Single Cell Dissociation Methods for Flow Cytometric Cell Death Analysis of Hypoxia-Ischemia Injured Newborn Rat Pup Brain

황종희,성동경,최창원,강샘,장윤실,박원순,이문향 대한소아청소년과학회 2005 Clinical and Experimental Pediatrics (CEP) Vol.48 No.5

Purpose:Newborn brain tissue has to be dissociated into a single cell suspension for flow cytometric analysis of cell death during hypoxia-ischemia. Thus the development of a method to dissociate cells from the brain tissue with least damage and maintenance of membrane and antigen integrity remains the challenge for the in vivo application of this technique. We evaluated the efficacy of mechanical or enzymatic (collagenase or tryspin) methods of brain tissue disaggregation. Methods:The extent of the damage to the plasma membrane and loss of the characteristics of the membrane induced with each dissociation method was determined by comparing the flow cytometric results labeled with both fluorescent annexin V and propidium iodide of the newborn rat pup brain tissue in the control group (n=10) and in the 48-hour after hypoxia-ischemia group (n=10). Results:In the control group, the cell percentage of damaged, apoptotic and necrotic cells of both hemispheres with the mechanical dissociation method was significantly increased compared to the trypsin or collagenase method. In the 48-hour after hypoxia-ischemia group, the cell percentage of apoptotic and necrotic cells of the right hemisphere with the collagenase method significantly increased, and live cells significantly decreased compared to the left hemisphere, control group. Although the same trend was observed, the extent of alterations made with the trypsin method was significantly less compared to the collagenase method. Conclusion:The dissociation of neonatal brain tissue for flow cytometric analysis with collagenase was most efficacious with the least cell damage and preservation of the plasma membrane characteristics 저산소성 허혈성 뇌손상이 유발된신생백서에서 단일세포의 분리성균관대학교 의과대학 삼성서울병원 소아과,삼성생명과학연구소*황종희·성동경*·최창원·강 샘*장윤실·박원순·이문향목 적 : 저산소성 허혈성 손상을 받은 신생아의 뇌조직에서 유세포 방법을 통해 세포의 사멸을 분석하기 위해서는 단일세포의 분리가 이루어져야 한다. 본 연구는 세포 분리에 있어서 세포막의 소실을 최소화하고 항원성을 유지하기 위하여 물리적인 방법과 효소 처리를 통한 세포 분리방법의 효율성에 대해 알아보고자 하였다.방 법 : 생후 7일된 10마리의 SD 신생백서에 우측 경동맥 결찰 후, 8% 산소에 노출시켜 저산소성 허혈증의 손상을 유발하였으며 48시간이 지난 후 뇌조직을 얻어 같은 수의 정상 대조군과 비교하였다. 세포 분리는 물리적인 방법(pipette)과 효소 처리(trypsin 및 collagenase) 방법을 통하여 이루어 졌으며, 세포막의 손상 정도와 범위에 대해서는 annexin V 및 propidium iodide의 형광 염색을 통한 유세포 분석방법을 이용하였다.결 과 : 정상 대조군에서, 물리적인 방법을 통한 세포 분리가 양반구 모두에서 효소 처리를 한 경우에 비해서 세포의 사멸과 괴사가 통계적으로 유의하게 증가하였다. 저산소성 허혈증을 유발한 군 중, collagenase를 이용하여 세포 분리를 시행한 경우에서 우측 반구의 세포 사멸과 괴사의 비율이 좌측 반구 및 정상 대조군 보다 유의하게 증가하였다. 효소 처리를 통한 세포 분리에서는 서로 유사한 경향을 보였으나, trypsin을 이용한 경우가 collagenase를 이용한 경우에 비해 세포 변화의 정도가 유의하게 감소하였다.결 론:신생아의 뇌조직에서 collagenase를 이용한 단일 세포 분리방법이 세포막의 손상을 최소화하면서 세포막의 성상을 보존할 수 있는 가장 유용한 방법이었다.

미숙아의 감염 관리

황종희 대한외과학회 2012 대한외과학회 학술대회 초록집 Vol.2012 No.11

태양전지용 기판재료 시장동향

황종희,최의석 한국세라믹학회 2005 세라미스트 Vol.8 No.5

Mucolipidosis

황종희,백경훈,진동규,Hwang, Jong-Hui,Baek, Gyeong-Hun,Jin, Dong-Gyu 대한유전성대사질환학회 2002 대한유전성대사질환학회지 Vol.2 No.1

저자들은 조악한 얼굴과 관절의 구축 등 Hurler 증후군과 유사한 임상 증상을 보이면서 혈장에서 리소좀 효소 활성도의 증가를 보였던 Mucolipidosis 2례를 경험하였기에 보고하는 바이다.

Use of in vivo magnetic resonance spectroscopy for studying metabolic diseases

황종희,최철수 생화학분자생물학회 2015 Experimental and molecular medicine Vol.47 No.-

Owing to the worldwide obesity epidemic and the sedentary lifestyle in industrialized countries, the number of people with metabolic diseases is explosively increasing. Magnetic resonance spectroscopy (MRS), which is fundamentally similar to magnetic resonance imaging, can detect metabolic changes in vivo noninvasively. With its noninvasive nature, 1H, 13C and 31P MRS are being actively utilized in clinical and biomedical metabolic studies to detect lipids and important metabolites without ionizing radiation. 1H MRS can quantify lipid content in liver and muscle and can detect other metabolites, such as 2-hydroxyglutarate, in vivo. Of interest, many studies have indicated that hepatic and intramyocellular lipid content is inversely correlated with insulin sensitivity in humans. Thus, lipid content can be utilized as an in vivo biomarker for detecting early insulin resistance. Employing 13C MRS, hepatic glycogen synthesis and breakdown can be directly detected, whereas 31P MRS provides in vivo adenosine triphosphate (ATP) synthesis rates by saturation transfer methods in addition to ATP content. These in vivo data can be very difficult to assess by other methods and offer a critical piece of metabolic information. To aid the reader in understanding these new methods, fundamentals of MRS are described in this review in addition to promising futureapplications of MRS and its limitations.

이온강화 소다라임 유리의 열처리에 따른 강화 풀림현상

황종희,임태영,이미재,김진호,Hwang, Jonghee,Lim, Tae-Young,Lee, Mi Jai,Kim, Jin-Ho 한국세라믹학회 2015 한국세라믹학회지 Vol.52 No.1

Recently, the use of ion-exchange strengthened glass has increased sharply, as it is now used as the cover glass for smart phone devices. Therefore, many researchers are focusing on methods that can be used to strengthen ion-exchange glass. However, research on how the improved strength can be maintained under thermal environment of device manufacturing is still insufficient. We tested the degradation of the characteristics of ion-exchange soda-lime glass samples, including their surface compressive stress characteristics, the depth of the ion-exchange layer (DOL), flexural strength, hardness, and modulus of rupture (MOR) values. Degradation of the characteristics of the ion-exchange glass samples occurred when they were heat-treated at a temperature that exceeded $350^{\circ}C$.

미숙아에서 최적의 환기 요법: 고탄산혈증 허용

황종희 대한신생아학회 2014 Neonatal medicine Vol.21 No.2

Bronchopulmonary dysplasia associated with lung injury is an important morbidityin extremely low birth weight infants. Lung injury during mechanical ventilationis associated with high tidal volume and high end-inspiratory lung volume. Lunginjury and bronchopulmonary dysplasia may be prevented with ventilatorystrategies using optimal gas exchange such as permissive hypercapnia. Thisarticle will review the pathophysiologic background of lung injury and the currenttherapeutic ventilatory strategies such as permissive hypercapnia to reduce lunginjury in preterm infants. 폐손상과 관련된 기관지폐 이형성증(bronchopulmonary dysplasia)은 초극소 저체중 출생아 (extremely low birth weighinfants)에서 중요한 이환율의 하나로 알려져 있는데, 기계환기 동안에 폐손상이 발생하는 기전으로 높은 일회호흡량(tidal volume)과 높은 흡기말폐용량(end expiratory volume)과 관련되어 있다. 일부 연구에서는 고탄산혈증 허용(permissive hypercapnia)과 같은 기계환기 전략이 폐손상과 기관지폐 이형성증을 예방할 수 있는 것으로 되어 있는데이에 미숙아에서 폐손상의 병태 생리적 영향과 폐손상을 감소시키기 위한 고탄산혈증 허용과 같은 최신 치료에 대한이해가 필요할 것이다.

OLED 레이저 실링용 글라스 프릿에서 V2O5 함량 및 가소성 분위기가 접합 특성에 미치는 영향

황종희,정현진,이미재,이영진,김진호,전대우,이정수,양윤성,육수경,박태호,문윤곤 한국전기전자재료학회 2016 전기전자재료학회논문지 Vol.29 No.8

In this study, the effect of vanadium oxide (V2O5) content and pre-sintering atmosphere on sealingproperty of glass frit that consisted of V2O5-BaO-ZnO-P2O5-TeO2-CuO-Fe2O3-SeO2 was investigated by XPS (X-rayphotoelectron spectroscopy). The content of V2O5 was changed to 15, 30, and 45 mol%, and the pre-sintering wascarried out in air and N2 condition, respectively. XPS analysis conducted before and after laser irradiation withidentical sample. Before laser treatment, glass frits that were pre-sintered at air condition showed both V4+and V5+,but the valence state was changed to V5+ after laser irradiation when the glass frits contained 30 and 45 mol%V2O5; this change led to non-adhesive property. On the other hand, glass frits that were pre-sintered at N2condition exhibited only V4+ and it showed fine adhesion irrespective of the V2O5 content. As a result, theexistence of V4+ seems to be a major factor for controlling the adhesive property of glass frit for laser sealing. 본 연구에서는 XPS 분석법을 이용하여 V2O5-BaO-ZnO-P2O5-TeO2-CuO-Fe2O3-SeO2 조성의 레이저 실링용 글라스 프릿에서 V2O5 함량 및 가소성 분위기가 접합 특성에 미치는 영향에 대해 고찰하였다. 글라스 프릿의 주성분인 V2O5 함량은 15, 30, 45 mol%으로 변화 시켰으며, 각각 대기 및 질소 분위기에서 가소성하였다. 레이저 조사 전, 대기 분위기에서 가소성한 모든 글라스 프릿 내 V은 V4+와 V5+ 상태로 모두 존재하지만, 레이저 조사 후에는 글라스 프릿의 V2O5 함량에 따라 V4+ 또는 V5+만 존재하였다. 특히, 레이저 조사 후, 유리 내 V5+만 존재할 경우에는 접합이 되지 않았다. 반면, 질소 분위기에서 가소성한 모든 글라스 프릿에는 V4+만 존재하는 것을 확인하였으며, 레이저 조사 후에도 V4+만 존재하였고 모두 접합이 잘 되었다. 따라서, 레이저 조사 후 글라스 프릿 내 V4+의 존재가 레이저 실링용 글라스 프릿의 접합 특성을 결정하는 주요한 요소로 작용하는 것으로 판단된다.

The Efficacy of Clinical Strategies to Reduce Nosocomial Sepsis in Extremely Low Birth Weight Infants

황종희,최창원,장윤실,최연호,박원순,신손문,이문향,이상일 대한의학회 2005 Journal of Korean medical science Vol.20 No.2

The aim of this study was to evaluate the efficacy of clinical strategies to reduce nosocomial sepsis (NS) in extremely low birth weight infants (ELBWI) less than 1,000 g. Data from the period before (P1, 1995-2000) and after (P2, 2001-2002) implementation of the strategies were collected and analyzed. The intervention strategies included restriction of antibiotic therapy, less use of invasive procedures such as umbilical vessel catheterization and endotracheal intubation, establishment of guidelines for hand-washing, infant handling, and central intravascular line man-agement. NS was defined as positive blood cultures in symptomatic patients after the third day of life with the use of antibiotics for more than 5 days. Although the gestational age (GA) and birth weight (BW) were significantly lower in P2 (GA 26.7 ±2.1 wk; BW 796 ±130 g) compared to P1 (GA 27.2 ±1.6 wk; BW 857 ±121 g), the incidence of NS decreased significantly from 70% (69/99) in P1 to 17% (24/71) in P2 with the implementation of the intervention strategies. The coagulase nega-tive Staphylococcus infection was also significantly reduced from 34% in P1 to 11% in P2. The implementation of the clinical strategies was quite effective in reducing the incidence of NS in ELBWI.

중증 고빌리루빈혈증(혈청 빌리루빈 >25 mg/dL)의 발병 원인과 치료 및 예후

황종희,이지현,김유진,구수현,이장훈,최창원,장윤실,박원순 대한소아청소년과학회 2005 Clinical and Experimental Pediatrics (CEP) Vol.48 No.10

Purpose : The present study examined the etiology, management, and the difference of prognosis according to methodology of treatment in severe hyperbilirubinemia with total serum bilirubin levels of more than 25 mg/dL. Methods : Medical records of severe hyperbilirubiemia in newborns(serum level=25 mg/dL) admitted to the NICU of Samsung Medical Center between October 1994 and June 2004 were reviewed retrospectively. Infants were grouped according to methodology of treatment : Group I(phototherapy only, n=42), Group II(exchange transfusion, n=6). And In addition, we evaluated the etiology and the difference of prognosis. Results : A total of 48 documented cases of severe hyperbilirubinemia were identified. Birth weight was significantly lower in Group 2(2,852±1,085 g) compared to Group 1(3,137±437 g)(P<0.05). There were no significant differences in gestational age, sex, mode of delivery, inborn, age at presentation, and age at first examination and admission between the two study groups. Maximal bilirubin level was significantly higher in Group 2(45±16 mg/dL) compared to Group 1(29±6 mg/dL) (P<0.05). But there were no significant differences in neurologic outcome. Conclusion : Our study suggests that the present guidelines for managing hyperbilirubinemia in newborns should be effective but follow-up with the first postnatal week would be necessary for each detection and treatment in the newborn infants with high risk of severe hyperbilirubinemia. 목 적 : 저자들은 혈청 빌리루빈 25 mg/dL 이상의 중증 고빌리루빈혈증의 발병 원인과 치료 및 예후에 대해 알아보고자 하였다. 방 법 : 1994년 10월부터 2004년 6월까지 성균관대학교 삼성서울병원 신생아 집중치료실에 입원하여 고빌리루빈혈증으로 진단 받은 환아들 중 혈청 빌리루빈치가 25 mg/dL 이상이면서 다른 동반 질환을 가지지 않고 추적관찰이 가능했던 48명을 대상으로 하여 치료 방법에 따라 광선치료군(1군, n=42)과 교환수혈군(2군, n=6)으로 분류하고 인구 통계학적 특징, 발병 시기, 발병 원인 및 치료에 따른 예후의 차이에 대해서 후향적으로 조사하였다.결 과 : 재태주령은 두 군간(1군; 39±1주, 2군; 37±4주)에 유의한 차이가 없으며 출생체중은 2군(2,852±1,085 g)이 1군(3,137±437 g)에 비해 유의하게 작았으나(P<0.05), 2군에서 820 g의 환아가 포함되어 있어 통계적인 영향을 주었다. 발병 원인으로는 두 군 모두 특발성이 가장 많았으며 황달의 첫 임상적 발현 시기, 첫 혈청 빌리루빈 검사 시기 및 입원 시기는 군 간에 유의한 차이가 없었다. 최고 혈청 빌리루빈치는 1군(29±6 mg/dL)에 비해 2군(45±16 mg/dL)에서 더 의미 있게 증가하였고(P<0.05), 치료 기간, 치료 후 혈청 빌리루빈의 감소 정도 및 신경학적 예후는 군간에 차이가 없었다.결 론:증증 고빌리루빈혈증의 치료에 있어서 현재의 치료 지침으로도 적절한 치료가 이루어질 수 있으나 조기 진단 및 치료를 위해서는 중증 고빌리루빈혈증의 위험성이 높을 경우 생후 1주일 이내에 황달에 대한 추적 관찰이 필요할 것으로 사료된다.