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        한국인에서 Human Leukocyte Antigen-A, -B, -DR 대립유전자와 일배체형 빈도: 제대혈 1,500단위의 DNA 형별검사

        황동희,양윤선,홍혜선 대한진단검사의학회 2008 Annals of Laboratory Medicine Vol.28 No.6

        Background : The HLA system is known to be the most polymorphic genetic system in human, and HLA allele and haplotype distribution varies widely among different ethnic groups. This study was performed to examine the frequencies of HLA alleles and haplotypes in Koreans. Methods : We examined HLA-A, -B, and -DR alleles at the serologic level in 1,500 cord blood units obtained from Koreans using the PCR-sequence specific oligonucleotide (SSO) method. Allele and haplotype frequencies were estimated by the maximum likelihood method using the computer program developed for the 11th International Histocompatibility Workshop. Results : HLA alleles found in Koreans were 12 in A, 31 in B, and 13 in DR loci. Most frequent alleles with frequencies ≥10% in each locus in decreasing order of frequency were: A2, A24, A33, A11; B62; DR4, DR15, DR9, and DR13. Two-locus haplotypes with frequencies ≥0.1% were 104 A-B and 115 B-DR haplotypes, among which those with frequencies ≥1.0% showing significant positive linkage disequilibrium (P≤0.001) were 21 A-B and 20 B-DR haplotypes. A total of 169 AB- DR haplotypes with frequencies ≥0.1% were identified. The results were similar to those of a previous study in 1,600 Koreans, although some differences were noted in the distribution of some less frequent alleles or haplotypes with frequencies ≤0.5%. Conclusions : We provided the allele and haplotype frequencies of HLA-A, -B, and -DR in cord blood units of Korean ethnicity defined by a DNA typing method, which can be used as basic data on Koreans for organ transplantation and disease association studies. (Korean J Lab Med 2008;28: 465-74)

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        B형 간염항원 및 항체 검사를 위한 신속검사법과 정량적 효소면역법의 비교

        황동희,엄태현 대한진단검사의학회 2005 Annals of Laboratory Medicine Vol.25 No.3

        Background : Various assays including an enzyme immunoassay (EIA) are used to detect hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody (anti-HBs). Recently, an increasing number of institutions have been utilizing an immunochromatography assay (ICA), which is rapid and easy to use and does not require special instrumentation; however, it is known to be less sensitive than EIA. In this study, we evaluated two different ICA kits for the detection of HBsAg and anti-HBs, and the results were compared with EIA. Methods : A total of 400 serum samples, 100 each from HBsAg (+), HBsAg (-), anti-HBs (+) and anti-HBs (-) subjects, were assayed using two ICA kits (Daewoong, Genedia), and two chemiluminescence immunoassay (CIA) kits (ADVIA Centaur, ARCHITECT). The HBsAg and anti-HBs status had been determined by a microparticle enzyme immunoassay (AxSYM MEIA) at Seoul Paik Hospital. Results : When compared with the results of AxSYM MEIA, the sensitivity, specificity, and concordance rate of both of the ICAs for HBsAg were 97%, 100% and 98.5%, respectively. The concordance rate, sensitivity, and specificities of Daewoong rapid Anti-HBs were 84.5%, 83%, and 86%, and the respective figures for Genedia rapid Anti-HBs were 85%, 96% and 74%. Conclusions : The diagnostic performances of two ICAs for HBsAg were more than 97%; however, both ICAs failed to detect HBsAg in low reactive samples. The concordance rate of two ICAs for anti- HBs was lower than that of three quantitative immunoassays. The results of ICAs should be interpreted with caution, because the samples containing a relatively low reactivity by the quantitative immunoassay can show negative results for anti-HBs. 배경 : HBsAg 및 anti-HBs 검사는 혈청 검사 중 가장 의뢰가많은 검사항목으로 현재까지 enzyme i mmunoassay (EIA)를 포함한 다양한 검사방법이 사용되어 왔으나 최근에 오면서 면역크로마토그래피법(immunochromatography assay, ICA)의 사용이증가되고 있다. ICA법은 빠르고, 판정이 쉽고 특별한 기기가 필요없어 어디에서나 사용이 가능한 장점이 있으나 일반적으로 EIA보다 예민도가 떨어지는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 신속검사의 하나인 Daewoong (Daewoong Biotech, 한국)과 Genedia(Green Cross, 한국)의 HBsAg, anti-HBs 검사를 기존의 효소면역법을 이용한 정량검사와 비교하여 평가해 보고자 하였다.방법 : 인제대학교 서울백병원 종합검진센터에 내원한 건강검진환자의 검체 중 MEIA 검사시약인 AxSYM HBsAg, AUSAB(Abbott, USA)로 HBsAg 양성 및 음성 각 100검체, anti-HBs양성 및 음성 각 10검체를 대상으로 하여 CIA (chemilumines-cence immunoassay) 방법인 ADVIA Centaur, ARCHITECT와 2가지 ICA법 검사시약을 이용하여 HBsAg 및 anti-HBs 항체검사를 시행하였으며 AxSYM 결과를 중심으로 하여 ICA법의 일치도와 예민도, 특이도를 구하였다.결과 : HBsAg 검사에 있어서는 두 가지 ICA법을 AxSYM 결과에 비교하였을 때 둘 다 98.5% (197/200)의 일치율과 97%의예민도 및 100%의 특이도를 보였다. anti-HBs 검사는 3가지 정량검사 간에는 91.5%의 일치율을 보였으며 AxSYM 결과를 중심으로 신속검사 결과를 판정하였을 때 Daewoong anti-HBs의 경우는 84.5%의 일치율, 83%의 예민도, 86%의 특이도를 보였으며녹십자 anti-HBs의 경우는 85%의 일치율, 96%의 예민도와 74%의 특이도를 보였다. 결론 : HBsAg 검사에 있어서 두 가지 신속검사 모두 특이도, 예민도에 있어서 97% 이상의 우수한 결과를 나타내었으나 일부역가가 낮은 검체에서는 HBsAg을 검출하지 못하는 문제점을 보였다. Anti-HBs 검사에 있어서는 ICA법이 면역법을 이용한 정량검사에 대하여 85% 정도의 일치율을 보여 정량검사간 일치율인 91.5%에 비교하여 상대적으로 낮았으며, 낮은 역가의 검체에 있어서 음성을 보일 가능성이 높으므로 결과해석에 있어 주의가 필요할 것으로 생각된다.

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        한국인에서 수혈의 위험도 인식에 관한 연구

        황동희,엄태현,하미나 대한진단검사의학회 2009 Annals of Laboratory Medicine Vol.29 No.6

        Background: The perceived risks of blood transfusions are important to be considered in creating a blood service policy. We surveyed the perception of blood transfusion risks among Korean laypeople. Methods: A one-month nationwide telephone survey was conducted in September, 2007. The questionnaire was designed to assess the demographics of respondents, their responses to the term ‘blood transfusion’, and the perceived risks of a transfusion. A total of 500 interviews were completed. Results: The words evoked by the term ‘blood transfusion’ included blood, donation, AIDS, help, and patients. About one third (33.6-35.8%) of the respondents gave a moderate to high rating for the perceived risks of blood transfusions. More than half (55.6%) of the respondents agreed that the blood supply in Korea is safe, and 81.6% of the respondents agreed to be transfused when transfusion is needed. The perceived risk of a blood transfusion was greater in women than in men and in people who never had a transfusion than those who had. More men than women agreed that the blood supply in Korea is safe, and the proportion of respondents who agreed to be transfused when needed was higher in men and in less educated people. The relative perceived transfusion risk (scale of 10) was 4.5±2.3. Conclusions: The Koreans in the survey had a tendency of positive thinking about blood transfusions, and previous transfusion experiences appear to decrease the fear about transfusions. These results will be useful in understanding how Koreans think about the risks associated with transfusions. 배경 : 국민들의 수혈에 대한 위험도 인식 정도는 혈액 관련 정책의 수립을 고려할 때 중요하다. 저자들은 한국인 일반 국민 을 대상으로 수혈에 대한 인지 위험도를 조사하였다. 방법 : 2007년 9월에 1개월에 걸친 전국적인 전화설문조사를 실시하였다. 설문조사내용은설문응답자의일반적인특성,‘ 수 혈’이란 단어를 들었을 때의 응답자의 반응, 수혈에 대한 인지 위험도를 평가하기 위해 고안되었다. 최종 설문응답자는 500명 이었다. 결과 : 수혈에대해연상되는단어는‘피’,‘ 헌혈’,‘ 에이즈’, ‘도움을준다’,‘ 환자’등이었다. 대상자의약1/3 (33.6-35.8%) 에서 수혈이 중등도 이상의 위험을 가지고 있다고 대답하였다. 대상자의 과반수 이상(55.6%)이 한국에서 공급되는 혈액이 안 전하다고 생각하였고, 대상자의 약 81.6%가 수혈이 필요한 경우 에 혈액을 수혈 받겠다고 대답하였다. 여자가 남자보다, 그리고 수혈 경험이 없는 사람이 수혈 경험이 있는 사람보다 혈액에 대 해 위험하다고 인식하였다. 국내의 혈액공급이 안전하다고 생각 하는 비율은 남자가 여자보다 유의하게 높았으며, 필요 시 수혈 을 받겠다고 대답한 사람의 비율은 남자가 여자보다, 그리고 교 육 정도가 낮은 사람이 더 높았다. 수혈에 대한 상대적인 인지 위험도는 10점을 만점으로 할 때 평균 4.5±2.3점이었다. 결론 : 설문에 참가한 한국인은 수혈에 대해 긍정적인 인식을 보였으며 수혈에 대한 두려움의 정도는 이전의 수혈력 같은 직 접적인 경험이 있을 때 낮아지는 것으로 나타났다. 이러한 결과 는 한국인이 수혈의 위험에 대하여 어떻게 인식하는지 이해하는 데 유용할 것으로 생각된다.

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        오제스키병 바이러스 검출을 위한 Polymerase Chain Reaction

        황동희,여상건,Hwang, Dong-hee,Yeo, Sang-geon 대한수의학회 2003 大韓獸醫學會誌 Vol.43 No.2

        Polymerase chain reaction (PCR) was evaluated for the early detection of Aujeszky's disease virus (ADV) DNA from virus-infected cell cultures. For the purposes, the Korean ADV NYJ1-87 was propagated in swine kidney (SK) cells and subjected to the amplification of DNA (217 bp) by PCR using sense and antisense primers specific to gp50 gene of the ADV. In detection of cell-associated viral DNA, reliable PCR conditions were determined as 30 cycles of reaction consisting 1 minute each of denaturation at $94^{\circ}C$, annealing at $55^{\circ}C$ and polymerization at $72^{\circ}C$. The PCR encountered best results with reagent mixtures of $50{\mu}l$ containing $200{\mu}M$ dNTPs, $0.2{\mu}M$ each sense and antisense primers, 1 mM $MgCl_2$ and 10% (v/v) template DNA in the final concentrations. ADV-specific DNAs were detected as early as 6, 6, and 9 hours post-infection, respectively, from lysates of the SK cells infected with ADV of $10^3$, $10^2$ and $10^1\;TCID_{50}/ml$ by this condition. In culture supernatant, the DNAs were detected from ADV of as low infectivity as $10^ {-3}\;TCID_{50}/ml$ by the reduced reagent concentrations and 30 cycles of 1 minute each of denaturation at $94^{\circ}C$ and annealing at $55^{\circ}C$, and 2 minutes of polymerization at $72^{\circ}C$. The lowest amount of detectable ADV DNA was 1 fg. In conclusion, the PCR condition established in the present study was recognized as a feasible alternative to time-consuming procedures in isolation and characterization of the virus.

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