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Functional analysis of PDCD4 on the assembly of stress granule
박라영 Chosun University 2014 국내박사
Programmed cell death 4 (PDCD4)는 새로운 종양 억제자이고 핵과 세포질에서 전사와 번역을 조절하는 기능을 한다. Stress granules (SGs)는 세포가 환경적 스트레스에 노출이 되면 비번역 mRNA가 축적된 세포질 군집을 일컫는다. 한때 PDCD4는 진핵세포의 번역개시인자 4A (eIF4A) 억제를 통하여 번역 억제와 연관이 있는 것으로 알려졌다. 여기서 우리는 PDCD4가 산화적 스트레스에서 SG 형성의 과정에 기능적인 역할을 하는지 연구했다. 우리는 면역형광염색법을 이용하여 산화적 스트레스에서 PDCD4가 SGs에 국한되는 것을 발견했다. 다음에 우리는 PDCD4 특이적 siRNA를 사용하여 감소된 PDCD4가 SG 형성에 영향을 주는지 평가했다. 흥미롭게도 SG 형성이 eIF2α의 인산화와 eIF4E 결합 단백질 (4E-BP) 의 탈인산화의 결과로 촉진되어지는 것을 확인했다. 우리는 PDCD4의 감소는 polysome disassembly을 촉진 시키고 과산화수소 스트레스에서 eIF4F 복합체를 파괴시키고 eIF4E:4EBP 상호작용을 강요한다. 게다가, PDCD4의 과발현은 스트레스 상태에서 SG 형성을 감소시킨다. 이러한 결과는 PDCD4가 SG에 역학적인 역할 형성에 관여하고 스트레스 상태에서 cap 의존성 번역 억제에 관여 한다는 것을 밝혔다. Programmed cell death 4 (PDCD4) is a novel tumor suppressor that function in the nucleus and the cytoplasm and appears to be involved in the regulation of transcription and translation. Stress granules (SGs) are cytoplasmic foci at which untranslated mRNAs accumulate when cells exposed to environmental stresses. Since PDCD4 has implicated in translation repression through direct inhibition of eukaryotic translation initiation factor 4A (eIF4A), we here investigated if PDCD4 has a functional role in the process of SG assembly under oxidative stresses. Using immunofluorescence microscopy, we found that PDCD4 is relocalized to SGs under oxidative stresses. Next, we tested if knockdown of PDCD4 has an effect on the assembly of SG using PDCD4-specific siRNA. Interestingly, SG assembly was accelerated and this effect was caused by sensitization of phosphorylation of eIF2a and dephosphorylation of eIF4E binding protein (4E-BP). We demonstrate that knockdown of PDCD4 accelerated polysome disassembly and causes eIF4F complex disruption and ehances eIF4E:4EBP1 interaction under H2O2 stress. Moreover, Overexpression of PDCD4 decrease stress granule assembly under stress conditions. These results suggest that PDCD4 has an effect on SG dynamics and possibly involved in cap-dependent translation repression under stress conditions.
이유림 Kyungpook National University 2018 국내박사
배경 / 목적 : 급성 정맥류 출혈은 간경변 환자에서 중대한 이환율 및 사망률과 연관되어 있다. 그러나 간세포암 환자에서 급성 정맥류 출혈의 치료 결과와 예후인자는 명확히 밝혀지지 않았다. 본 연구에서는 간세포암 환자에서 급성 정맥류 출혈의 치료결과와 예후 인자를 간세포암을 동반하지 않은 급성 정맥류 출혈 환자와 비교하여 조사하였다. 방법 : 2007년부터 2013년까지 간경변으로 인한 급성 정맥류 출혈 환자를 대상으로 한 전향적 연구를 시행하였다. 급성 정맥류 출혈 환자들은 혈관 작용성 약물, 예방적 항생제 사용, 내시경적 지혈술을 시행하였다. 간세포암의 유무에 따른 급성 정맥류 출혈의 치료실패, 재출혈, 사망률을 조사하였다. MELD score, Barcelona Clinic Liver Cancer (BCLC) 병기를 포함한 여러 임상 변수와 5일 내 치료실패, 6주 사망률과의 관련성을 다변량 cox 생존분석을 이용하여 분석하였다. 결과 : 총 329명의 급성 정맥류 출혈 환자 중, 125명 (38.0%) 은 간세포암이 동반된 급성 정맥류 출혈 환자, 204명 (62.0%) 은 간암이 없는 간경변 환자였다. 급성 정맥류 출혈의 5일 내 치료실패는 간세포암군 및 비간세포암 군에서 각각 22명 (17.6%), 11명 (5.4%) 이었다 (P<0.001). 간세포암군 및 비간세포암 군에서 각각 33명 (26.4%), 16명 (7.8%) 의 환자가 6주 내 사망하였다 (P<0.001). 간경변의 합병증인 간부전과 간신증후군 및 급성 정맥류 출혈로 인한 재원일수 역시 간세포암 환자에서 비간세포암군에 비하여 유의하게 높았다 (각각 P=0.001, P=0.009, P=0.003). 전체 급성 정맥류 출혈 환자 및 간세포암군의 다변량 분석에서, 6주 사망률은 두군 모두에서 성공적인 내시경적 지혈, MELD score과 통계적으로 유의한 연관성을 보였다 (HR 4.838, 95% CI 1.741–11.033, P=0.002; HR 1.145, 95% CI 1.055–1.243, P=0.001). 또한 간세포암 환자에서 BCLC 병기 (C or D vs. 0–B) 는 추가적으로 6주 사망률의 독립적인 예측 인자로 선정되었다 (HR 3.096, 95% CI 1.204–7.960, P=0.019). 간세포암군에서 MELD score (≥ 15.5)와 진행된 병기 (BCLC stage C or D)의 간세포암 환자의 6주 사망률은 MELD score (<15.5) 와 낮은 병기 (BCLC stage 0–B)의 간세포암 환자에서보다 21배 높았다 (P<0.001). 결론 : 급성 정맥류 출혈 환자에서 5일 내 치료실패, 6주 사망률은 간세포암을 동반한 환자에서 유의하게 높다. 또한 MELD score (≥ 15.5)와 진행된 병기 (BCLC stage C or D)의 간세포암은 급성 정맥류 출혈 환자에서 6주 사망률의 강력한 예측인자로 밝혀졌다. 이 연구를 뒷받침할 수 있는 추가 연구가 필요할 것이다.
Naqvi, Syed Asad Ali University of Science and Technology 2015 국내석사
SOFC converts chemical energy into electrical energy efficiently and the end product is mainly carbon di-oxide which can be collected easily and utilized in other industrial process. However, sluggish kinetics due to solid fuel is a hindrance and inhibits the long term usability of SOFC. Steam gasification of carbon fuel can be utilized to overcome sluggish kinetics of SOFC reactions The objective of this study is to operate and get electrochemical performance of a carbon fuel cell on steam gasification of different types of carbon fuels. Syngas was produced as a result of steam gasification of carbon fuels. Activated carbon and charcoal were used as carbon fuels. A catalyst was also added in carbon fuel to study the effect of catalytic activity on steam gasification of carbon fuels. The effects of temperature and flow-rates on composition of syngas were studied. This produced syngas was then fed to SOFC and electrochemical performance was obtained. In addition to electrochemical performance, long term galvanostatic (constant current) test were also performed to study the degradation of SOFC operating on syngas. Firstly, carbon fuel cells were fabricated. Porous anode supports were extruded. Dip-coating procedure was used to deposit thin layer of AFL (Anode functioning layer) and layered cathode (composed of a LSM/YSZ composite, LSM and LSCF), where as to coat a layer of YSZ electrolyte Vacuum slurry procedure was used In this study, the operating temperature for steam gasification and electrochemical performance were 700 oC, 750 oC, 800 oC, 850 oC and at each operating temperature; steam flow rates were varied from 100ccpm to 500ccpm. It was observed during steam gasification experiments: that with increase of temperature syngas (H2 + CO) amount increased. Whereas CH4 amount almost remained constant. CO2 amount was decreased with increase of temperature. Finally steam gasification setup was integrated to SOFC, and electrochemical data was obtained. SOFC was operated at different temperature ranges from 700 oC to 850 oC. Steam flow rates were also varied at each temperature range. Carbonaceous fuels which were used were Activated carbon, Activated Carbon with K2CO3, biomass derived charcoal. Apart from IVP curves SOFCs were also tested for a long time period for 500 hours at galvanostatic conditions. Microstructural analysis was also made in this study of the cross section of the SOFC samples to understand the delamination of anode and cathode layer, under galvanostic conditions for long time period. EDS analysis was also performed on these samples to study the distribution of the elements.