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      • SCOPUSKCI등재

        내열성세균에 관한 연구 2 (제 2 ) 기성세균의 내열성에 관하여

        이계호,장건형 한국미생물학회 1966 미생물학회지 Vol.4 No.2

        The purpose of this paper is to study on the thermal death time curve and F-values, and morphological and physiological characteristics observed for the identification. The three strains of thermal resistancing anaerobic bacteria isolated from unheated various cans and swelled cans and the different soils collected from the wide area in Korea. The results obtained in the light of the manual of Bergeg's for the identification of the anareobic bacteria have been shown that the three strains of anaerobic bacteria are pertained to Cl. sporogenes B-41 Cl. butyricum B-72 & Cl.. botulinum Type E B-163. The optimum temperature, pH and thermal resistance, thermal death point of the anaerobic have been measured.

      • SCIEKCI등재

        농산폐기물(農産廢棄物)에서 발효사료(醱酵飼料)의 생산(生産)에 관(關)한 연구(硏究)[제4보(第四報)] -Aspergillus niger와 Trichoderma viride에 의(依)한 Cellulase의 생산성(生産性)에 관(關)하여-

        이계호,고정삼,이강흡,Lee, Ke-Ho,Koh, Jeong-Sam,Lee, Kang-Hup 한국응용생명화학회 1976 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.19 No.3

        전보(前報)에서 검토한 효소생산 최적조건에서 생성하는 cellulase의 특성(特性)에 대한 실험(實驗)을 행(行)하여 다음의 결과(結果)를 얻었다. 1. 조정제시(粗精製時)에 $(NH_4)_2SO_4$가 0.6포화도일 때 그리고 ethanol 농도(濃度)가 $80{\sim}90%$일 때 회수성(回收性)이 가장 좋았다. 2. 두 균주가 생산한 cellulase의 효소작용 최적 조건은 다음과 같다. Asp. niger-SM6 T. viride-SM10 최적(最適) pH 3.5 4.0 pH 안정성(安定性) $3.0{\sim}6.0$ $3.0{\sim}6.0$ 최적온도(最適溫度) $60^{\circ}C$ $60^{\circ}C$ 열안정성(熱安定性) $60^{\circ}C$이하(以下) $50^{\circ}C$이하(以下) 최적작용시간(最適作用時間) 30분(分) 60분(分) 최적기질농도(最適基質濃度) 3% 3% 3. CMCase에 대한 Km치(値)는 Aspergillus niger-SM6이 0.8%, Trichoderma viride-SM10이 1.01%였다. 4. Aspergillus niger-SM6은 xylanase 및 pectinase도 높은 활성(活性)을 가지고 있었다. In order to investigate the properties of enzymes from two strains of mold, reported in the previous paper, (1) studies have been made concerning the characteristics of cellulase of Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, and summarized as follows. 1. In the semi-purification the recovery of ${\beta}-glucosidase$ was the highest when 80-90% ethanol was used and 0.8 saturation of $(NH_4)_2SO_4$. 2. The characteristics of the semi-purified enzyme were as follows. Aspergillus niger-SM6 Trichoderma viride-SM10 Optimum pH 3.5 4.0 pH stability 3.0-6.0 3.0-6.0 Optimum temperature $60^{\circ}C$ $60^{\circ}C$ Heat stability below $60^{\circ}C$ below $50^{\circ}C$ Optimum reaction time 30 min. 60 min. Optimum CMC concentration 3% 3% 3. The Km values of CMCase were 0.8% and 1.01 for Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, respectively. 4. In the strain of Aspergillus niger-SM6, there were high activity of xylanase and pectinase.

      • SCIEKCI등재

        섬유질자원(纖維質資源)의 사료(飼料) 전환(轉換)

        이계호,성창근,정규옥,Lee, Ke-Ho,Sung, Chang-Geun,Chung, Kyu-Ok 한국응용생명화학회 1984 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.27 No.suppl.

        속성수로서 현재까지 이용연이 그리 넓지 못한 활엽수(闊葉樹)를 이용(利用)한 당화액(糖化液)으로 단세포단백질(單細胞蛋白質) 생산(生産)에 의(依)한 사료화(飼料化) 전환(轉換)에 관(關)한 기초적(基礎的)인 몇가지 실험(實驗)을 한 결과(結果)는 아래와 같다. Aspergillus niger sm-10, Irpex lacteus, Tricoderma viride sm-6 3균주(菌株)의 셀룰라아제 역가(力價)를 비교(比較)해 본 결과(結果) Tricoderma viride sm­6 의 역가(力價)가 가장 높았으며, 이들을 combination하였을 때에는 상조에 의한 역가상승(力價上昇)(Synergistic effect)은 보이지 않았다. T. viride sm-6의 배양학적(培養學的)인 면을 살펴본 결과(結果) 밀기울배지에 질소원으로서 proteose peptone, 유도제 (inducer)로서 Tween 80, cellulose를 첨가(添加)했을때 역가증가(力價增加) 현상(現象)이 나타났으며 이와 같은 배지에서 배양시(培養時) C.M. Cellulose와 Filter paper 분해 효소역가(酵素力價)는 120hr에 최고에 도달(到澾)했다. 기질(基質)에 효소(酵素)를 반응(反應)시켜 당화액(糖化液)을 생성(生成)하는데 있어서 전처리(前處理)를 한 기질(基質)은 대조주에 비해 약 40%의 환원당 증가(增加)를 보였고, 또한 기질입자(基質粒子)가 작을수록 환원당 증가현상(增加現象)을 보였으며 글루코스 등의 당(糖)은 반응액중(反應液中) 적은 농도(濃度)에서도 커다란 feed back inhibition현상을 나타냈다. 기질(基質)을 rehydralysis시에는 약 31%의 환원당 전환율(轉換率)을 보였다. 이때 당화액(糖化液)을 정량해 본 결과(結果) glucose : xylose의 양이 1.77:1로서 glucose의 양이 많았다. 여기에 단세포(單細胞) 단백질(蛋白質)을 생산(生産)할 목적(目的)으로 부식토, 퇴비, 수액, 토양등의 42점의 시료로부터 xylose 자화성 효모(酵母) 13균주(菌株)를 선별하였으며 그때의 우수균주(優秀菌株)로서 3개균주(個菌株)를 선발(選拔)하였다. 이들 분리주의 배양학적(培養學的) 특징(特徵)을 살펴 본 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 분리주중(分離株中) CHS-2, CHS-3, ST-40, CHS -12, CHS-13 균주(菌株)가 당화액(糖化液)을 잘 자화함을 알았다. 2. 분리균주중(分離菌株中) CHS-13 균주(菌株)의 생육도(生育度)가 가장 양호하였으며 초기 최적 pH는 4.4이었으며 최적온도(最適溫度)는 $30^{\circ}C$이었다. 3. CHS-3 균주(菌株)의 specific growth rate는 $0.23\;h^{-1}$, generation time 은 3.01h이었다. 4. CHS -13균주(菌株)의 기질소비율(基質消費率)은 81%이었다. 5. CHS-13 균주(菌株)의 형태학적(形態學的) 배양학적(培養學的) 특성(特性)을 조사(調査)한 결과(結果) Candida guilliermondii var. guilliermondii 로 동정(同定)되었다. 6. CHS-13 균주(菌株)를 당화액(糖化液)에 배양(培養)시켰을 때 Lowry-protein 함량은 $0.72\;mg/m{\ell}$ 이었으며 , yeast extract 첨가(添加)하여 배양시(培養時)는 yeast extract 농도(濃度)가 증가(增加)함에 따라 단백질(蛋白質) 함량(含量)도 증가(增加)하였다. 7. CHS-13 균주(菌株)의 RNA 함량(含量)은 $4.92{\times}10^{-2 }\;mg/m{\ell}$이었으며 yeast extract 농도(濃度)가 증가(增加)함에 따라 증가(增加)하다가 농도(濃度) 0.2%에서 최대함량(最大含量)을 나타내고 그후는 감소(減少)하였다. To utilize several species of hard wood as raw materials of feed products, fermentation characteristics of cellulosic substrates to single cell protein was investigated, and results were summarized as follows. Among the microorganisms investigated, Tricoderma viride was selected as one of the most cellulolytic. Mixed culture of fungi did not show a synergistic effect on cellulose degradation. When the fungi were cultured at $28^{\circ}C$ for 7 days in a medium containing wheat bran 25 g, cellulose 0.25 g, proteose peptone 0.025 g and tween 800.025 g, cellulotic activities on carboxy methyl cellulose and filter paper reached maximum at 12 hr. The alkali treatment resulted in increased degradation of substrate from 13 to 18% when treated with enzymes for 12h, and reducing sugar formation increased with decreased size of substrates. Glucose was a very good feedback inhibitor of the enzyme from T.viride than that of xylose. When the substrate was rehydrolyzed, hydrolysis rate was 31% to reducing sugars within 12 hr. Quantative anlysis with HPLC showed the ratio of glucose to xylose in sugar syrups as 1.77 to 1. For the purpose of producing cellulosic-single cell protein from the sawdust of mulberry tree, 15 strains of xylose-assimilating yeast were isolated from 42 samples of rotten woods and compost soils and examined for their ability to utilize xylose. Then three strains were selected by their strong xylose-assimilating activities. The cultivative condition, the growth characteristics, and protein and nucleic acid productivities of three strains were investigated. The results obtained were, 1. Wood hydrolysate of mulberry tree was assimilated by 5 strains of CHS-2, CHS-3, ST-40, CHS-12 and CHS-13. 2. The optimum initial pH and temperature for the growth of strain CHS-13 were 4.4 and $30^{\circ}C$. 3. The specific growth rate of strain CHS-13 was $0.23h^{-1}$ and generation time was 3.01 hrs at the optimum condition. 4. CHS-13 strain assimilated 81 % of sugar in wood hydrolysate. 5. CHS-13 strain was identified as Candida guilliermondii var. guilliermondii 6. When the CHS-13 strain was cultured in the wood hydrolysate containing yeast extract, L-protein content was increased with yeast extract concentration. 7. The L-protein and nucleic acid yields from wood hydrolysate were 0.73 mg/ml and $4.92{\times}10^{-2}\;mg/ml$ respectively. 8. An optimal nucleic acid content of CHS-13 strain was observed in the medium containing 0.2% of yeast extract.

      • SCIEKCI등재

        Avicelase 생산성 Trichoderma sp . HK47 의 분리 동정 및 그 효소 특성

        이계호,박헌국 한국농화학회 1991 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.34 No.2

        결정성 cellulose를 분해할 수 있는 효소를 생산하는 미생물을 얻기 위하여 토양과 갈색으로 부식된 목재 부위로부터 screening test를 행하였다. Avicel 분해능이 우수한 8종의 균주를 분리하였으며, 그 중에서 avicel 분해능이 가장 우수한 HK47을 선정하여 형태학적 배양학적 특성을 확인함으로써 Trichoderma sp. HK47임을 동정하였다. 분리 선정 균주 Trichoderma sp. HK47에 대하여 avicel 분해효소 생산을 위한 배양 최적 조건을 조사하였다. 배지는 탄소원으로서 carboxymethylcellulose 1.5%, 질소원으로서 NaNO₃ 0.75%, KH₂PO₄, 0.5%, MgSO₄·7H₂O 0.1%, Tween 80 0.05%(v/v), 무기염류는 첨가치 않는 것이 최적이었으며, 배양조건으로서는 pH 6.0, 30℃에서 정치 배양하는 것이 최적이었다. 이 경우에 avicel 분해 효소의 생산량은 0.028U/ml이었다. Avicel을 분해하는 조효소의 특성을 조사한 결과 avicel분해 효소는 pH 5.0, 60℃에서 최대 활성을 나타내었으며, pH 5∼6, 20℃∼40℃까지에서 pH 안정성 및 열안정성을 보여 주었다.

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