TNF-$\alpha$와 IL-1 자극에 의한 제대정맥내피세포에서의 IL-8 및 GRO/MGSA의 발현

송정섭,신문선,안중현,문화식,박성학,Song, Jeong-Sup,Shin, Moon-Sun,Ahn, Joong-Hyun,Moon, Hwa-Sik,Park, Sung-Hak The Korean Academy of Tuberculosis and Respiratory 1999 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.46 No.3

연구배경: 호중구는 급성염증이 있을 때 존재하는 제일 많은 세포로서 폐의 염증이 있을 때에도 말초혈액에서부터 이동됨과 동시에 활성화된 호중구에서 분비하는 단백분해효소, 산화물 및 여러 가지 cytokine등에 의해 염증이 더욱 심해지고 호중구의 이동이 더욱 증가되는 것으로 알려져 있다. 호중구의 이동을 증가시키는 물질로 현재까지 LTB4, PAF, C5a, fMLP, TNF, IL-8 등이 밝혀져 있으며 특히 IL-8은 chemokine이라고 부르는 조그만 cytokine에 속하며 GRO/MGSA는 IL-8과 같은 C-X -C subgroup에 속하는 단백질로서 이 유전인자는 PF-4, IL-8등과 같은 chromosome 4q12-q21에 위치한다. IL-8이 호중구의 이동 및 활성화에 강력한 영향을 미치는 것은 잘 증명되어 있지만 같은 C-X-C subgroup에 속하며 최근에 발견된 GRO/MGSA의 기능 및 발현과정 등에 대해서는 잘 밝혀져 있지 않다. 내피세포는 TNF$\alpha$나 IL-1$\beta$ 등의 자극을 받으면 호중구의 유착을 돕는 접착분자 및 IL-8등의 생성이 증가되는등 염증반응에 능동적인 역할을 한다고 밝혀지고 있다. 저자들은 인체의 제대정맥에서 내피세포를 분리하여 TNF나 IL-1로 자극을 가하였을때 호중구의 이동을 증가시키는 IL-8이나 GRO/MGSA mRNA의 발현과 분비가 일어나는지 또한 호중구 화학주성에 미치는 각각의 기여도를 비교, 관찰하고자 하였다. 방 법: 제대정맥에서 내피세포를 분리, 배양하고 여기에 TNF-$\alpha$ IL-1$\beta$ 등을 0.2, 2, 20 ${\mu}g/ml$ 농도로 자극을 가하고 1, 4, 8, 24 시간이 경과하여 IL-8 및 GRO/MGSA mRNA의 발현을 RT-PCR로 관찰하고, 배양상층액내 IL-8 및 GRO/MGSA의 양을 ELISA로 측정하였으며 상층액의 호종구 화학주성 활성화도를 Neuro Probe 48 well chemotactic chamber를 이용하여 측정하였다. 결 과: 제대정맥 내피세포에 TNF-$\alpha$ 및 IL-1$\beta$로 자극하였을 때 내피세포에서의 IL-8 mRNA는 1 시간후부터, GRO/MGSA mRNA의 발현은 4 시간후부터 각각 관찰되었으며 TNF-$\alpha$ 및 IL-1$\beta$의 자극농도에 따른 뚜렸한 차이는 없었다. TNF-$\alpha$ 및 IL-1$\beta$로 자극한 내피세의 배양상층액에서 측정한 IL-8도 1시간후부터 현저히 증가되었고 GRO/MGSA의 양은 4시간후부터 현저히 증가되어 있었다. TNF-$\alpha$ 및 IL-1$\beta$로 자극한 내피세포의 배양상층액의 호중구 화학주성활성화도는 각각으로 1시간 자극 후에 현저히 증가되어 있었다. 결 론: 이상의 결과에서 제대정맥 내피세포를 TNF-$\alpha$ 및 IL-1$\beta$로 자극시 IL-8 및 GRO/MGSA mRNA 발현 및 단백이 분비되며, 특히 IL-8은 1시간 후에 GRO/MGSA는 4 시간후에 각각 증가되고 호중구화학주성활성화는 1시간후부터 최고치로 증가됨을 관찰하여, GRO/MGSA보다는 IL-8 이 호종구유주인자로서의 중요한 역할을 할것으로 생각된다. Polymorphonuclear leukocytes(PMN) are the predominant inflammatory cells recruited in acute lung injury such as adult respiratory distress syndrome, pneumonia and also chronic lung disease such as idiopathic pulmonary fibrosis and pulmonary emphysema. Interleukin-8(IL-8) is an 8,000 D protein produced by many cells and has potent neutrophil chemoattractant and activating properties. The GRO, also called melanoma growth-stimulatory activity(MGSA), referring to a peptide of 73 amino acids, was reported to be mitogenic for cultured human melanoma cells. Mature GRO/MGSA has marked sequence similarity to IL-8. In view of the structural similarities to IL-8, it was of particular interest to test GRO for neutrophil activating and chemotactic properties. We found a significant release of IL-8 and GRO/MGSA from the cultured human umbilical vein endothelial cell(HUVEC) which was stimulated either with TNF$\alpha$ or IL-1$\beta$ and also found the expression of IL-8 and GRO/MGSA mRNA. Neutrophil chemotactic activity was enhanced in accordance with the increased IL-8 and GRO/MGSA. Our study also suggest that the IL-8 is more important in the increased neutrophil chemotactic activity than GRO/MGSA when endothelial cell is stimulated with TNF$\alpha$ or IL-1$\beta$ in vitro.

Mechanism of Decrease in Lung Injury by Low Dose of Endotoxin During Hyperoxia in the Rats

송정섭,윤형규,김영균,김관형,문화식,박성학,Song, Jeong-Sup,Yoon, Hyung-Kyu,Kim, Young-Kyoon,Kim, Kwan-Hyung,Moon, Hwa-Sik,Park, Sung-Hak The Korean Academy of Tuberculosis and Respiratory 2002 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.53 No.2

배 경 : 쥐를 고농도의 산소에 60시간 이상 노출시켰을 때 급성 폐손상이 유발되지만 내독소를 저용량으로 투여시에는 이러한 폐손상이 경감된다고 알려져 있으나 그 기전에 대하여는 확실히 밝혀지지 않고 있다. 산화질소(nitric oxide, NO)는 내독소나 염증성 사이토카인(cytokine) 등의 자극에 의해서 폐내 여러 염증세포에서 만들어지며 이 산화질소는 경우에 따라 우리 몸에 이롭거나 해로운 양면성을 지니고 있다. 저자들은 쥐에서 고농도의 산소에 의한 폐손상이 저농도의 내독소 투여로 경감되는 기전에, 산화질소가 중요한 역할을 하는지 또는 황산화효소나 다른 항염증성 사이토카인이 중요한 역할을 하는지를 규명하고자 하였다. 방 법 : 총 120마리의 쥐 (Sprague-Dawley rat)를 24마리씩 5군으로 나누어 대조군은 실내 공기를, 고농도 산소군은 100%의 산소를 100%의 산소를 60시간 투여하였고 내독소군은 100% 산소 투여시 2일간 저용량의 내독소를 투여하였다. 다른 두 군은 산화질소 합성 억제물인 aminoguanidine(AG)과 N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME)를 각각 2일간 고농도 산소와 내독소에 더하여 투여하였다. 각각의 군에서 폐손상의 정도와 사망률을 관찰하고 superoxide dismutase(SOD), catalase, nitric oxide, IL-6, IL-11을 기관지폐포세척액에서 측정하고, 고농도산소 투여군의 폐조직에서 iNOS synthase rnRNA의 발현을 비교하였다. 결 과: 1. 100%의 산소에 60시간 노출시켰을 때 쥐의 사망률은 8.3% 이었고 내독소 투여군은 4.2%, NAME 투여군이 37.5%, AG 투여군이 25%로 산화질소 합성 억제제에 의하여 사망률의 증가가 관찰되었다. 2. 폐의 손상 정도를 나타내는 폐의 wet/dry 중량비와 늑막액도 100%의 산소에 노출된 군에서 증가되었고 내독소 투여에 의하여 감소되었으며 NAME나 AG 투여군에서는 오히려 증가되었다. 3. 이러한 내독소에 의한 폐손상 억제효과가 항산화효소인 SOD나 catalase, 또는 protective cytokine인 IL-6나 IL-11등의 증가와 관련이 있는지를 관찰하였으나 이들 모두에서 유의한 변화를 관찰하지 못하였다. 4. 산화질소는 100% 산소에 노출시킨 군에서도 증가하였으나 내독소 투여군에서 유의하게 더욱 증가하였고 이는 L-NAME 나 aminoguanidine의 투여시 감소하였다. 5. iNOS mRNA의 발현도 내독소 투여군에서 유의하게 증가하였다. 결 론 : 쥐의 고농소 산소 투여에 의한 폐손상은 저용량의 내독소 투여로 경감되며, 이는 주로 내독소 투여에 의한 iNOS mRNA의 발현을 유도하여 생성된 산화질소의 증가에 기인하는 것으로 생각된다.

Ionic Hydrogenation of Carbonyl Groups With Molybdenum and Tungsten Complexes

송정섭(Song Jeong-Sup) 한국산학기술학회 2006 한국산학기술학회논문지 Vol.7 No.4

CO와 유사한 분자궤도함수를 갖는 isocyanide 리간드가 포함된Cp(CO)₂(L)MH (L = t-butylisocyanide and2,6-dimethylphenylisoeyanide M - Mo and W)를 합성하고, 이 착물과 triflic acid를 사용하여 카므보닐기를 알코올로 전환시키는 실험을 하였다. 또한, 이들 착물을 촉매 전구체로 이용하여 3-pentanone의 수소화 반응을 온화한 조건 (23℃, <4.1 atm H₂)에서 수행하였다. 촉매 활성은 매우 ‘낮았으며, [Cp(CO)₂(ArNC)Mo] [BAr^F₄]의 경우에 2 turnovers/day의 결과를 나타내었다. Metalhydrides such as Cp(CO)₂(L)MH (L = t-butylisocyanide and 2,6-dimethylphenylisocyanide M = Mo and W) have been synthesized and used for ionic hydrogenation of the carbonyl groups in the presence of triflic acid. When these complexes have also used as catalyst precursors for hydrogenation of 3-pentanone under mild conditions (23℃, <4.1 atm H₂).The turnover rates were very slow, with the fastest initial rate of about 2 turnovers per 1 day for the [Cp(CO)₂(ArNC)Mo][BAr^F₄] system.

폐결핵환자의 폐포대식세포 및 말초혈액내 단구세포에서 분비하는 과산화음이온의 비교 관찰

송정섭 ( Jeong Sup Song ),이숙영 ( Suk Young Lee ),장지정 ( Jie Jung Jang ),김영균 ( Young Kyoon Kim ),김관형 ( Kwan Hyoung Kim ),문화식 ( Hwa Sik Moon ),박성학 ( Sung Hak Park ) 대한결핵 및 호흡기학회 1994 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.41 No.1

북한의 유기농법 사례분석

송정섭(Jeong-Sup Song),김정애(Jung-Ae Kim),김대혁(Dae-Hyuk Kim),박숙영(Sook-Young Park),김양선(Yangseon Kim) 한국토양비료학회 2022 한국토양비료학회 학술발표회 초록집 Vol.2022 No.10

A 60 항원을 이용한 ELISA 로서 관찰한 결핵의 혈청학적 진단

송정섭(Jeong Sup Song),이숙영(Sook Young Lee),권순석(Soon Seog Kwon),김영균(Young Kyoon Kim),김관형(Kwan Hyoung Kim),문화식(Hwa Sik Moon),박성학(Sung Hak Park) 대한내과학회 1994 대한내과학회지 Vol.47 No.5

N/A Objectives: In the diagnosis of pulmonary tuberculosis, it depends largerly on the demonstration of tubercle bacilli in the sputum of patients and chest X-ray. Such conventional methods have many drawbacks, i.e., from extrapulmonary disease, and from children, who characteristically do not produce sputum. Recently, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) test has been developed for the serodiagnosis of tuberculosis. Antigen 60 (A60) belongs to the group of thermostable macromolecular antigens and is the principal constituent of old tuberculin (OT) and purified protein derivative (PPD), We used an ELISA for detection of the serum IgG and IgM antibody against the A60 antigen to know whether it can be used in the diagnosis of tuberculosis, Methods: We did this study in 79 Tbc patients including extrapulmonary Tbc and 32 controls including various forms of respiratory disease other than pulmonary Tbc. ELISA for IgG and IgM were carried out using the multiwell microtitration plates which were coated with 1.5 ㎍ of A60. 100ul of each patient and control`s serum diluted 1: 100 was distributed in microtitration plastes. The enzymatic reaction was read at 450nm and the results expressed in optical density (OD) units. Sera were considered positive for IgG antibody against A60 antigen if the OD value was above the mean level measured in the control group plus 2 standard deviation. Result: IgG antibodies against A60 antigen were 198.53±162.05 and 825.75±635.98unit/ml in control and tuberculosis group (p<0.01), IgM antibodies against A60 antigen were 0.44±0.42 and 0.60±0.44 in control and tuberculosis group (p>0.05). Serum IgG antibody for A60 antigen were more increased in moderate and far advanced pulmonary Tbc patients (985.52±608.99) than in minimal Tbc (545.0±573.6)(p<0.05). Diagnostic sensitivity and specificity were 43.6% and 100% in sputum AFB smear, 68.4%. and 100g in sputum AFB PCR, 64.1% and 84.4% in IgG antibody, 32.7% and 88.9% in IgM antiboday for A60 antigen. Positive predictive value of IgG antibody for A60 antigen is 90.9% and negative predictive value is 49.1%. Four of the seven extrapulmonary tuberculosis were positive in IgG antibody against A60 antigen. Analysis of pseudopositive cases in control group revealed that 2 were old pulmonary Tbc and recent history of Tbc treatment and another 2 had respiratory disease other than Tbc. There were no positive cases in normal controls among those who had no respiratory disease or Tbc treatment history. Conclusion: Serum lgG antibody measurement against A60 antigen were considered useful in the diagnosis of tuberculosis, especilly the case of sputum AFB study is very difficult such as in childhood and minimal Tbc including various forms of extrapulmonary Tbc.

유육종증환자의 기관지폐포세척액내 Interleukin에 대한 연구

송정섭 ( Jeong Sup Song ),안중현 ( Joong Hyun Ahn ),김치홍 ( Chi Hong Kim ),김관형 ( Kwan Hyoung Kim ),문화식 ( Hwa Sik Moon ),박성학 ( Sung Hak Park ) 대한결핵 및 호흡기학회 1998 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.45 No.5

이합체성 올리고디옥시리보핵산의 합성

송정섭(Song Jeong-Sup) 한국산학기술학회 2007 한국산학기술학회논문지 Vol.8 No.6

생리학적 활성을 가지고 있을 것으로 예측되는 디-아세틸렌 결합으로 연결된 oligodeoxyribonucleotide를 합성하였다. Pd(0)촉매를 사용한 Heck-type C-C 결합반응을 통하여 2‘-deoxyuridine의 5-위치에 acetylene 기를 도입하고, 5’-OH를 t -butyldimethylsilyl로 보호한 후, Glaser oxidative coupling 반응을 이용하여 dimerization을 시켰다.

각종 간질성폐질환에서 폐포 대식세포의 Superoxide 분비능과 식균 작용

송정섭(Jeong Sup Song),김영균(Young Kyoon Kim),김관형(Kwan Hyoung Kim),한기돈(Ki Don Han),문화식(Hwa Sik Moon),신완식(Wan Shik Shin),박성학(Sung Hak Park) 대한내과학회 1990 대한내과학회지 Vol.39 No.3

N/A Interstitial lung diseases are a heterogenous group of disorders characterized by various degrees of parenchymal alveolitis and fibrosis. Alveolar macrophages (AM) are the predominant inflammatory cell type within alveolar structures and function not only as phagocytic cells but also as secretory cells that release various secretory products involving oxygen metabolites. Alveolar macrophages from patients with interstitial lung disease are thought to participate in the injury to the alveolar wall and contribute to the development of interstitial fibrosis. To investigate the role of alveolar macrophages in interstitial lung diseases, we measured the amount of superoxide release and phagocytosis by AM after bronchoalveolar lavage (BAL) from the normal controls and cases with interstitial lung diseases. The results were summerized as follows: 1) The total number of inflammatory cells in the BAL fluids increased more in patients with interstitial lung diseases than in the controls (p<0.02). 2) The differential cell count of BAL inflammatory cells showed that lymphocytes were predominant in sarcoidosis, hypersensitivity pneumonitis, and collagen lung disease, while neutrophils were predominant in idiopathic pulmonary fibrosis and bleomycin-induced pneumonitis. 3) The superoxide release by AM in patients with interstitial lung diseases was higher than the normal controls, either spontaneously or after stimulation by phorbol myristate acetate (PMA)(p<0.05). 4) The phagocytosis of non-opsonized staphylococcus aureus by AM was elevated in the interstitial lung disease cases (p<0.02), but no difference was noted when using the opsonized staphylococcus aureus as a target. These results suggest that AM are activated in interstitial lung diseases, and increased production of oxidant by AM in interstitial lung diseases may play a critical role in tissue damage and pulmonary fibrosis. Elevation of oxygen metabolite release by AM could be a useful marker in the assessment of the activity of interstitial lung diseases.

유육종증

송정섭 ( Jeong Sup Song ) 대한결핵 및 호흡기학회 1998 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.45 No.1