원, 사회자원으로 확인되었다. 양육스트레스는 회복탄력성에 직접적으로 영향을 미치지 않았으나, 간접효과와 총 효과가 유의한 것으로 나타났다. 이는 양육스트레스가 사회자원, 가족자원, 적극적 대처에 작용하여 간접적으로 회복탄력성에 영향을 미치는 것을 의미하므로, 가설로 설정한 요인 모두 회복탄력성의 예측요인이라고 할 수 있다. 아동과 어머니의 회복탄력성은 서로 상호관련이 있고, 평생을 발달장애아동을 돌봐야하는 어머니가 자녀의 질병과정에 긍정적으로 적응을 하도록 돕기 위해서는 회복탄력성이 중요하다. 본 연구결과 발달장애아동 어머니의 적극적 대처와 가족자원, 사회자원이 회복탄력성에 직접적으로 영향을 미치며 양육스트레스가 간접적으로 영향을 미치는 것을 확인하였다. 따라서 발달장애아동 어머니의 회복탄력성 증진을 위해 어머니의 사회적지지 추구와 문제 중심 대처 등의 적극적 대처를 돕고, 가족의 정서적 유대와 지지, 가족의 문제를 해결해 나갈 수 있는 능력, 가족 간의 소통과 참여 등의 가족자원을 증진시키고, 부모 역할을 수행하는 과정에서 어머니가 느끼는 심리적, 교육적, 신체적, 사회적, 경제적 스트레스를 감소시킬 수 있는 체계화된 간호중재 전략 개발이 더욱 필요하며, 이웃, 친구, 동료, 종교단체 등의 주위 사람들의 지지, 다른 장애아동 부모와의 소통, 지역사회 자원 활용, 전문자원의 활용 등을 다각적으로 제공하는 것이 필요하다.

급성 백혈병 및 재생불량성 빈혈에서 골수기질세포의 성상 및 유전자 발현

박규은 연세대학교 대학원 2003 국내박사

정상적인 조혈이 이루어지기 위해서는 골수의 미세환경을 이루고 있는 세포 요소들인 기질세포와 골수전구세포의 상호작용이 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 정상 조혈세포의 증식이 억제되거나 생성부전인 혈액 질환이 있을 때, 기질세포의 변화가 동반되거나 병인으로서 작용할 수 있을 것이라는 가정하에, 급성 백혈병 환자와 재생불량성 빈혈 환자의 골수와 정상인의 골수로부터 내피세포가 풍부한 기질세포를 분리하여 각 군 간의 조성 변화를 비교하고, 조혈모세포의 체외배양시 기능적인 차이를 보이는지와 유전자 표현상의 차이를 보이는지를 알아보고자 하였다. 급성 백혈병, 재생불량성 빈혈 환자 및 정상 골수 공여자의 골수로부터 내피세포가 풍부한 기질세포를 분리하여 배양하였으며, 이를 보급세포(feeder layer)로 하여 정상인의 조혈모세포 체외배양을 실시하였다. 분리된 기질세포의 성상을 비교하기 위하여 유세포분석 및 면역형광염색법으로 BODIPY-FL-AcLDL stain과 CD34, CD105, CD29, CD31, CD44, KDR 등의 발현 정도를 분석하였으며, DNA 칩을 이용한 유전자 발현 측정을 위하여 mRNA를 분리하였다. 정상 조혈모세포의 체외배양 성적은 배양 7일 및 14일째 조혈모세포의 수를 측정하고, 배양된 조혈모세포 가운데 CD34+CD38- 세포수를 측정함으로써 평가하였다. 유전자 프로파일 검사는 17,000개의 유전자가 배열된 마이크로어레이를 사용하여 시행하였으며, 정상과 백혈병, 백혈병과 재생불량성 빈혈, 재생불량성 빈혈과 정상의 세 가지 조합으로 각각 3회씩 반복하여 시행하였다. 골수기질세포는 골수로부터 분리한 직후 3-5%였으며, 이를 배양하여 보급세포로 사용할 수 있는 골수기질세포주를 확립할 수 있었다. 정상 골수로부터 채집한 골수기질세포를 24 well plate에 2 x10^4세포를 넣어 일차 배양시 plate에 90% 이상 차게 되는 시기는 약 5일이 소요된 반면, 급성백혈병과 재생불량성 빈혈의 경우 5일까지도 90%이상 증식하지 못했다. 골수기질세포의 단클론항체에 대한 성상 발현에 세 군간에 차이가 없었으나, 항CD34항체, 항KDR항체 등에 양성을 보여 혈관내피세포의 특성을 많이 가진 것으로 나타났다. 조혈모세포의 체외배양 성적은 정상인에 비하여 급성 백혈병 및 재생불량성 빈혈 환자의 기질세포의 증식능이 유의하게 감소하였으며, 재생불량성 빈혈군의 경우 분화 정도가 심하였다. 유전자 프로파일 검사 결과 세포 접촉이나 조혈촉진에 관한 대부분의 유전자 발현이 세 군간 차이가 없었으나, 급성 백혈병과 재생불량성 빈혈군에서 Jagged 1 유전자의 발현이 감소되어 있었으며, 재생불량성 빈혈군에서 Fibroblast Growth Factor 2 유전자의 발현이 증가되어 있었다. 이상과 같이 급성 백혈병과 재생불량성 빈혈 환자에서 정상인에 비하여 골수기질세포의 조혈촉진 기능이 감소되어 있음을 확인할 수 있었으며, 이들 세포의 표현형의 차이는 없었지만 일부 유전자의 표현 정도가 차이를 보임을 볼 수 있었기 때문에 향후 이들 유전자의 발현 정도의 차이가 골수의 조혈부전에 어떤 역할을 하는지 규명함으로써 이들 혈액 질환에서 골수기질세포의 역할이 보다 분명히 밝혀질 수 있으리라 생각된다. The interaction between the bone marrow stromal cells as a microenvironment and hematopoietic progenitor cells is the most important for the maintenance of normal hematopoiesis. In this study, under the hypothesis that marrow stromal cells will have some defect in supporting normal hematopoiesis in cases with acute leukemia and/or aplastic anemia, the phenotypic, functional, and expressional differences of bone marrow stromal cells from acute leukemia and aplastic anemia were analyzed in comparison with the stromal cells from normal marrow donors. The bone marrow stromal cells were isolated from the acute leukemia patients, aplastic anemia patients, and hematologically normal bone marrow donors. The stromal cells were cultured for 5 days to form the feeder layer for normal hematopoietic progenitor cell culture. The isolated stromal cells of each group were tested for the uptake of BODIPY conjugated acetylated low density lipoprotein (acLDL), CD34, CD105, CD29, CD31, CD44, and KDR by immunofluorescence or flow cytometry. To determine whether or not abnormalities exist in the bone marrow stroma in acute leukemia and aplastic anemia, the ability of marrow stromal cells to support hematopoiesis was analyzed by coculture of the immunomagnetically isolated normal cord blood hematopoietic progenitor cells and each stromal cell line as a feeder layer. After inoculation of normal marrow hematopoietic stem cells onto preformed, irradiated stromal cells, the number of the progenitor cells was counted after 7 and 14 days of each culture. The fraction of CD34+/CD38- cell population was also determined and evaluated in comparison with the initial proportion of the progenitor cells. The genetic profile of each stromal cell line was analyzed by 17,000-gene microarray analysis. Three kinds of combination - normal/acute leukemia, acute leukemia/aplastic anemia, and aplastic anemia/normal - were analyzed three times respectively. The proportion of the CD45-/CD34+ stromal cell fraction after isolation from bone marrow was about 3-5%. After culture for 5 days, the stromal cells from normal and acute leukemia patients grew more than 90% of 24-well microplate, while the stromal cells from aplastic anemia patients did not. Neither the morphological/cytological nor the phenotypic characteristics of the isolated stromal cells (acLDL uptake, CD34+, CD105+, CD29+, KDR+, CD31-, CD44-) did not show significant difference between groups and showed mostly the characteristics of endothelial cells. On coculture assay, the proliferative capacity of progenitor cells with acute leukemia and aplastic anemia originated feeder layer groups was much lower than that of normal feeder layer group. Moreover, there were significantly fewer CD34+/CD38- cells in aplastic anemia feeder layer group. In genetic profiling, most of the significant genes known to be important in cell adhesion and hematopoiesis regulation did not show significant differences between groups. However, the Jagged 1 gene expression was significantly reduced in acute leukemia and aplastic anemia group as well as Fibroblast Growth Factor 2 gene expression was upregulated in only aplastic anemia group. These findings suggest that some kind of gene expression changes, which can lead to the stromal defect in supporting hematopoiesis, and can make a role in the pathogenesis of the disease.

학령기 아동에게 적용한 학교기반 흡연예방프로그램의 효과 : 체계적 문헌고찰 및 메타분석

양윤서 전북대학교 일반대학원 2019 국내박사