[대충청방문의 해 현장을 가다] 충북의 오케스트라로 성장 위해 끊임없이 정진

황문옥 충북연구원 2010 앞,뒤 바라보다 Vol.- No.4

Pseudomonas maltophilia N246의 Alkane Hydroxylation System 관련 유전자들의 분자적 클로닝

황문옥,이나리,민경희 숙명여자대학교 자연과학연구소 1993 자연과학논문집 Vol.- No.4

Pseudomonas maltophilia N246의 OCT plasmid로부터 alkane hydroxylase 유전자를 클로닝하였다. 삽입하는 DNA 크기를 최소화하기 위하여 pUC19의 HindIII site에 subcloning 한 결과 약 4.1 kb의 DNA 절편을 얻을 수 있었다. 제한효소 EcoRI, HindIII, BamHI, PstI, XbaI, SmaI, AccI, PvuII, EcoRV를 이용하여 이 DNA 절편의 제한효소 지도를 작성하였다. E. coli 내에서의 이 유전자의 발현을 조사한 결과 형질전환주들은 alkane hydroxylase 유전자들을 포함하고 있음을 알 수 있었다. Genes coding for alkane hydroxylase, the first step of n-alkane hydroxylation, from OCT plasmid in Pseudomonas maltophilia N246 were cloned in E. coli JM101. The cloned DNA was subcloned to be 4.1 kb DNA fragment in HindIII site of pUC19. This DNA fragment containing the essential genes of alkane hydroxylase was mapped with restriction enzymes EcoRI, HindIII, BamHI, PstI, XbaI, SmaI, AccI, PvuII and EcoRV. These gene expression in transformant E. coli JM101 was examined on the bases of growth on minimal plate containing n-alkane and indicated that transformants had alkane hydroxylase genes.

Pseudomonas maltophilia N246의 Alkane Hydroxylation System 관련 유전자들의 분자적 클로닝

황문옥 이나리 민경희 숙명여자대학교 자연과학연구소 1993 자연과학논문집 Vol.- No.4

Genes coding for alkane hydroxylase, the first step of n-alkane hydroxylation, from OCT plasmid in Pseudomonas maltophilia N246 were cloned in E. coli JM101. The cloned DNA was subcloned to be 4.1 kb DNA fragment in HindIII site of pUC19. This DNA fragment containing the essential genes of alkane hydroxylase was mapped with restriction enzymes EcoRI, HindIII, BamHI, PstI, XbaI, SmaI, AccI, PvuII and EcoRV. These gene expression in transformant E. coli JM101 was examined on the bases of growth on minimal plate containing n-alkane and indicated that transformants had alkane hydroxylase genes. Pseudomonas maltophilia N246의 OCT plasmid로부터 alkane hydroxylase 유전자를 클로닝하였다. 삽입하는 DNA 크기를 최소화하기 위하여 pUC19의 HindIII site에 subcloning 한 결과 약 4.1 kb의 DNA 절편을 얻을 수 있었다. 제한효소 EcoRI, HindIII, BamHI, PstI, XbaI, SmaI, AccI, PvuII, EcoRV를 이용하여 이 DNA 절편의 제한효소 지도를 작성하였다. E. coli 내에서의 이 유전자의 발현을 조사한 결과 형질전환주들은 alkane hydroxylase 유전자들을 포함하고 있음을 알 수 있었다.

OCT 플라스미드를 갖는 원유 분해세균에 의한 Octane 분해능

최순영 김창숙 이명혜 황문옥 민경희 숙명여자대학교 자연과학연구소 1991 자연과학논문집 Vol.- No.2

Xanthomonas campestris M12. Xanthomonas sp. M28. Acinetobacter lwoffi G1, and Klebsiella pneumoniae L25, Pseudomonas maltophilia N246 were screened to increase the ability for crude oil utilization. All of these could utilize hexadecane and octane with the exception of N 246 strain for only octane biodegradation. Thus N246, M12, and M28, strains were specially examined for octane oxidation. Octane biodegradation by three strains showed the optimal conditions at 30C, pH7.0∼9.0 and 0.2∼0.3% octane concentration as a substrate. It was found that P. maltophila N246 and X. campestris M12 had plasmid and the cured plasmid from N246 strain lost octane utilization. Therefore, it was confirmed that certain genes for octane utilization were located on OCT plasmid in N246 strain. The size of OCT plasmid in N246 strain was 118 kb. The N246 strain was resistant to ampicillin. 원유 분해세균에 의한 원유 분해능을 조사한 결과, Xanthomonas campestris M12. Xanthomonas sp. M28, Acinetobacter lwoffi G1, and Klebsiella pneumoniae L25, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 등의 순서로 나타났다. Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp. M28, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 균주 모두 octane 분해시의 온도는 30℃에서 최적이었으며, 최적 pH는 X. campestris M12와 Xanthomonas sp. M28이 7.0∼7.5이었고, P. maltophilia N246이 7.5∼9.0이었다. N246 균주의 최적 NaCl 농도는 3.0∼3.5%이었다. P. maltophilia N246와 X. campestris M12는 모두 플라스미드를 갖고 있음을 확인하였고, N246 균주로부터 플라스미드를 제거하였을 경우 octane 분해능이 소실되었으므로 이 플라스미드 위에 octane 분해 유전자가 있음이 확인되었다. 이 균주의 OCT 플라스미드의 크기는 118kb이었다. 또한, N246 균주는 ampicillin 항생제에 내성을 나타내었다.

Pseudomonas Maltophilia 의 Alkane Hydroxlase Components 의 관련 유전자들의 분리 및 물리적 구조

이나리,황문옥,정구흥,민경희 한국미생물생명공학회 1993 한국미생물생명공학회 학술발표초록집 Vol.1993 No.1

Xanthomonas campestris M12에 의한 포화 탄화수소의 생분해

최순영,이명혜,황문옥,민경희,Choi, Soon-Young,Lee, Myung-Hye,Hwang, Moon-Ok,Min, Kyung-Hee The Microbiological Society of Korea 1994 미생물학회지 Vol.32 No.2

Xanthomonas campestris M12는 octane을 분해할 수 있는 OCT 플라스미드를 갖고 있으며, 이 플라스미드의 분해 능력으로 $C_8$에서 $C_{16}$까지의 n-alkane을 이용할 수 있었다. X. campestris M12 균주는 n-alkane을 이용하여 alcohol, aldehyde, fatty acid를 거쳐서 분해할 수 있으나 heanoic acid, adipic acid, pimelic acid 그리고 heptanal은 이용할 수 없었다. 또한 이 균주는 straight fatty acids의 monoterminal oxidation과 diterminal oxidation에 의하여 n-alkane을 분해할 수 있으며, branched-chain alkane도 이용할 수 있었다. Xanthomonas campestris M12 carrying OCT plasmid which could dissimilate octane was able to utilize n-alkanes of eight to sixteen carbon atoms via the capacity of this plasmid. M12 strain could utilize terminal oxidation products of these primary, alkanes, alcohols, aldehydes and fatty acids but not hexanoic acid, adipic acid, pimelic acid and heptanal. This strain also biodegraded n-alkanes by monoterminal or diterminal oxdation of straight-chain fatty acids, and branched-chain alkane.

Xanthomonas campestris 에 의한 원유분해에 미치는 원유성분과 온도의 영향

최순영,이명혜,황문옥,이창섭,민경희 한국물환경학회 1991 한국물환경학회지 Vol.7 No.1

Four crude oils (Arabian light, Iran light, Oman, Libya) of different chemical composition were tested as to their biodegradability under mesophilic condition. Changes of the chemical composition of the crude oils by Xanthomonas campestris M12 were monitored using the gas-liquid chromatography. The ability of X. campestris M12 to use crude oil as a sole carbon source was not dependent on the composition of the n-saturate or aromatic fraction, but on that of the asphaltic fraction. The biodegradability of the Arabian light crude oil was found to be highly dependent on an incubation temperature. It was shown that addition of 0.1 % tween 80 to the incubation medium increased bacterial growth and biodegradability at 30℃ rather than that at 37℃.

OCT 플라스미드를 갖는 원유 분해세균에 의한 Octane 분해능

최순영,김창숙,이명혜,황문옥,민경희 한국산업미생물학회 1991 한국미생물·생명공학회지 Vol.19 No.1

원유 분해세균에 의한 원유 분해능을 조사한 결과, Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp. M28, Acintobacter lwoffi G1, Klebsiella pneumoniae L25, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 등의 순서로 나타났다. Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp. M28, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 균주 모두 octane 분해시의 온도는 30℃에서 최적이었으며, 최적 pH는 X. campestris M12와 Xanthomonas sp. M28이 7.0∼7.5이었고, P. maltophilia N246이 7.5∼9.0이었다. N246 균주의 최적 NaCl 농도는 3.0∼3.5%이었다. P. maltophilia N246와 X. campestris M12는 모두 플라스미드를 갖고 있음을 확인하였고, N246 균주로부터 플라스미드를 제거하였을 경우 octane 분해능이 소실되었으므로 이 플라스미드 위에 octane 분해 유전자가 있음이 확인되었다. 이 균주의 OCT 플라스미드의 크기는 118kb이었다. 또한, N246 균주는 ampicillin 항생제에 내성을 나타내었다. Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp. M28, Acinetobacter lwoffi G1, and Klebsiella pneumoniae L25, Pseudomonas maltophilia N246 were screened to increase the ability for crude oil utilization. All of these could utilize hexadecane and octane with the exception of N246 strain for only octane biodegradation. Thus N246, M12, and M28, strains were specially examined for octane oxidation. Octane biodegradation by three strains showed the optimal conditions at 30℃, pH 7.0∼9.0, and 0.2∼0.3% octane concentration as a substrate. It was found that P. maltophila N246 and X. campestris M12 had plasmid and the cured plasmid from N246 strain lost octane uitilization. Therefore, it was confirmed that certain genes for octane utilization were located on OCT plasmid in N246 strain. The size of OCT plasmid in N246 strain was 118 kb. The N246 strain was resistant to ampicillin.

OCT 플라스미드를 갖는 원유 분해세균에 의한 Octane 분해능

최순영,김창숙,이명혜,황문옥,민경희 숙명여자대학교 자연과학연구소 1991 자연과학논문집 Vol.- No.2

원유 분해세균에 의한 원유 분해능을 조사한 결과, Xanthomonas campestris M12. Xanthomonas sp. M28, Acinetobacter lwoffi G1, and Klebsiella pneumoniae L25, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 등의 순서로 나타났다. Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp. M28, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 균주 모두 octane 분해시의 온도는 30℃에서 최적이었으며, 최적 pH는 X. campestris M12와 Xanthomonas sp. M28이 7.0∼7.5이었고, P. maltophilia N246이 7.5∼9.0이었다. N246 균주의 최적 NaCl 농도는 3.0∼3.5%이었다. P. maltophilia N246와 X. campestris M12는 모두 플라스미드를 갖고 있음을 확인하였고, N246 균주로부터 플라스미드를 제거하였을 경우 octane 분해능이 소실되었으므로 이 플라스미드 위에 octane 분해 유전자가 있음이 확인되었다. 이 균주의 OCT 플라스미드의 크기는 118kb이었다. 또한, N246 균주는 ampicillin 항생제에 내성을 나타내었다. Xanthomonas campestris M12. Xanthomonas sp. M28. Acinetobacter lwoffi G1, and Klebsiella pneumoniae L25, Pseudomonas maltophilia N246 were screened to increase the ability for crude oil utilization. All of these could utilize hexadecane and octane with the exception of N 246 strain for only octane biodegradation. Thus N246, M12, and M28, strains were specially examined for octane oxidation. Octane biodegradation by three strains showed the optimal conditions at 30C, pH7.0∼9.0 and 0.2∼0.3% octane concentration as a substrate. It was found that P. maltophila N246 and X. campestris M12 had plasmid and the cured plasmid from N246 strain lost octane utilization. Therefore, it was confirmed that certain genes for octane utilization were located on OCT plasmid in N246 strain. The size of OCT plasmid in N246 strain was 118 kb. The N246 strain was resistant to ampicillin.