Kec 백내장 마우스의 유전적 연쇄지역 분리와 후보 유전자 탐색

강민지 가톨릭대학교 대학원 2008 국내석사

Optimization of ectopic bone marrow formation following transplantation of mesenchymal stem cell expressing bone morphogenic factor-2 and endothelial cells

홍상준 성균관대학교 일반대학원 2015 국내석사

Bone marrow (BM) is an important immune organ which contains hematopoietic cells and consists of adventitial reticular cells, osteocytes, adipocytes, extracellular collagen matrix, and vascular endothelium. BM microenvironment plays a critical role in hematopoiesis. BM niche is important for human hematopoietic stem cell (HSC) engraftment. Over the past few decades, mesenchyal stem cells (MSCs) have become of increasing for use in the field of regenerative medicine. Several groups used MSCs for making BM microenvironment, because MSCs have ability to differentiate into osteocytes, osteoblasts, chondrocytes, endothelial cells and so on. Also, bone morphogenetic protein 2 (BMP2), a member of large family of proteins, has been known for its ability to induce the formation of bone and cartilage. We describe the development of ectopic bone marrow using human autologous BMP2 expressed umbilical cord (UC) derived MSCs and umbilical cord derived endothelial cells (ECs) implanted subcutaneously into immunodeficient mice. We could establish human ectopic bone marrow construct in the NOD-scid IL2rγnull (NSG) subcutaneous. This model could be useful for the study of the development of novel therapeutic modalities aimed at modifying the hematopoietic microenvironment. Also, Autologous BM oganogenesis will become an invaluable tool for human HSC engraftment.

Development of humanized mouse model with whole human T cell environment tolerated to HLA-mismatched donor.

주성연 성균관대학교 일반대학원 2011 국내박사

Humanized mice are expected to be a useful tool for studying human immune system and human diseases. Since NOD/SCID/c-/- (NSG) mouse has been developed, more powerful host mouse than NOD/SCID mouse with the reconstitution of human cells, many groups has been published their works and applied their humanized mice to various human diseases. In many groups, the humanized mice were designed by the method of transplantation of human umbilical cord blood-derived CD34+ hematopoietic stem cells. Commonly in such cases, the amounts of human T cells among engrafted human cells in humanized mice were so small, while the amounts of human B cells were abundant. To improve this limitation and make advanced humanized mice model, we transplanted human fetal liver, thymus tissue under kidney capsule and human CD34+ stem cells intravenously into NSG mice. Our humanized mice were reconstituted with sufficient number of human T cells. With this humanized mouse, we investigated whether the entire process of human T cell developments were arose similarly as reported human data in chapter 1. Our humanized mice transplanted with fetal liver and thymus tissue and fetal liver-derived CD34+ stem cells (FLT+FLCD34 mice) showed higher levels of human cells and T cells in their periphery and various organs more than those of humanized mice transplanted fetal liver-derived CD34+ stem cells only (FLCD34 mice). In enlarged transplanted thymus tissue under kidney of FLT+FLCD34 mice, human populations of thymus seeding progenitors (TSPs), early thymic progenitors (ETPs), and pre-T cells were identified in CD4 and CD8 double negative (DN) thymocytes, and CD3-CD4+ immature single positive (ISP), CD3-CD4+CD8+ early double positive (EDP), CD3+CD4+CD8+ double positive (DP), CD3+ CD4+ single positive (SP) and CD3+ CD8+ SP populations were identified in thymocytes excluded DN population. In the human T cells of periphery, a notable difference was founded in their character. FLT+FLCD34 mice have much CD45RA+ naïve T cells than CD45RO+ memory T cells. On the contrary to this, FLCD34 mice have much more CD45RO+ memory T cells rather than CD45RA+ naïve T cells. These memory T cells from spleen of FLCD34 mice were proliferated rapidly ex vivo under stimulation of anti-CD3 and anti-CD28 and showed drastic induced cell death. We found out that this difference was resulted from the thymic environments, because the human T cells of FLCD34 mice were educated by mouse MHC class II in mouse thymus. These T cells showed the properties of innate T cells expressing PLZF (promyelocytic leukemia zinc finger protein) in their thymocytes and expressed intracellular interferon- (IFN-) within a short time. In chapter 2, the chimerism and the tolerance induction in the humanized mice reconstituted with fetal liver and thymus tissue and HLA-mismatched umbilical cord blood-derived CD34+ stem cells (FLT+UCB-CD34 mice) was confirmed. Both HLA-A2+ and HLA-A24+ T cells were developed from implanted human fetal thymus tissue and released to periphery. Both mature T cells didn’t show cytotoxic responses against cord blood originated target cells ex vivo. Also, the tolerance was confirmed against the fetal origin by skin graft assay. Fetal donor originated skin graft did not cause graft rejection in FLT+FLCD34 mice while identical skin grafts caused rejection in UCB-CD34 mice as expected. This method could be useful establishing a patient-specific humanized mice model using co-transplantation of allogeneic human fetal tissues with patient’s stem cells. In these finding of chapter 1 and chapter 2, an enhanced human T cell reconstitution occurs normally in our humanized mice model compared to other humanized models without the implantation of human fetal tissue. Also, these developed human T cells educated by human MHC class II in the implanted thymus showed more human like features in their function and phenotypes in the periphery without showing any feature of innate T cells. Therefore, our humanized mice model is expected to be a useful model for human T cell research, development of patient’s specific cell therapy and applied to preclinical diagnostic screening system. 인간화 마우스는 인간의 면역체계와 질병연구를 위한 유용한 수단으로 대두되고 있다. 특히 인간세포의 재건에 있어서 주로 쓰이던 종전 동물모델인 NOD/SCID보다 훨씬 강력한 NOD/SCID/c-/- (NSG) 마우스가 개발된 이후로 많은 연구자들이 그들의 결과를 앞다투어 발표하고 여러가지 인간의 질병에 적용하고 있다. 대부분의 많은 연구자들이 인간의 제대혈에서 분리한 CD34+ 조혈모세포를 이식하는 방법으로 인간화 마우스를 모델링 하고 있는데, 그런 경우에 대부분의 인간화 마우스는 인간의 B 세포가 재건된 인간세포의 대부분을 차지하며 T세포는 매우 작은 양만이 재건되는 공통적인 결과들을 보였다. 이 결점을 보완한 인간화 마우스를 만들기 위해, 인간 태아의 간과 흉선조직을 NSG 마우스의 신장막에 이식하고 미정맥에 CD34+ 조혈모세포를 이식하였다. Chapter 1에서는 이렇게 제작한 인간화 마우스는 T세포가 충분히 재건되고 이 세포들이 인간의 T세포 발달의 전 과정을 거치는지 보고된 데이터와 비교하여 확인하였다. 인간 태아의 간과 흉선조직과 태아 간에서 분리한 CD34+ 조혈모세포가 동시에 이식된 인간화 마우스(FLT+FLCD34)는 오직 간에서 분리한 CD34+ 조혈모세포만 이식된 마우스(FLCD34)에 비하여 말초혈액과 여러 기관 내에 많은 양의 인간세포와 T세포를 지니고 있었다. 일정시간이 지난 후 이식했던 태아의 흉선조직이 매우 비대해졌는데 그 안에서 흉선세포를 분리하여 가장 미성숙한 세포인 thymus seeding progenitor (TSP), early thymic progenitor (ETP), Pre-T 세포를 CD4와 CD8이 음성인 DN 흉선세포에서 확인하고, CD3-CD4+ immature single positive (ISP), CD3-CD4+CD8+ early double positive (EDP), CD3+CD4+CD8+ double positive (DP), CD3+ CD4+ single positive (SP), CD3+ CD8+ SP 세포군을 DN을 제외한 나머지 세포들에서 확인하였다. 말초혈액에 생성된 T세포에서 FLT+FLCD34 마우스와 FLCD34 마우스 간의 눈에 띄는 차이점이 발견되었는데, FLT+CD34 마우스의 T세포에는 많은 양의 CD45RA+인 naïve T세포들이 존재하고 소량의 CD45RO+인 memory T세포들이 존재하는 반면, FLCD34 마우스에는 대부분의 T세포들이 CD45RO+인 memory 타입으로 존재하였다. FLCD34 마우스의 비장세포를 체외에서 anti-CD3와 anti-CD28로 자극하여 배양하였더니 빠르게 분열하는 것을 관찰할 수 있었으며 동시에 급격한 세포사멸에 빠지는 것이 관찰되었다. 우리는 FLCD34 마우스의 T세포는 마우스 자신의 흉선 밖에 없기 때문에 마우스의 MHC class II에 의해 교육받게 되므로 앞에서 나타난 차이점은 두 마우스의 흉선환경에서 비롯된다는 것을 알게 되었다. 그러한 T세포들은 PLZF (promyelocytic leukemia zinc finger protein)를 발현하며 빠르게 IFN-를 분비하여 innate T 세포의 특성들을 지닌다는 것을 보여주었다. Chapter 2에서는 인간 태아의 간과 흉선과 인간 제대혈에서 분리된 CD34+ 조혈모세포의 동시이식을 통해 제작된 인간화 마우스(FLT+UCB-CD34)에 chimerism과 tolerance가 유도됨을 보여주었다. 각각 HLA-A2와 HLA-A24의 태아조직과 조혈모세포의 T 세포는 이식된 태아의 흉선조직을 통해 성숙하여 방출되었고, 각각의 T세포는 본래의 제대혈 세포로 만든 target 세포에 대하여 cytotoxic 반응을 보이지 않았다. 또한, 이식에 사용된 태아의 피부를 FLT+FLCD34 마우스와 FLCD34 마우스에 이식하였더니 FLT+FLCD34 마우스에서는 거부반응이 나타나지 않았고, FLCD34마우스에서는 거부반응이 나타났다. 이를 통해 두 가지 HLA가 서로 다른 조직과 조혈모세포로 제작된 인간화 마우스 내에 tolerance가 유도되었음이 증명되었다. 이것은 환자유래의 조혈모세포와 태아조직을 이용하여 환자특이적인 인간화 마우스를 만드는 연구의 뒷받침이 될 것이다. Chapter 1과 chapter 2 에서 얻은 결과로 기존의 모델링 방법에 비하여 우리가 제작한 인간 태아의 간과 흉선조직과 조혈모세포의 동시이식을 통해 만들어진 인간화 마우스에서 인간의 발달과정과 유사한 과정을 거친 T세포의 재건이 이루어짐이 확인되었고 이러한 T세포들은 인간의 MHC class II에 의해 교육을 받아 발달되어 innate T세포의 특성을 지니지 않았다. 그러므로 이렇게 제작된 인간화 마우스가 인간의 T세포 연구의 유용한 모델이 될 수 있겠고, 환자특이적 세포치료의 개발, 전임상단계의 진단 스크리닝 연구에 적용될 수 있기를 기대한다.

SIRT1 displays anticancer potential against advanced hepatocellular carcinoma with loss of p53 function

ZHENG YUN ZHANG 성균관대학교 일반대학원 2013 국내박사

Background: Hepatocellular carcinoma (HCC) is a highly malignant tumor with a poor prognosis. SIRT1 (silent mating-type information regulation 2 homologue 1) is a class III histone deacetylase that is implicated in gene regulations and stress resistance. Detection of SIRT1 is considered a useful predictor of prognosis in some carcinomas. However, its interpretation and clinical significance remains to be determined in hepatocellular carcinoma. Methods: A retrospective study was performed on the clinicopathological features of HCC from surgical cases. Protein expression level was detected by western-blotting. p53 mutation was identified by sequencing. Results: In this study, we found that SIRT1 was a strong and independent predictor for better prognosis in patients of advanced HCC with loss of p53 function. Down regulation of SIRT1 by shRNA consistently stimulated and reduced the cell growth and proliferation of PLC5 cells (mutation on 249 site of p53) and HepG2 cells (wild-type p53) respectively in vitro or in vivo. SIRT1 silencing caused suppression of AMP-activated protein kinase (AMPK) activity and subsequently enhanced mammalian target of rapamycin (mTOR) activity, resulting in induction of activity of S6 Kinase 1 (S6K1) in PLC5 but not in HepG2 cells in vitro and in vivo. Consistently, we detected a significant positive correlation between SIRT1 and phosphor-AMPK expression levels in a cohort of advanced HCC specimens with loss of p53 function, and the combination of these two parameters was a powerful predictor of prognosis for advanced HCC patients with loss of p53 function. Conclusions: SIRT1 displays an anti-carcinogenic role through AMPK-mTOR pathway in HCC with loss of p53 function. However, in HCC with normal p53, SIRT1 plays its role as a tumor promoter via its classical p53 pathway. The decision of the role following SIRT1 activation is greatly influenced by loss or normality of p53 function.

Therapeutic Strategies for Soft Tissue Sarcomas with Engineered Mesenchymal Stromal Cells

이현주 성균관대학교 일반대학원 2014 국내박사

본 연구는 육족암을 대상으로 항암물질인 TRAIL과 HSV-TK 를 발현하는 엔지니어링 줄기세포의 항암효과 검증을 목적으로 한다. 육종암은 근육, 결합조직, 지방, 뼈, 연골, 혈관 등 온 몸에서 발생 가능한 악성암으로 수술 후 화학치료 및 방사선치료를 받아도 재발율 및 전이율이 높아 5년 생존율이 36~63% 로 예후가 매우 나쁜 암이다. 하지만 육종암은 근본적인 치료 및 예방 연구가 거의 전무 한 상태로, 생존율과 직결되는 재발 및 전이를 줄일 수 있는 새로운 패턴의 표적치료가 요구된다. 본 연구에서는 육종암 표적치료를 위해 줄기세포를 도입하였다. 줄기세포는 몸 속 암세포로 이동하는 성질 (tropism) 과 이식 후 낮은 면역거부반응 (hypoimmunogenicity), 항암치료유전자의 엔지니어링이 용이한 장점을 가지기 때문이다. 따라서 본 연구에서 줄기세포에 TRAIL 이라는 정상세포는 피하고 암세포만 특이적으로 죽이는 항암유전자와, HSV-TK 라는 빠르게 증식하는 암세포를 타겟으로 세포사멸을 유도하는 항암유전자를 엔지니어링하고 육종암의 대표적인 악성섬유성조직구종 및 지방조직에의 치료효과를 분석하였다. 시험관에서 TRAIL과 HSV-TK를 발현하도록 엔지니어링한 줄기세포 (MSC-TRAIL 과 MSC-TK) 가 악성섬유성조직구종 (MFHino) 및 지방육종 (LPS246, LPS863) 세포주와 함께 배양한 후 세포사멸이 유도되는지 분석하였다. 전임상 단계에서 악성섬유성조직구종의 폐 전이 및 간 전이암 동물모델을 통해 MSC-TRAIL의 항 전이 효과를 확인하고, 지방육종의 폐 전이암 및 재발암 동물모델을 통해 MSC-TK 의 항 전이 및 재발 예방효과를 확인하였다. 그 결과, 육종암은 암세포주 종류에 따라 TRAIL에 다른 민감성을 보였다. 특히 MSC-TRAIL은 악성섬유성조직구종의 세포주에 매우 높은 항암 효과를 보였고 이는 엔지니어링 줄기세포에서 분비하는 TRAIL이 암세포의 표면에서 발현하는 세포사멸수용체와 결합하여 세포사멸신호전달 메카니즘을 통한 것임을 확인하였다. 반면 지방육종의 한 세포주는 MSC-TRAIL에 저항성을 보였지만 MSC-TK에는 높은 민감성을 보였다. 이 MSC-TK의 항암효과는 엔지니어링 줄기세포에서 발현하는 HSV-TK에 의해 변환된 독성의 간사이클로비르 (ganciclovir) 가 세포간 신호전달통로인 갭졍션 (gap junction) 을 통해 암세포로 전달되어 세포사멸을 유도했음을 확인하였다. 시험관 항암효과 실험과 메커니즘 연구를 바탕으로 한 전임상 동물실험에서 MSC-TRAIL이 악성섬유성조직구종의 폐 전이암뿐 아니라 간 전이암을 강력히 줄인 것을 확인하였다. 이는 폐 및 간으로 암을 따라 이동한 엔지니어링 줄기세포가 TRAIL을 분비시켜 전이암을 세포사멸에 유도한 것을 시사한다. MSC-TK은 TRAIL에 저항성을 가지는 지방육종 세포주의 단계별 폐 전이암 모델에서 초기뿐 아니라 암세포의 증식이 상당히 진행된 단계에서도 높은 항전이 효과를 보였다. 주목할 부분은, 임상에서 수술 후에도 80% 이상의 재발율을 보이는 지방육종을 대변할 수 있는 지방육종 재발동물모델이 확립되었고, MSC-TK의 효과를 확인 한 결과 통계학적 유의성 있는 재발 억제 효과를 확인하였다. 이는 MSC-TK가 암세포 제거 수술 후 잔여하고 있던 암세포를 공격하여 다시 재발되는 확률을 낮춘 것으로, 임상에서 재발을 막아 생존율을 높이는 전략에 있어서 매우 의미 있는 결과라고 사료된다. 결론적으로, 본 전임상 연구는 엔지니어링 줄기세포의 악성 육종암 전이동물모델 및 재발동물모델에서 효과적인 항암효과를 확인함으로써 줄기세포 기반의 임상치료가 육종암 환자를 위한 새로운 치료전략으로서의 가능성을 제시한다고 사료된다. 키워드: 줄기세포, TRAIL, HSV-TK, 유전자엔지니어링, 육종암, 악성섬유성조직구종, 지방육종, 전이동물모델, 재발동물모델, 항암치료 Objective: The aim of this study was to evaluate the efficacy of engineered mesenchymal stromal cells expressing tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) and herpes simplex virus thymidine kinase (HSV-TK) for targeting malignant soft tissue sarcomas. Background: Soft tissue sarcomas (STS) are mesenchymal origin cancer, including muscle, fat, fibrous connecting structure, and blood vessels, thus arising anywhere in the body. STS represent high recurrence rate and metastasis rate even after surgical resection combined with traditional chemo- and radiotherapy. To reduce the sequential relapse and metastasis by the residual microscopic sarcomas, directly causing poor overall survival rate, a new target therapy is urgently required. In this study, as a target therapy for STS, mesenchymal stromal cells (MSCs) were adopted. MSCs are emerging as promising cancer targeted agents which have an enormous potential for cancer therapies: tumor-tropic migratory properties, hypoimmunogenic properties, and readily engineered to express therapeutic genes. We have developed a therapeutic strategy of mesenchymal stromal cells expressing TRAIL and HSV-TK to reduce metastasis and recurrence of malignant fibrous histiocytoma (MFH) and liposarcoma (LPS), which are the most common soft tissue sarcomas. Methods: in vitro, MSC secreting TRAIL (MSC-TRAIL) or MSC expressing HSV-TK (MSC-TK) were co-cultured with sarcoma cell lines, MFHino, LPS246 and LPS863, and then analyzed their effects in sarcoma cell lines by apoptosis assay. For preclinical study, anti-metastatic effects of MSC-TRAIL were evaluated by lung metastasis and liver metastasis murine models of MFH. Furthermore, MSC-TK was evaluated whether they inhibit metastasis and prevent recurrence by lung metastasis and locoregional recurrence murine models of LPS. Results: Sarcoma cell lines revealed different sensitivities to TRAIL. Particularly, MFH cell lines, MFHino was highly susceptible to MSC-TRAIL, which selectively induced apoptosis via caspase-8 activation in vitro. LPS cell line, LPS246 was resistant to MSC-TRAIL, whereas LPS246 and LPS 863 were induced apoptosis by MSC-TK, followed by ganciclovir (GCV) via gap junction intracellular communication. In vivo settings, MSC-TRAIL significantly inhibited lung metastasis and liver metastasis of MFH. This result suggested that engineered MSCs migrated to lung and liver and then secreted TRAIL proteins, thus reducing metastasis. MSC-TK markedly inhibited lung metastasis in an early stage and an advanced stage of lung metastasis of LPS. Of note, clinically relevant LPS recurrence murine models were established and MSC-TK exerted significant inhibition of locoregional recurrence of LPS following macroscopically complete resection (R0/R1 resection). This data reflected that implantation of MSC-TK would play a critical role of killing microscopic residual LPS, thus reducing or delaying LPS recurrence. Conclusions: we demonstrate that engineered MSCs achieve significant regression of highly aggressive soft tissue sarcomas in metastasis and local recurrence in preclinical settings, thus this stem cell-based therapy could provide novel therapeutic strategies for sarcoma patient in the clinic.

MHC-restricted adaptive immune responses to CT26 colon cancer cell line in allogeneic mixed chimera

문주익 성균관대학교 일반대학원 2015 국내박사

Although the induction of mixed allogeneic chimera shows promising clinical tolerance results in organ transplantation, its clinical relevance in context of anti-cancer effect is yet unknown. In this study, we investigated the anti-cancer immune response to CT26, a murine colon cancer cell line, when in mixed allogeneic chimeras by performing double bone marrow transplantation (BMT). More specifically, we analyzed donor- and recipient-restricted anti-cancer T cell responses, and phenotypes of subpopulations of T cells. After 50 days post-BMT, 1 X 105 cells of CT26 cells were challenged intrahepatically, we detected the generation of cancer-specific CD4 and CD8 T cells by flow cytometric analysis using CT26 lysates and H-2Ld-restricted-AH1 pentamer at various time points. We found that anti-cancer immunocompetency depends heavily on the cancer-specific CD8 T cell responses in MHC-restricted manner which was also supported by the increase of IFN-γ secreting CD4 T cells. Moreover, we demonstrate that during the effector immune response to CT26 cancer challenge, there was a presence of central memory cells (CD62LhiCCR7+) as well as effect memory cells (CD62LloCCR7-). Moreover, mixed allogeneic chimeras (BALB/c to C56BL/6 or vice versa) showed similar or heightened immune responses to CT26 cells compared with that of wild-type mice. Our results suggest that the responses of primary immunocompetency and pre-existing memory T cell against allogeneic cancer are sustained and preserved in mixed allogeneic chimeric environment.

Generation of humanized liver mouse model by transplanted of patient-derived fresh human hepatocytes

이교원 성균관대학교 일반대학원 2014 국내석사

Background: In the present, some research groups have produced immunodeficient mice with human liver tissue as a model system for the analysis of drug metabolism and liver regeneration. Mouse models are important for research and development of drugs and vaccines for viral infections. Recent progress in developing humanized mouse models permit studies of adaptive immune responses, innate host responses, and therapeutic approaches for several liver diseases of viral etiology. Materials and Methods: In this study, we generated a humanized liver mouse model by transplanted with fresh patient-derived hepatocytes (1 x 106 cells/mouse, intrasplenic injection) into pre-conditioned (50 mg/kg ganciclovir, intraperitoneal injection) TK-NOG mice. Results: Reconstitution of human hepatocytes in TK-NOG mouse liver tissues was observed with strong proliferation of human cells in a time-dependent manner, using cytokeratin 8/18 stain. Similarly, we detected significantly increased human albumin levels in TK-NOG mouse liver tissue and blood sera on immune staining and ELISA. Conclusions: This humanized liver mouse model provides biomedical tool for studying human liver physiology, drug metabolism, and liver pathogenesis of viral etiology or liver regeneration. 배경 및 목적: 최근 몇몇 연구자들 그룹에서 인간의 간 조직을 가진 면역억제 쥐 모델이 만들어졌다. 이 모델은 약물의 대사나 간 재생의 연구에 사용되었다. 이러한 쥐 모델은 신약의 개발이나 바이러스 감염에 대한 백신을 개발하는데 매우 중요한 역할을 한다. 최근 쥐 모델은 진보를 이루어 면역 관용 반응이나 선천적 숙주반응에 대한 연구 또는 여러 바이러스에 의한 간 질환의 치료적 접근에 이용되고 있다. 방법: 이 연구에서 우리는 환자에서 유래한 1 x 106 개의 간세포를 TK-NOG 쥐의 비장에 주사하여 생착시켜 인간화 간 쥐 모델을 만들고자 하였다. 이때 TK-NOG 쥐는 50 mg/kg 용량의 ganciclovir를 복강 내 주사하는 전 처치를 거친 상태의 쥐를 이용하였다. 결과: TK-NOG 쥐의 간에서 인간 간세포가 생착하는 것이 관찰되었고 cytokeratin 8/18 염색을 통하여 인간 간세포가 시간이 지남에 따라 증식하는 것을 확인하였다. 또한 면역 염색법과 ELISA 검사를 통하여 TK-NOG쥐의 간과 혈장에서 인간 알부민 수치가 유의하게 증가하는 것을 확인하였다. 결론: 이러한 인간화 간 쥐 모델은 인간 간의 생리학적 특성이나 약물 대사, 바이러스에 기인하는 간의 병태생리 또는 간의 재생을 연구하는데 있어 중요한 도구로 사용될 것이다.

동아시아 분업구조 편입을 통한 북한경제 개선 가능성 연구

김상훈 성균관대학교 일반대학원 2016 국내박사

본 논문은 동아시아 분업구조에 북한을 편입시키는 것이 현재의 국제정치경제 상황을 고려한 가장 합리적인 북한 경제발전 전략임을 주장하며 그 가능성을 모색한다. 국제사회의 정치·경제 질서가 가장 정교하게 작동하는 분업체계 내로 북한을 편입시킴으로써 북한경제의 자생력을 제고시킬 수 있을 뿐만 아니라 나아가 국제관계 측면에서는 북한과 국제사회 간의 상호 신뢰구조가 확대될 수 있을 것이라는 주장이다. 이를 위하여 본 논문은 월러스틴(I. Wallerstein)의 ‘유치에 의한 촉진’ 전략을 통한 북한의 동아시아 분업구조 편입이 가능하고, 타당하다는 것을 경제적, 정치적 해석을 통해 입증하고 구체적인 편입 방안을 제시하였다. 가능성 확인을 위해 북한의 대외경제 의존 현황과 동아시아 GVC 현황을 검토한 결과, 현재 동아시아내 분업구조에서 발견되는 가장 큰 특징은 중국을 대신할 수 있는 새로운 생산기지가 필요한 상황이며, 저임금의 노동력, 원자재 공급을 위한 자원을 갖춘 북한은 새로운 생산기지로서 충분한 매력을 갖고 있다는 것이다. 타당성 확인을 위해 북한을 중심으로 한 최근 국제정치경제 질서를 검토한 결과, 패러다임의 전환을 통해 북한 문제에 접근할 필요가 있는 시기에 있음을 확인하고 이의 구체적 실천 방안으로 북한의 동아시아 분업구조 편입이 타당함을 주장하였다. 즉, 현재의 국제정세는 미중 패권경쟁 하에서 한반도의 지정학적 가치를 활용할 수 있는 시기이며 북한을 신뢰할 수 있는 협력 파트너로 만들기 위해서는 이전과 차별화된 전략이 필요한 시점에 있다는 것이다. 또한 북한의 분업구조 편입은 남북한 모두에게 충분한 정치·경제적 편익을 제공할 뿐만 아니라 동아시아 역내의 평화와 안정에 충분히 기여할 수 있으며 마지막으로 현재의 대북제재가 북한에게는 큰 의미 없는 제재 수단이 되기보다는 제재가 가지고 있는 본질적 의미, 나아가 최종적 목표에 다가서는 방법을 찾아야 한다는 의미에서도 북한의 동아시아 분업구조 편입 전략이 타당함을 확인하였다. 북한 역시 대외지향형 공업화, 생필품의 국산화, 자원개발 및 수출 그리고 저임금 노동력을 활용하기 위한 일련의 구조조정을 시도하고 있으며 그 성과로 북한은 노동력과 지하자원, 그리고 지정학적 관계라는 경쟁력을 갖출 수 있게 되었다. 이 세 가지 경쟁력은 북한의 동아시아 분업구조로의 편입 가능성을 더욱 높여준다. 더불어 현재 북한의 정치체제는 최고 권력자이건, 그 하부에서 북한 정치체제를 구성하는 권력자이건 간에 ‘체제 유지’와 ‘지대 추구’만을 위해 정책을 결정하는 구조를 형성하고 있으며 결국 생물학적·정치적 생존을 위해 분업구조 편입을 수용할 것임을 주장하며 북한의 동아시아 분업구조 편입 수용이 타당함을 제시하였다. 월러스틴이 ‘유치에 의한 촉진’ 전략이 성공하기 위해 필요하다고 강조한 3가지 세부전략 즉 자본축적, 주도산업 그리고 상승전략에서 북한은 지하자원 수출과 저임금 활용 위탁가공업 그리고 경제특구 전략을 통해 동아시아 분업구조에 편입할 수 있음도 도출하였다. 북한의 동아시아 분업구조 편입, 국제질서 체제로의 편입은 남한이 직면한 경제·사회적 위기를 타파하고 한반도의 안정과 미래 통일한국을 대비함에 기여할 것이며 또한 남한이 동북아에서 책임있는 리더의 역할을 보여주는 기회가 될 것이다. 무엇보다, 분업구조라는 상호주의 체제내에서 북한에 대한 신뢰 범위가 확대됨으로써 국제정치학의 시작점인 불확실성과 불신 문제를 감소시키는 결과를 가져올 것으로 기대한다. 오히려 북한이 동아시아 역내 분업구조에 편입하기를 바라기보다는 그렇게 만드는 것이 현재 국제사회의 현실적 과제가 될 것이다.

Optimal device for transportation of isolated porcine islet

김태석 성균관대학교 일반대학원 2013 국내석사

Introduction Multicenter consortium for human or porcine islet transplantation and research is preferable around a single islet isolation facility. In this study, we investigated the optimal method for transportation of isolated porcine islet from the isolation facility to the transplant hospital or research center in terms of temperature, oxygen supply and shaking effect. Methods Commercially available insulator boxes with thermo-regulators were used as a container to maintain an internal temperature close to target value of 22 ℃. Experimental containers were exposed for 5 hours under two external temperature (4 and 37 °C) and monitored using HOBO® temperature loggers. To compare the effects of transportation devices on the islets, we compared conical tubes, gas-permeable bags (GPB) and gas-permeable flasks (GPF). After 1, 3 and 5 hours, islet counts, AO/PI staining, assessment of ADP/ATP ratio and glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) were performed. To evaluate the shaking effect on islets, we also analyzed the difference between the control group and shaking group in each device with time. Results Commercially available Styrofoam insulators with thermo-regulators were able to maintain the internal temperature near the target temperature. Islet recovery rate for GPF was higher than other devices and was maintained with time, while that for conical tube and GPB decreased with time. ADP/ATP ratio for GPF was lower than other devices, although statistical significance was not shown. AO/PI ratio for GPF was higher than other devices after 5 hours. Assessment of endocrine function by GSIS was not different between the 3 devices. Compared to the control group, the shaking group was comparable in islet survival, viability and function, except AO/PI ratio and GSIS after 5 hours. Conclusion Our study demonstrated that the use of commercially available insulator boxes with thermo-regulators can maintain internal temperature close to target value and GPF is more favorable for islet oxygenation during transportation. This study also showed the effect of shaking on isolated porcine islets is negligible during transportation. However, in vivo study for islet transplantation are needed to confirm these results.

노무현정부의 정책결정과정과 관료정치에 관한 연구 : 외교안보정책과 경제정책비교

곽동진 성균관대학교 일반대학원 2012 국내박사

논문요약 노무현 정부의 정책결정과정과 관료정치에 관한 연구 - 외교안보정책과 경제정책 비교- 본 논문은 정책은 정책참여자들간의 관료정치에 의해 결정되기 때문에 ‘국민의 선택에 의해 국정운영의 책임을 맡은 정치적 행정부가 정치적 통제부로 발전할 경우 정치적 행정부의 정책의지가 관철되기 쉽다’를 가설로 설정하고, 사례연구를 통해 이를 검증한다. 가설은 정치세력이 제기한 정책의제가 국가 정책으로 확정된 사례와 반대로 관료들의 선호정책이 관철된 사례를 선정하여 정책결정과정을 비교 분석함으로서 검증한다. 그리고 분석 결과로부터 정치세력의 의지가 정책결정과정에서 관철되는 조건과 구조를 모색한다. 이러한 작업은 국민들이 선거를 통해 정치적 행정부에게 국정운영의 책임을 위임했다는 점에서 정치적 행정부의 정책의지 관철은 민주주의의 기본 원리인 대표성, 책임성의 실제구현과도 관계가 있다. 국가 정책은 정책 참여자들간에 아무런 갈등없이 합리성에 기초한 최선의 대안이 선택되는 경우는 거의 없다. 국가정책은 국민에게 직․간접적인 영향을 미치기 때문에 민주주의 체제의 정책결정과정에는 서로 상이한 이해관계를 가진 사람들이 참여함에 따라 정책갈등은 필연적으로 발생한다. 따라서 정책의제가 정책으로 결정되기 위해서는 정책갈등 조정이 필요하게 되고, 정책조정은 정책과정에 참여하는 정책참여자들의 밀고 당기는 관료정치에 의해 해소된다. 이때 정책참여자는 공식적 참여자와 비공식 참여자로 분류된다. 공식적 참여자는 대통령, 정치적 행정부, 관료, 의회이며, 비공식 참여자는 정당, 이익집단, 언론 등이다. 정책갈등의 해소 방향은 이들 참여자들이 갖고 있는 관료정치권력의 크기에 의해 결정된다. 사례연구로 정치세력의 정책의지가 관철된 사례로 외교안보분야의 ‘협력적 자주 국방정책’ 및 ‘한미동맹 재조정’정책을, 관료 정책의지가 관철된 사례로 경제분야의 ‘출자총액제한제도’ 및 ‘금산법’을 선정하여 분석했다. 외교안보분야에서는 제도측면에서 국가안전보장회의 사무처(NSC)를 매개로 하여 정치적 행정부가 관료를 통제․관리할 수 있었고, 정책기획에서부터 집행, 평가까지 할 수 있는 정책 환경을 갖추어 정치적 통제부로 역할을 수행할 수 있었다. 그리고 행위자 측면에서도 노대통령과 정치적 행정부의 정책이념 및 정책목표가 확고하여 관료의 정책의지를 무력화 하는 전략을 적극 사용하면서 정책기조와 선호정책을 관철시켰다. 이에 반해 경제분야는 제도적으로 정치적 행정부가 경제관료를 정책결정과정에서 통제․관리할 수 없었고, 정치적 행정부 구성원의 인적 자원도 작았다. 또한 행위자측면에서 대통령은 경제민주주의보다 시장자유주의 정책지향성에 경도되었기 때문에 대통령의 정치적 지지는 정치적 행정부보다는 경제관료에게 많이 분포되었다. 결국 제도와 행위자 측면에서 대통령을 포함한 외교안보분야 정치적 행정부는 ‘정치적 통제부’로 발전할 수 있었기 때문에 정치적 행정부의 정책의지를 관철 시킬 수 있었다. 그러나 경제분야 정치적 행정부는 제도와 행위자 측면 모두 관료의 정책권력보다 약했기 때문에 경제관료 통제에 실패했다. 따라서 ‘국민의 선택에 의해 국정운영의 책임을 맡은 정치세력’이 정책기조와 선호정책을 관철시키기 위해서는 먼저, 대통령과 정치적 행정부가 정책이념이 확고해야 하며, 정치적 행정부가 정치적 통제부로 기능해야 한다.